羟基吡啶功能化螺吡喃探针检测尿样中柠檬酸的研究

柠檬酸是多种疾病潜在的生物标记物,因此发展对柠檬酸灵敏、专一的快速检测方法势在必行。该文设计合成了一种羟基吡啶功能化水溶性螺吡喃探针,通过在螺吡喃骨架上引入羟基吡啶基团,利用螺吡喃螺碳及羟基的协同作用增强了探针对柠檬酸的结合能力。结果表明,该探针对柠檬酸有选择性响应,并伴随着明显的颜色变化及荧光猝灭。据此建立了尿样中柠檬酸的荧光检测方法,方法线性范围为20～120μmol/L,检出限为1.0μmol/L。人工尿液中柠檬酸的回收率为85.7%～92.2%,相对标准偏差为3.0%～9.2%。该方法具有操作简便、准确及选择性好的优点,在尿样柠檬酸检测中具有良好的应用潜力。     

黄芩-栀子配伍治疗糖尿病肾病大鼠的尿液代谢组学研究

采用基于超高效液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱仪(Ultra-high performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UHPLC-Q-TOF MS)联用的代谢组学方法,通过分析大鼠尿液内源性代谢物的变化,研究黄芩-栀子药对治疗糖尿病肾病的作用机制。利用高脂高糖饲料喂养并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。给药12周后,采用UHPLC-Q-TOF MS对正常对照组、模型组、黄芩-栀子药对治疗组的尿液样品进行代谢轮廓分析。利用正交偏最小二乘判别分析(Orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)对实验数据进行分析,挑选出对各组分分离贡献较大(VIP>1,p<0.05)的化合物在Human Metabolome Database(HMDB)等数据库进行质谱信息匹配,共鉴定出糖尿病肾病潜在生物标记物31个,给药后回调生物标记物16个。研究结果表明,黄芩-栀子药对通过影响胆汁酸的合成与代谢、尿毒素代谢、能量代谢、色氨酸代谢、苯丙氨酸代谢、酪氨酸代谢等通路对糖尿病肾病起到治疗作用,其中胆汁酸的合成与代谢、尿毒素代谢和能量代谢可能是黄芩-栀子药对发挥治疗作用的主要途径。与单味药相比,配伍后的药对具有了新的药理作用。     

液相色谱-三级质谱法分析尿液中β2-受体激动剂及β-受体阻断剂多组分残留

建立了SPE柱净化结合液相色谱-三级质谱测定尿液中12种β-受体激动剂和4种β-受体阻断剂的方法.尿液样品经冷冻离心,加人β-葡萄糖苷酸酶酶解后,以高氯酸沉淀蛋白,经HLB和MCX固相萃取柱净化.在Waters Atlantis(R)T3色谱柱上以甲醇和含0.1%甲酸流动相进行梯度洗脱分离,采用ESI源正离子模式进行三...     

超高效液相色谱串联质谱联用法快速测定生物样品中莽草毒素

建立了超高效液相色谱三重四极杆质谱法检测血浆、尿液、呕吐物和药材中八角属植物有毒倍半萜内酯标志物莽草毒素的检测方法.血浆样品经多重机制杂质吸附萃取净化柱萃取,尿液样品经硅藻土柱吸附叔丁基甲醚萃取、植物样品经叔丁基甲醚液液萃取,以水和甲醇为流动相进行梯度洗脱,在UPLC BEH C18柱上实现分离,采用负离子ESI-MS...     

弱阴离子超高交联树脂固相萃取-高效液相色谱-紫外法测定人尿中高香草酸的含量

建立了人体尿液中高香草酸含量的固相萃取-高效液相色谱-紫外测定方法.合成了弱阴离子超高交联树脂固相萃取填料,并对其进行吸附性能考察.利用此萃取剂对尿液中的高香草酸进行选择性吸附,洗脱液富集后以甲醇-乙酸(15∶85,V/V)溶液为流动相,C18为固定相,于280 nm测定其中的高香草酸.方法验证结果表明,高香草酸在2.26～145 mg/L浓度范围内呈良好的线性关系;检出限为0.45 mg/L;方法的平均加标回收率大于90％;RSD小于4.2％.采用本方法对8名健康人尿样中的高香草酸含量进行了测定,结果为1.55～6.79 mg/L.表明本方法选择性好、灵敏度高、准确可靠.     

