离子注入改良纤维分解细菌及其机理研究

对纤维分解细菌HY2进行不同剂量离子束注入诱变。通过研究离子注入对纤维素酶活性的影响。筛选出纤维素酶活性高的突变菌株HY2-3．通过聚合酶链式反应PCR技术扩增得到纤维素酶高产菌株Bacillus sp．HY2-3以及原始菌株Bacillus sp．HY2的纤维酶基因chy2-3和chy2．经过克隆和序列分析表明。所得到的突变型和野生型纤维素酶基因编码区均为1500bp．同时发现．经过离子束诱变得到的高产菌株和野生菌株的纤维素酶基因序列存在差别．这些碱基突变引起氨基酸序列的改变有可能导致两个菌株纤维素酶产量上的不同．     

木素酚的合成及其与酶的吸附特性

以木材为原料,彩和室温相分离方法制得了可回收利用的生物高分子材料木素酚,研究了木素酚对纤维素酶和木 蛋白酶的吸附和解吸特性。结果表明,木素酚对这两种酶均有较强的亲和力,且可以通过改变溶剂使之解吸分离,木素能方便地回收再利用,有望成为功能性生物高分子材料。     

提高纤维素酶水解效率和降低水解成本

在我国可大量转化乙醇的是纤维质材料。纤维质材料转化乙醇的关键问题是纤维质转化为糖的过程,提高纤维素酶转化效率的方法有:(1)对纤维质材料进行预处理;(2)研究纤维素酶的最适作用条件;(3)纤维素酶的重复利用;(4)合理的发酵工艺等。本文分析了纤维素的结构以及纤维素酶的作用方式,总结了目前研究较多的几种纤维质材料预处理方法,及其对纤维素酶水解率的影响,并对研究纤维素酶的最适作用条件、纤维素酶的重复利用以及合理的发酵工艺进行了综述和分析。     

纤维素酶水解老化纸张中纤维素物质的酶活力分析

应用3,5-二硝基水杨酸测定法,分析了纤维素酶水解老化纸张中纤维素物质的酶活力影响因素,根据酶活力确定了酶解反应条件。pH=4.8,温度为50℃,酶解时间为60min,加酶量为10kU/mL条件下,经纤维素酶水解后测得的还原糖量呈现一定的趋势,可以此来初步判定纸张纤维的老化程度。     

纤维素酶降解纤维素机理的研究

纤维素是自然界中含量最多的一类碳水化合物,同时它也是地球上数量最大的可再生资源。纤维素酶是一种高活性生物催化剂,在纤维素类资源的利用方面发挥重要的作用。本文综述了纤维素、纤维素酶的分子结构和纤维素酶对纤维素的降解机理,影响酶解的主要因素以及提高酶解效率的主要措施,并对纤维素酶研究存在的问题以及今后的发展作了进一步展望。     

高分子添加剂对纤维素酶糖化力的影响

研究了几种高分子材料对纤维素酶水解作用的影响,强聚阳离子(PⅠ、PⅡ)、中强聚阴离子(PⅢ)高分子材料能促进酶的糖化作用,而强聚阴离子(PⅣ)高分子材料则不能,添加PⅠ(1.3×10~(-1)mol/L)、PⅡ(1.3×10~3mol/L)、PⅢ(1.3×10~2mol/L)分别使纤维素酶棉花糖化力提高190％、45％、75％,初步探讨了高分子材料促进纤维素酶糖化力的机理。     

离子液体介质中纤维素酶降解纤维素的研究进展

以不可再生资源为原料和能源进行的传统加工工业正面临着资源日益枯竭的现实,所以对可再生资源的研究势在必行。在各种可再生资源中,纤维素生物质是唯一可再生的碳资源,具有取之不尽用之不竭的物质基础,被普遍认为将会部分替代或补充不可再生资源。但由于纤维素的超分子结构,传统的工艺很难将其降解转化,离子液体作为一种新型的绿色溶剂,不仅能够很好地溶解纤维素,同时也是纤维素酶解反应的良好溶剂。综述了国内外离子液体对纤维素溶解、再生以及降解的近期研究成果,分析了其中存在的问题,提出了离子液体降解纤维素的发展方向。     

纤维素酶降解-离子色谱法测定魔芋中的亚硝酸盐

建立了以纤维素酶降解魔芋葡甘聚糖释放阴离子,然后采用离子色谱测定亚硝酸盐含量的方法。考察了纤维素酶降解葡甘聚糖的最佳条件,结果表明:在50 ℃、pH 5.5条件下酶解24 h,可以释放出被包埋的亚硝酸盐。NO-2的检出限为0.039 mg/L,回收率为96.7%～97.8%。运用本法对施用稀土微肥后魔芋中亚硝酸盐的含量进行测定,发现施用稀土微肥能够在一定程度上降低魔芋中亚硝酸盐的含量。     

绿色木霉纤维素酶分子内氢键特征的研究

运用能够揭示蛋白质分子基团振动特征的激光拉曼光谱分析技术,对绿色木霉纤维素酶中的CBHⅡ在固态以及两种pH值的液态中酶分子内的氢键状态进行了分析。结果表明相对于纤维素酶固体干粉,液态中酶分子酰胺Ⅰ羰基氧原子作为氢键质子受体的能力为上升;酰胺Ⅱ与酰胺Ⅰ的β结构特征峰变化倾向相似。在3种样品中,酶蛋白中Trp均为强氢键供体,从成键能力方面证实了以往同类酶空间分析的结果。固体与pH 6.0水溶液酶蛋白中酪氨酸酚羟基成键能力也是强的。根据游离巯基分析可以判断绿色木霉CBHⅡ的成熟肽CBD与瑞氏木霉CBHⅡ的CBD有相似的二硫键构成。     

磁性纳米颗粒Fe3O4固定化纤维素酶的光谱学研究

以氨水作沉淀剂,用共沉淀法制备了磁性纳米颗粒Fe3O4,并以此为载体,通过碳化二亚胺的活化作用将纤维素酶固定化,通过傅里叶红外和重复多次催化实验证实纤维素酶在磁性纳米颗粒上的固定,透射电镜表征了固定化酶微粒的形貌.用DNS分光光度法测定固定化纤维素酶的活性,研究表明磁性固定化酶的催化作用的最适温度为60℃和pH值为3.94～5.50.结果表明,磁性固定化纤维素酶具有比自由酶更好的热稳定性,贮存稳定性和更广泛的pH值适用范围,为纤维素的转化和利用效率的提高提供了理论基础.