CdSe/ZnS量子点探针用于检测猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)抗原的新方法研究

合成了高发光效率的CdSe/ZnS量子点并制备了CdSe/ZnS量子点-溶菌酶释放蛋白(MRP)抗体探针, 利用凝胶电泳和分子光谱法研究了MRP抗体与CdSe/ZnS量子点的结合机理. 荧光光谱法优化了CdSe/ZnS量子点-MRP抗体探针制备的影响因素, 建立了一种测定MRP抗原的新方法, 其线性范围为5.0×10－8～1.5×10－6 mol/L, 线性相关系数为0.9976, 检测限为 1.9×10－8 mol/L.     

运用离子选择性电极研究氟离子与蛋白质的相互作用

摘要 在醋酸-醋酸钠缓冲溶液中（pH = 5.68）, 运用氟离子选择性电极研究了288 K～308 K时F–与牛血清蛋白（BSA）、牛血红蛋白（BHb）和卵清蛋白(OVA)的相互作用。F–和三种蛋白质相互作用体系的实验数据通过Klotz方程进行处理,得到了很好的线性关系,根据拟合的直线得到了F–在三种蛋白分子上的束缚位点数以及相应的束缚常数。结果表明,F–在BSA和BHb分子上的束缚位点数随着温度的升高而增大,而在OVA分子上的束缚位点数随着温度的升高而减小。另外,F–与BSA和BHb作用的束缚常数随着温度的升高,先减小后增大;而与OVA的束缚常数则表现出相反的规律,即先增大后减小。根据蛋白质分子二级结构的差别,对上述现象进行了合理的解释。运用热力学方程计算出了不同温度下每个束缚过程的热力学函数（△G,△H,△S）,说明F–和蛋白质分子之间主要依靠静电作用力相结合。     

FTIR光谱法研究天花粉蛋白的热去折叠过程

本文利用ＦＴＩＲ光谱技术和计算机辅助解析技术（二阶导数、去卷积和曲线拟合）研究了天花粉蛋白的热诱导去折叠过程。结果表明：在２５～８５℃温度范围内,天花粉蛋白的热去折叠是一个不可逆的分子间聚集的过程;二级结构随温度的变化暗示了折叠中间体的存在。     

藻类光合天线系统的微观结构与整体功能

藻类天线系统广谱捕光、快速高效传能的特点使其成为自然界最理想的光合捕光系统．藻类天线系统内多种孤立色素蛋白聚集高分辨晶体结构测定使研究实现了微观水平,然而,藻类天线系统是多种藻胆蛋白和连接多肽有机组成的完整功能体,为建立局部微观结构和整体功能的联系,包括连接多肽在内的复合物研究将是突破点之一．藻类天线色素蛋白聚集体的脱辅基蛋白和连接多肽通过弱相互作用对色团光谱性质调制,实现了藻类天线系统由周边向核心“漏斗”式高效捕光和传能系统,因此,研究聚集体弱相互作用组装、脱辅基蛋白对色四光谱的微观调制是具有普遍意义的问题;同时对人工光能转换系统金色天线的设计和组装具有指导意义．无论是光合生物还是人工光能转换系统,天线系统和反应中心空间及能量优化匹配是实现高效光能利用的关键．生命系统在实现特定生物学功能时伴随的结构运动是普遍现象,这一现象的分子水平观察成为当前前沿性研究问题．藻类天线系统在类囊体膜上的运动性是近期观察到的事实,动态变化的机理、形态、驱动力、传能途径和方向以及生物学意义是有待深入探索的问题．     

金属硫蛋白与Cd2+、Pb2+络合反应的微量量热滴定

金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,简称ＭＴ）是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白,具有调节体内微量金属元素（Ｚｎ、Ｃｕ等）代谢、重金属解毒和清除自由基等多种生物学功能［１］．ＭＴ与金属离子的络合作用是发挥其功能的物质基础,哺乳动物ＭＴ每分子含２０个半胱氨酸巯基,可结合７个二价金属离子或１２个一价金属离子;通常,各种金属离子的结合能力与典型的硫酸盐型络合物的顺序一致,即 Ｚｎ（Ⅱ）＜ Ｐｂ（Ⅱ）＜ Ｃｄ（Ⅱ）＜ Ｃｕ（Ⅰ）, Ｈｇ（Ⅰ）, Ｈｇ（Ⅱ）, Ｂｉ（Ⅲ）［２］．哺乳动物Ｃｄ７－…     