哺乳动物尿液中钙镁离子浓度的1H NMR测定方法

哺乳动物体液中的钙镁离子浓度能够反映体内营养代谢的平衡与一些疾病的发生发展. 尿液中钙镁离子浓度的准确测量需要不受基质影响的便捷新方法. 该文使用过量乙二胺四乙酸(EDTA)为探针并通过¹H NMR方法测定钙镁离子与EDTA络合物的含量,建立了一种快速原位的尿液钙镁离子浓度测量方法. 将此方法分别用于人、大鼠及小鼠的尿液测定,发现3类哺乳动物的尿液钙镁离子浓度存在显著的物种依赖性和较大的相同物种个体间差异. 上述为生物体液中钙镁离子浓度的快速定量测量提供了便捷方法,也提供了3类哺乳动物尿液钙镁离子浓度的基础数据.     

高效液相色谱法测定尿液中儿茶酚胺类物质

本文报道用高效液相色谱法(HPLC)分离,荧光检测器检测儿茶酚胺含量的新方法。该法可同时分离测定去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)三种组分,三种组分的浓度与其峰面积均呈良好的线性关系。方法灵敏度高,选择性好,测定结果令人满意,可在临床推广应用。     

高效液相色谱-紫外检测法测定人体尿液中的蝶呤-6-羧酸

建立了人体尿液中蝶呤-6-羧酸的高效液相色谱-紫外分析新方法. 运用Lichrospher C18柱(250×4.6 mm,5 μm),甲醇-水(70∶30,V/V)为流动相,流速为0.4 mL/min,可较好地将尿液中蝶呤-6-羧酸与其它共存干扰物质分离.在355 nm检测波长下,蝶呤-6-羧酸在0.19～4.8 μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好线性关系,相关系数为0.9999,方法检出限为0.015 μg/mL.尿液经0.45 μm滤膜过滤后,可直接进样分析,方法简便,应用于癌症病人和健康人尿样中蝶呤-6-羧酸测定,结果较好.方法的加标回收率为94.6%～100.2%,相对标准偏差为0.81%～ 5.07% .     

电感耦合等离子体-质谱法在尿液微量元素测试中的应用

利用ICP-MS测定方法,对成人尿液样品的8种微量元素进行测试,给出了参考值范围,并对某些微量元素之间进行了相关性分析。其结果表明:各元素线性关系较好,回归系数为0.9994—0.9999;检出限(3S/N)为0.006—0.360μg/L;相对标准偏差为0.2%—7.3%;元素回收率在100%±15%之内,该方法具有灵敏度高、准确度好,样品用量少(尿液0.3mL)的优点。     

双金属双硅层核-壳纳米结构Au@SiO2@Ag@SiO2用于葡萄糖检测

制备了一种灵敏度高、 稳定性强的双金属双硅层核-壳结构纳米材料Au@SiO₂@Ag@SiO₂. 由于双金属之间的硅层促进了远程等离子体的激发转移, 使该纳米粒子具有良好的表面增强拉曼散射(SERS)的特性及优异的稳定性. 利用这种SERS活性材料能直接检测出人体尿液的主要成分, 且该材料呈现出对低浓度(10^-6 mol/L)葡萄糖的无标记高效检出能力. 此外, 还实现了人工尿液中等浓度(10^-3 mol/L)葡萄糖和尿素分子的同时检测, 以及实际尿液中10^-3 mol/L葡萄糖的检测. Au@SiO₂@Ag@SiO₂纳米粒子具有在多种生物分子存在时快速检测葡萄糖的实际应用潜力.