谷朊蛋白的改性及其作为纸张增强剂的性能

采用廉价可生物降解的小麦谷朊蛋白为原料,经过羟甲基化和阳离子化改性合成类似聚酰胺聚胺环氧氯丙烷(PPE)的纸张增强剂. 经改性后,谷朊蛋白带有氮杂环丁烷结构、表氯醇和环氧基团3种功能基团,可与纤维形成共价键,且能发生自身交联,在纤维周围形成三维交联网络结构,提高纸张干、湿强度. 通过单因素试验,研究了甲醛、甲酸、温度、反应时间和环氧氯丙烷5种反应因素对纸张强度的影响. 优化合成条件下制备改性谷朊蛋白可使纸张干抗张强度提高35%,湿强保留率达20%. 改性后谷朊蛋白显阳离子性,加入纸浆中,可使得浆料体系Zeta电位升高,改善浆料的留着率,明显提高纸张强度. 结果表明,经羟甲基化和环氧氯丙烷加成改性的谷朊蛋白可以作为纸张的干强剂和湿强剂.     

光度法测定食品中微量铜

铜是人体必需的微量元素,存在于血浆铜蓝蛋白、超氧化物歧化酶、细胞色素C氧化酶等。含铜酶在新陈代谢过程中表现出多种多样的生化功能。如运送氧气、O2^-的歧化、Fe^2＋的氧化、包括细胞色素C在内的有机底物氧化、单氧合作用以及电子传递,但摄入过量的铜盐将导致严重的健康问题。近年由于农业上大量使用含铜杀虫剂和除霉剂,加上工业“三废”的污染,使许多食品中铜含量超标。     

两亲性酞菁锌与牛血清白蛋白结合的研究

二磺基二邻苯二甲酰亚胺甲基酞菁锌(ZnPcS2P2)是一种具有卷动力活性的两亲性抗癌光敏剂，本文应用紫外吸收示差光谱、稳态和动态荧光光谱及平衡透析法研究了在生理条件下ZnPcS2P2与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用。基于Hill位点模型，应用改进的蛋白内源荧光猝灭法求得ZnPcS2P2与BSA形成复合物的结合参数，结果与平衡透析法基本一致。     

SARS病毒核衣壳蛋白的表达与鉴定

依据Genebank中SARS基因组序列和酵母菌对密码子的选择性,采用人工合成的方法,合成了优化的SARS病毒核衣壳蛋白(N)的全基因(1296bp),与CTL表位基因(195bp)重组后,将其克隆到酵母分泌型表达载体pPIC9K中,构建成重组表达载体pPIC9K-N.重组载体转化毕赤酵母GS115,并经MD平板和MM平板筛选及PCR鉴定,得到阳性重组酵母工程菌GS115-pPIC9K-N.用甲醇诱导其分泌表达目的蛋白并对表达产物进行分析、浓缩与鉴定.结果表明,SARS病毒核衣壳蛋白能实现在毕赤酵母中高效表达,表达量达到20%,初步纯化后的产物具有良好的抗原特异性.     

Ca2+与乳清蛋白结合的亲和毛细管电泳研究

利用亲和毛细管电泳研究了Ca²⁺与α-人乳清蛋白(α-HLA)的结合情况.以恒定浓度α-HLA作为受体,运行缓冲溶液加入不同浓度的Ca²⁺作为配体,可观察到由于Ca²⁺的结合,α-HLA的电泳淌度发生了变化.通过Scatchard方程的淌度比(M)处理数据得到α-HLA与Ca²⁺的表观结合常数(K_app)为2.0×107(mol/L)^-1.同时考察了Ca²⁺对变性剂(尿素)和热诱导所引起的α-HLA去折叠的影响,结果表明,Ca²⁺的结合增强了α-HLA的稳定性,也即提高了α-HLA抗变性剂和热诱导的去折叠性能.     