光固定化藻蓝蛋白对体外肝癌细胞7402的抑制作用

从钝顶螺旋藻中提取、纯化生物活性蛋白－藻蓝蛋白,采用光固定法固定藻蓝蛋白到组织培养聚苯乙烯（ＰＳｔ）基板上,制备生物材料,研究这种新材料对体外肝癌细胞７４０２的抑制作用。实验表明,初始固定化藻蓝蛋白的浓度为２０μｇ／ｅｗｌｌ时,对７４０２细胞的抑制率达到５５％,浓度继续升高,对癌细胞的抑制率反而下降,当藻蓝蛋白浓度高达０．５ｍｇ／ｗｅｌｌ及１ｍｇ／ｗｅｌｌ时抑制率又回升到５５％、６６％,通过显微镜观察到,在固定高浓度蛋白的情况下,组织增减聚苯乙烯表面上的藻蓝蛋白层对肝癌细胞的贴壁生长有一定的阻害作用,可能提高了对癌细胞的抑制率。     

金属硫蛋白溶液聚合状态的研究

通过动态光散射实验首次证明了兔肝金属硫蛋白亚型 和 在不同的缓冲体系中不仅仅是以二聚体的形式 ,而且是以多种聚合形式存在[1] .深入考察金属硫蛋白在溶液中的聚合形式对于研究金属硫蛋白的结构和功能都具有非常重要的意义 .我们通过计算机模拟 [1] 比较系统地研究了各种因素对金属硫蛋白聚合的影响 .结果表明 ,在溶液聚合的分子识别过程中可由多种因素共同调控金属硫蛋白 ,这些因素主要包括静电相互作用、疏水性相互作用和溶液中阴阳离子等 .通过这些因素的综合分析 ,首次对兔肝金属硫蛋白在溶液中多种聚合形式的形成机制及相应的分子…     

麦醇溶蛋白A-PAGE方法的优化和改进

以大麦、小麦品种等为材料,在ISTA的标准电泳程序基础上分别进行浓度为10％,12％,14％,16％,18％和20％的酸性聚丙烯酰胺(A．PAGE)均一胶电泳来分离种子的麦醇溶蛋白,并与10％～20％的线性梯度A．PAGE分离效果进行比较．经优化和改进,结果表明：18％的A-PAGE方法效果最佳,既具有ISTA推荐的A．PAGE方法制胶简便、电泳快速、重复性好的优点,又具有线性梯度A-PAGE方法分辨率高的特点,尤其是在小分子量的快带区,电泳成带明显,达到梯度胶的分离效果．在供试的大麦、小麦品种中,电泳图谱总条带数比ISTA推荐的10％均一胶所得电泳图谱条带数分别增加1～8条和2～7条．该方法既适用于大麦、也适用于小麦醇溶蛋白的分离．并对18％的A-PAGE方法的适用范围等进行了讨论．     

褶纹冠蚌硫氧还蛋白基因克隆及空间结构分析

运用RACE-PCR方法从褶纹冠蚌血细胞中克隆出硫氧还蛋白(Trx)的cDNA。结果表明褶纹冠蚌TrxcDNA序列全长为1 169bp,其中5′非编码区(UTR)长11bp,3′非编码区长840bp,含有PolyA尾和典型的腺苷酸信号序列AATAAA,开放阅读框长度为318bp,编码105个氨基酸。预测蛋白质分子量为11.6kDa,等电点为5.38,未发现有信号肽。氨基酸序列中含有1个Thioredoxin结构域(T3-K104),区域内包含一个保守的CGPC活化位点。序列同源性比较结果显示褶纹冠蚌Trx与太平洋牡蛎和紫贻贝的氨基酸序列一致性分别为56%、52%。预测的Trx空间结构由5个β折叠和4个α-螺旋组成,α-螺旋包围β折叠形成紧密的球形,这一结构与人的Trx空间结构相似。     

视黄醇结合蛋白4与糖尿病视网膜病变的相关性研究

目的 探讨2 型糖尿病（T2DM）患者的视黄醇结合蛋白4（RBP4）水平与糖尿病视网膜病变（DR）的关系。方法 应 用酶联免疫吸附法测定31 例无DR 的糖尿病患者（NDR 组）、33例非增殖性DR 患者（NPDR 组）、34 例增殖性DR 患者（PDR组）和36例无糖尿病的健康体检者（对照组）的血清RBP4 水平,比较4组RBP4水平,并分析其与BMI、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、TG 等的关系。结果 NDR 组、NPDR 组和PDR组患者血清RBP4 水平分别为（18.76±5.17）、（25.33±4.68）、（31.57±5.98）mg/L,与对照组[（11.65±4.32）mg/L]比较,差异有统计学意义（P＜0.05 或0.01）;NPDR 组、PDR组患者血清RBP4水平高于NDR 组,差异有统计学意义（P＜0.05 或0.01）。相关分析显示血清RBP4 水平与BMI、hs-CRP、TG 及HOMA-IR 呈显著正相关（r= 0.714、0.837、0.796、0.801,均P＜0.05）,多元逐步回归分析显示hs-CRP 和HOMA-IR 显著影响RBP4 水平（P＜0.05）。结论 血清RBP4 在糖尿病患者中显著升高,其水平变化与DR 的发生、发展密切相关。