燐光探针法研究不同变性剂对大肠杆菌碱性磷酸酶构象的影响

通过监测大肠杆菌碱性磷酸酶 (AP)的 10 9位色氨酸 (Trp 10 9)室温光 (RTP)的强度与寿命的变化 ,探讨了变性剂酸、盐酸胍及EDTA对AP构象变化的影响。结果表明 :光强度、光寿命与Trp 10 9所处的微环境刚性化程度有密切的关系。尤其是盐酸胍的加入 ,AP经历了典型的 3种变化状态 :从稳定折叠态到中间态 ,最后形成展开态。极少量的EDTA加入 ,导致蛋白质变性、光减弱和光寿命缩短。     

大肠杆菌分泌型穿梭质粒P^#GTE5DNA的酶切图谱

本文采用碱性裂解法获得产率较高的分泌型穿梭质粒P~# GTE_5 DNADNA,并作限制性内切酶的单、双酶完全消化,通过对DNA电泳条带的分析,初步得出该质粒的限制性酶切图谱.     

Preparation of the Ag2O2-PbO2 Modified Electrode and Its Application towards Escherichia coli Fast Counting in Water

A novel nano crystalline Ag2O2-PbO2 film chemically modified electrode (CME) was prepared and the CME was characterized by X-ray diffractometer (XRD) and atomic focrce microscope (AFM). By chronoamperometry, the nano Ag2O2-PbO2 CME was used as bioelectrochemical sensor to determine the population of Escherichia coli (E.coli) in water. Compared with conventional methods, it is found that the technique we used is fast and convenient in counting E.coil     

美研究人员发明快速检测细菌新方法

美国珀杜大学的研究人员发明了一种新方法，可快速并精确地检测出包括大肠杆菌和沙门氏菌在内的细菌。     

人肿瘤坏死因子(TNF)cDNA的分离、鉴定及其表达

PMA诱导的HL-60细胞株mRNA经逆转录合成cDNA;经过第一链cDNA为模板的PCR扩增反应,分离到一特异的615bp DNA片段。Southern杂交和DNA序列分析证实这一615bp片段包含了编码人TNF成熟肽所需的全部cDNA顺序。将这一人TNF cDNA克隆到大肠杆菌表达载体pKK223-3,获得人TNF直接表达质粒pHT-1。IPTG诱导的表达产物具有L-929细胞毒活性;并经抗体中和实验确证为人TNF。在A_(600)=2时,大肠杆菌产生的重组人TNF含量约为8×10~7U/1培养液。     

人野生型MBL基因在大肠杆菌中的表达

为获得人MBL蛋白，并对其功能进行初步研究，用DNA重组法构建了组氨到标签融合原核表达质粒pET28(b)-MBL。将重组质粒转入大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG在37℃条件下诱导培养，利用SDS－PAGE，Westem-blot检测目的蛋白的表达，用IMAC金属螯合层析柱对其进行纯化。成功地表达了重组MBL蛋白，纯化的MBL浓度约为844μg/mL，为制备MBL的基因工程抗体奠定了基础。     

烟草、小麦和水稻三个设计的rbcs结构基因的全合成和在大肠肝菌中的表达

用计算机辅助再设计了烟草、小麦和水稻的核糖酮-1,5-双磷酸羧化酶/氧化酶的成熟亚基(rbcS)的三个基因,结合化学方法和酶促配位进行了全合成,并在大肠杆菌中以高得产表达.     

温敏型铜银荧光纳米簇的绿色制备及细菌成像研究

在温和条件下以D-青霉胺为配体,通过一步法制备出水溶性的具有红色荧光的铜银纳米簇(CuAgNCs),并对其形貌、结构、荧光性能等进行了表征。结果表明,制备得到的纳米簇的量子产率可达9. 6%;在279~355 K温度范围内,该纳米簇的荧光强度与温度之间呈良好的线性关系,荧光强度随着温度的增加而减弱。此外,细胞毒性噻唑蓝(MTT)实验结果表明,合成的Cu-AgNCs显示出低毒性和较好的生物相容性,它们可以渗透大肠杆菌进行细胞成像。采用共聚焦荧光成像方法在293~313 K的生理温度范围内进行细菌体内温度测量,结果表明,制备的Cu-AgNCs有望作为光致发光温度计和生物传感器应用于荧光成像等领域。     

细胞不同代谢类型的热化学研究Ⅰ.生长、非生长及内源代谢水平的量热测定

细胞是生命的基本单位．对其代谢过程能量输出水平的直接测定，对细胞生理学来说是重要的实验基础数据，对于生物生理和研究能量代谢方面也有一定的理论意义．当然细胞的多样性及其代谢过程的复杂性使这一研究工作相当困难·作为开展研究的第一步我们选择便于培养处理的单细胞生物大肠杆菌作为研究对象，并对其所进行时三种基本代谢类型29Llxi：L谢；非生长依队和内派代谢分别进行研究，本文分别测定了＊烟三种不同类型代谢的热功率输出水平，得到了单个细胞在上述代谢过程热功率输出的定量数据．实验结果表明，不同类型代谢的能量输出水平…     

细胞芯片分析概念与技术发展

分子层次的分析问题已被广泛研究,虽然还有很多问题需要继续突破,但已经能够解决诸如基因组全序测定这样的重大科学课题.与此不同,细胞层次的分析研究却进展缓慢,而且主要集中于生物界.