hBAF53 多克隆抗体的制备与活性分析

用PCR方法扩增了人的BAF53全长eDNA序列，用酶切后的△BAF53 eDNA片段构建了表达质粒．转化大肠杆菌后，经IPTG诱导表达，再经包涵体裂解、纯化，得到hBAF53抗原多肽．从免疫动物身上获得实验动物的抗血清．通过斑点印迹方法测得hBAF53抗血清的特异性和效价，又用已提取的HeLa细胞核蛋白(含有天然BAF53蛋白)进行免疫印迹分析，证明天然。BAF53蛋白是该抗血清的抗原，说明获得的抗血清具有比较高的特异性，可用于染色体改构复合物各亚基问相互作用分析及调控基因转录机理方面的研究．     

高效液相色谱法分离测定牦牛乳中的8种蛋白质

建立了同时分离和测定牦牛乳中4种酪蛋白和4种乳清蛋白的反相高效液相色谱方法。脱脂牦牛乳经分散剂处理后,采用C4色谱柱(250 mm×4.6 mm,300,5μm i.d.)进行分离,以0.1%的三氟乙酸水溶液和0.1%的三氟乙酸乙腈溶液为流动相,流速为0.8 mL/min,梯度洗脱,二极管阵列检测器(DAD)在220nm波长下检测,外标法定量。结果表明,牦牛乳中8种主要蛋白质在40 min内完全分离,在各自的线性范围内呈良好线性,除α-乳白蛋白外,其余7种蛋白的相关系数均大于0.99。8种蛋白质的回收率为86%～103%,相对标准偏差(RSDs)为1.7%～8.7%;检出限(LODs)为10.7～39.2 mg/L,定量下限(LOQs)为35.7～130.7 mg/L。该方法的准确度和精密度均较高,能够满足实际检测的要求。     

GST Fusion Protein Based Specific Polyclonal Antibody Preparation of Mouse Aquaporin 1

Aquaporins(AQPs) are specific membrane channels for water and other small nonionic molecules.In order to overcome the difficulties to generate the effictive antibody of membrane protein,we selected the cytoplasmic C-terminus of Aquaporin 1(AQP1) as an unique antigen.The long C-terminus of mouse AQP1 was overexpressed in the Glutathione S-tansferase Gene Fusion System.On the basis of the resonable amounts of soluable membrane protein peptides,we prepared the specific antibody.To pursure this object,we constr...     

分子间相互作用对蛋白质晶体生长的影响

采用原子力显微镜对溶菌酶和刀豆蛋白A的分子间相互作用力的情况进行了研究, 并用动态光散射研究了此二种分子间相互作用力有较大差异的蛋白质在晶体生长条件和非生长条件下, 溶液中的聚集体的状态(大小和分散度)随浓度和温度的变化情况. 实验结果表明, 范德华力强的刀豆蛋白A在成核前, 溶液中的聚集体不能很快转变为生长基元, 导致晶体生长时间长; 而范德华力弱的溶菌酶, 溶液中的聚集体可以很快转变成生长基元, 晶体生长时间也较短.     

金属卟啉-Sn网络可控非共价功能化碳纳米管的制备及蛋白吸附应用

本工作通过简便的一锅溶剂热法, 发展一种卟啉一步金属化且与Sn桥连形成的配合物网络非共价功能化的多壁碳纳米管复合材料(MMPT), 以增强对蛋白质的吸附. 在溶剂热条件下, Sn进入中位-四(4-羧基苯基)卟吩(TCPP)大环使卟啉金属化形成SnTCPP, 同时Sn作为交联剂桥连多壁碳纳米管(MWCNTs)表面的SnTCPP分子, 通过配位自组装形成均匀连续的SnTCPP-Sn网络壳层, 而无需对TCPP和/或MWCNTs进行任何的修饰. 在这种合成策略下, 通过调整MWCNTs/TCPP的比例, 实现了卟啉层厚和位点密度的可控. 并通过扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)及其能量色散X射线能谱(EDS)、紫外-可见分光光度计(UV-Vis spectrophotometer)、傅里叶变换红外分光光度计(FT-IR spectrophotometer)、zeta电位等对所得MMPT的结构和性能进行了全面的表征. 在最佳的碳纳米管比例和吸附条件下, MMPT对牛血清白蛋白(BSA)表现出较好的吸附性能, 此外, MMPT对其他蛋白质如牛血红蛋白(BHb)和溶菌酶(Lyz)也表现出良好的吸附亲和力, 使得其在蛋白吸附、药物递送、传感等方面具有广泛的应用前景.