牛血清白蛋白的光损伤和光氧化机理

运用激光闪光光解瞬态吸收技术, 在266 nm激光激励下, 研究了牛血清白蛋白(BSA)光损伤和被SO4-·单电子氧化的反应机理, 表征了反应过程中生成的自由基. 结果表明, 在266 nm激光照射下, BSA可同时发生光电离和光激发, 生成色氨酸阳离子自由基(Trp/NH+·), 由Trp/NH+·快速脱质子形成的色氨酸中性自由基(Trp/N·)及色氨酸三重激发态(3Trp*), 3Trp*再与酪氨酸(Tyr)发生分子内电子转移生成酪氨酸中性自由基(Tyr/O·). 在SO4-·单电子氧化的反应中, 借助减谱技术, 求得BSA中Tyr和色氨酸(Trp)自由基的表观生成速率常数, 但未发现分子内电子转移现象, 阐明了SO4-·自由基是通过与BSA中的Tyr和Trp发生电子转移反应来氧化BSA的, SO4-·氧化BSA的反应速率常数为1.51×10¹⁰ L·mol^-1·s^-1, 从而为进一步研究血清白蛋白的氧化还原代谢过程提供理论基础.     

偶氮氯膦Ⅰ分光光度法测定血清蛋白质的效果分析

在Na2HPO4-柠檬酸酸性缓冲液中,加入非离子表面活性剂聚氧乙烯月桂醚（Brij-35）,使偶氮氯膦Ⅰ（CPA—Ⅰ）与牛血清白蛋白形成复合物,复合物的最大吸收波长在570nm,比试剂本身红移了70nm,表观摩尔吸光系数为5．88×10^4L／（mol·cm^-1）,线性范围0—166mg／L,采用分光光度法研究该结合反应的最佳反应条件,并据此建立了一种测定血清蛋白质的新方法。结果表明,该法回收率为98．7％～102．2％,批内变异系数为2．4％,血清用量少,线性范围宽,具有操作快速、简便、结果灵敏可靠等优点,与双缩脲法相关性良好。     

驯牛士

美国的牛仔们经常参加驯牛比赛,要降服这些体长2米左右,身高约1.5米,体重在400—500千克的大家伙,牛仔们得使出浑身解数。     

高压与加热协同处理对牛肌肉中蛋白酶活性的影响

在不同温度(20～60℃)和压力(0.1～600 MPa)下处理20 min,对牛肌肉中蛋白酶活性的影响进行了研究.结果显示:室温下,随着处理压力的增加,酶的活力显著下降,而压力达400 MPa及以上时,酶的活力则没有明显变化,同时在pH值为3和7.5时酶的活性几乎完全丧失.200 MPa以下的压力处理使肌肉中游离氨基...     

流动注射-石英晶体微天平中血清蛋白对扁桃酸的手性识别

采用流动注射-石英晶体微天平(FIA-QCM)和紫外光谱法研究了牛/羊血清蛋白(BSA和GSA)与扁桃酸的手性识别。 在QCM表面,BSA和GSA的浓度分别为4.9×10-12和8.8×10-12 mol/cm2。 血清蛋白与R-扁桃酸(R-MA)作用引起QCM振动频率变化值比S-扁桃酸(S-MA)大;相应紫外结合常数也比与S-MA大,说明血清蛋白对R-MA的作用强于与S-对映体。 从识别因子分析,GSA对扁桃酸的手性识别能力优于BSA。     

Ratiometric Fluorescent Probe Based on Novel Red-emission BODIPY for Determination of Bovine Serum Albumin

A novel red-emission boron-dipyrromethene（BODIPY） dye with a pyrrole ring was synthesized simply via one-pot reaction. The spectral properties of it were investigated under the conditions of different solvents. The results show that the as-prepared BODIPY dye is extremely sensitive to solvent polarity, and the fluorescent emission enhances with the decrease of solvent polarity. In aqueous buffer, the addition of bovine serum albumin leads to a ratiometric change in absorption spectra with an association constant of 1.16×10^6 L/mol. Meanwhile, the fluorescence emission increases greatly at 622 nm but changes slightly at 575 nm. The response time is very short（less than 3 min）, and the changes of color can be noticed by naked eyes. Bovine serum albumin can be detected by this ratiometric fluorescence probe, but other proteins or enzymes cannot be detected by this method, which indicates that this novel dye has high selectivity towards bovine serum albumin. The reason is that bovine serum albumin has suitable hydro- phobic cavities for binding with the dye. In addition, the dye molecule can penetrate cell membrane easily and make a fast fluorescent stain, which makes it a potential probe for living-cell fluorescence imaging.     

基于共振瑞利散射法的人血清蛋白浓度的研究

文章针对人标准血清总蛋白浓度的定量测定, 建立了以四羧基金属酞菁锌为光谱探针检测蛋白质的共振光散射的新方法。该方法的实质是将人标准血清总蛋白和酞菁锌溶液混合, 当光源照射到样品池中的混合液时, 将激发出强烈的共振瑞利散射荧光信号, 根据信号强度的强弱, 计算血清蛋白浓度的大小。自行设计的测试装置采用了薄壁试管的样品皿, 减小了激光光波穿过溶液时的光程, 可得到更强的探测信号。测试结果表明: 根据数字示波器显示的探测器信号, 可得出电压的峰峰值, 体现了荧光的大小, 从而可以进一步计算出血清蛋白的浓度。     

3-羟基-6-[(4-羧基苯基)偶氮]-苯甲酸与牛血清蛋白结合反应的荧光光谱

采用荧光光谱研究3-羟基-6-[(4-羧基苯基)偶氮]-苯甲酸(HCPAB)与牛血清蛋白(BSA)的相互作用.通过测定298K和310K下HCPAB与BSA的荧光猝灭光谱,计算得到荧光猝灭常数、反应的结合常数、结合位点数及热力学参数,得出这种荧光猝灭机理符合静态猝灭;由Foerster能量转移机理,计算了当BSA与HCPAB比例为1∶1时分子间距离r=3.18nm和能量转移效率E=0.23,并由同步荧光光谱显示HCPAB与BSA的结合位点更接近于色氨酸.     

桂皮酸-8-羟基喹啉稀土配合物的合成、表征及与牛血清白蛋白的作用

合成了以桂皮酸、8-羟基喹啉为配体,以镱、铕为中心离子的稀土配合物,采用元素分析、摩尔电导、红外光谱、紫外光谱和荧光光谱法进行表征,并采用紫外光谱和荧光光谱研究了配合物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明,随着配合物浓度的增加,BSA紫外光谱表现出明显的增色效应,配合物可有规律地猝灭BSA的荧光。     

牛血清白蛋白与偶氮胂Ⅲ-镱?结合反应及其应用

研究了在酸性溶液中BSA与偶氮胂Ⅲ-镱(Ⅲ)络合物的结合反应.发现加入BSA后偶氮胂Ⅲ-镱?的吸收光谱产生减色效应和红移,探讨了实验条件对结合反应的影响.随着BSA量的增加,650 nm吸收峰线性下降,基于此建立了蛋白质定量分析方法,并运用于实际样品的测定,结果与紫外分光光度法测得的结果吻合.用分光光度法研究BSA与偶氮胂Ⅲ-镱?之间的结合模型,发现结合反应符合Scatchard模型.进一步的研究发现BSA与阳离子表面活性剂、偶氮胂Ⅲ-镱?之间的作用机理相类似.