全文获取类型
收费全文 | 569篇 |
免费 | 61篇 |
国内免费 | 150篇 |
专业分类
化学 | 420篇 |
力学 | 8篇 |
综合类 | 188篇 |
数学 | 59篇 |
物理学 | 105篇 |
出版年
2024年 | 1篇 |
2023年 | 15篇 |
2022年 | 12篇 |
2021年 | 23篇 |
2020年 | 19篇 |
2019年 | 12篇 |
2018年 | 11篇 |
2017年 | 14篇 |
2016年 | 14篇 |
2015年 | 25篇 |
2014年 | 32篇 |
2013年 | 30篇 |
2012年 | 29篇 |
2011年 | 50篇 |
2010年 | 33篇 |
2009年 | 37篇 |
2008年 | 53篇 |
2007年 | 36篇 |
2006年 | 35篇 |
2005年 | 36篇 |
2004年 | 32篇 |
2003年 | 24篇 |
2002年 | 36篇 |
2001年 | 21篇 |
2000年 | 17篇 |
1999年 | 18篇 |
1998年 | 11篇 |
1997年 | 10篇 |
1996年 | 9篇 |
1995年 | 6篇 |
1994年 | 20篇 |
1993年 | 13篇 |
1992年 | 16篇 |
1991年 | 11篇 |
1990年 | 7篇 |
1989年 | 8篇 |
1988年 | 2篇 |
1986年 | 1篇 |
1979年 | 1篇 |
排序方式: 共有780条查询结果,搜索用时 13 毫秒
31.
利用已知Gelonin的氨基酸序,逆向推算出整个基因的碱基序列,根据E.coli的密码子偏爱性和后续基因克隆的需要,通过沉默突变设计相应的酶切位点和碱基序列,将整个基因分为四段,每个片段约175-220pb,每一个片段中的互补链从5′末端用化学合成100-120的碱基单链,其中两个链的3′末端有20个互补碱基。利用T4DNA聚合酶酶促添补成双链DNA,用分子克隆技术,分别构建重组子,然后再构建成含整个Gelonin基因的表达载体pET-gel进行表面,经诱导后,获得了一个28000的重组蛋白,并主要以可溶形式存在。 相似文献
32.
33.
双龙方组分诱导大鼠BMSCs分化的差异基因筛选及聚类分析 总被引:1,自引:1,他引:1
利用基因芯片筛选双龙方有效组分(总人参皂苷及总丹酚酸)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)类心肌细胞分化过程中的差异表达基因, 并对其进行聚类分析, 在基因水平研究了双龙方组分对大鼠BMSCs分化的影响. 对大鼠BMSCs进行分组培养, 分别收集10, 20, 30及40 d的细胞样本, 提取tRNA, 经基因芯片检测, 筛选出BMSCs变化过程中的差异表达基因并进行生物信息学分析, 同时通过差异表达基因对样本进行Hierarchical聚类分析. 在BMSCs的分化过程中, 筛选出179条差异表达基因, 经分析发现它们与能量代谢和信号传导等多类基因密切相关. 对样本进行聚类分析发现其聚为两大类: 10和20 d的样本聚为一类, 30和40 d的样本聚为一类. 说明BMSCs在20~30 d之间可能发生了显著的改变. 相似文献
34.
将BCL 11B基因插入pIRES-EGFP构建重组质粒真核表达载体pIRES-EGFP-BCL 11B,采用电转染法将重组质粒转入人幼稚T细胞,转染24 h后,用原子力显微镜(AFM)观察转染前后细胞的表面形态以及生物物理性质的变化.转染72 h后,用CCK-8试剂检测幼稚T细胞的增殖情况.分别对空转的幼稚T细胞组、空载体转染组(pIRES-EGFP naked plasmid)、重组载体转染组(pIRES-EGFP-BCL 11B recombinant vector)、无电转无质粒的幼稚T细胞组进行实验.结果表明,4组幼稚T细胞的体积、高度、半宽度、粗糙度、表面颗粒大小等参数发生了变化,细胞杨氏模量以及细胞硬度也呈现很大变化,CCK-8结果显示,重组质粒pIRES-EGFP-BCL 11B电转染人幼稚T细胞后影响细胞的增殖. 相似文献
35.
36.
玻璃基质微流控芯片用于DNA片段的分离和C677T基因突变的快速检测 总被引:1,自引:0,他引:1
基于微加工方法,在一般实验条件下,成功地制备了玻璃芯片。利用水溶性聚合物对玻璃通道进行动态修饰,从而抑制了DNA分子的吸附作用,并成功地用于DNA片段的分离和四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)中C677T的突变检测。 相似文献
37.
以静电吸附法使Mg2+修饰于玻碳电极(GCE)上电聚合的2,6-吡啶二甲酸膜(PDC)上, 制得的Mg/PDC/GCE电极, 成为DNA固定及杂交的良好平台. 应用微分脉冲伏安法和电化学阻抗谱对DNA的固定和杂交进行表征. 以电化学阻抗谱免标记法检测目标DNA比以亚甲基蓝为指示剂的微分脉冲伏安法有更高的灵敏度. 固定于电极表面的DNA探针与互补单链DNA杂交后使电负性的[Fe(CN)6]3-/4-的表面电子传递电阻值显著增大, 以此作为检测信号可以高灵敏度地测定目标DNA. 电化学阻抗谱检测转基因植物外源PAT基因片段, 线性范围为1.0×10-9 ~ 1.0×10-5 mol/L, 检测限为3.4×10-10 mol/L. 相似文献
38.
本文设计并合成了良好水溶性的赖氨酸修饰壳聚糖,并对制备工艺进行了优化.产物通过红外(FTIR)和核磁(1H-NMR)进行了表征,并将其作为壳层材料制备了赖氨酸修饰壳聚糖磁性超微载体.通过光电能谱(XPS)、透射(TEM)、激光粒度仪、X射线衍射(XRD)、磁性能测试(VSM)对载体进行了表征.结果表明,制备的赖氨酸修饰壳聚糖磁性超微载体表面带有大量的氨基(-NH2),粒径分布较为均一(100nm左右),形貌较为规则,并具有良好的超顺磁性,因而该载体具有更加良好的性能. 相似文献
39.
40.
脱氧核糖核酸在硬脂酸铝离子膜上固定杂交及BAR基因片段检测 总被引:3,自引:0,他引:3
将石墨粉、固体石蜡和硬脂酸按一定比例混合制得表面富含羧基的碳糊电极,然后在电极表面组装荷正电的铝离子膜。在硬脂酸铝离子膜上进行DNA探针的固定和与目标基因的杂交。以亚甲蓝为杂交指示剂,用循环伏安法优化了DNA的固定和杂交条件。应用该电化学生物传感器以微分脉冲伏安法对转基因玉米外源BAR基因片段进行了检测,结果令人满意。 相似文献