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141.
以TA克隆法构建中间载体PUCF1,再构建γ干扰素基因表达载体PBIF1。通过农村菌转化导入烟草叶圆片外植体。经4轮梯度卡那霉素递增筛选,获得抗性植株。经PCR证实其中部分植株已将人γ干扰素基因片段整合到烟草基因组中,从而为成功地建立烟草植物反应器生产人γ干扰素基因奠定了基础。 相似文献
142.
本文从 16周的胎儿脑中抽提总 m RNA,经过一系列酶促反应后合成 c DNA,分级分离柱除去小片段 DNA后克隆到λgt10载体中 ,转染宿主菌 C60 0 hfl,文库包装效率为 4 .2× 10 6pfu/μg,得到的原始克隆数为 2 .1× 10 6,c DNA插入片段平均大于 1.2 kpb.根据已知序列设计引物 ,从这个 c DNA文库中扩增出血管内皮生长因子 ( VEGF)的全长 c DNA基因 相似文献
143.
以野生型苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographacali
for nica Nuclear Polyhedrosis Virus,Ac 相似文献
144.
双龙方组分诱导大鼠BMSCs分化的差异基因筛选及聚类分析 总被引:2,自引:1,他引:1
利用基因芯片筛选双龙方有效组分(总人参皂苷及总丹酚酸)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)类心肌细胞分化过程中的差异表达基因, 并对其进行聚类分析, 在基因水平研究了双龙方组分对大鼠BMSCs分化的影响. 对大鼠BMSCs进行分组培养, 分别收集10, 20, 30及40 d的细胞样本, 提取tRNA, 经基因芯片检测, 筛选出BMSCs变化过程中的差异表达基因并进行生物信息学分析, 同时通过差异表达基因对样本进行Hierarchical聚类分析. 在BMSCs的分化过程中, 筛选出179条差异表达基因, 经分析发现它们与能量代谢和信号传导等多类基因密切相关. 对样本进行聚类分析发现其聚为两大类: 10和20 d的样本聚为一类, 30和40 d的样本聚为一类. 说明BMSCs在20~30 d之间可能发生了显著的改变. 相似文献
145.
146.
生物力学与基因-献给周培源教授诞辰100周年 总被引:1,自引:0,他引:1
生物界包罗万象,其中有力的作用,所以有生物力学.自Galileo,Harvey, Boreli, Hooke, Euler,Young等创始以来,生物力学阐明了鸟飞鱼游,人体运动,血液循环,人工脏器等,对人世社会,有所贡献.生物力学的基础是质点力学,传统地用连续体力学的概念来简化.但近年做生物组织在应力的作用下改造的问题,引起了必须更改传统连续体力学的几个公理的问题.我们将仔细讨论这些公理,然后指出新公理存在的理由,是由于基因在细胞里的日常工作.基因不单主宰遗传,变异;并且忙着控制日常生活.不过,现在仅见其端倪.详细的情形,要等将来来阐发了. 相似文献
147.
蓝舌病毒HbC3株S7基因5’非编码区序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
根据已发表的蓝舌病毒(bluetongue virus.BTV)10型标准株S7基因设计合成一对与其5'-NCR(noncoding region)序列同源的引物.经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出HbC3株和10型标准株长度分别为277bp和290bp的S7基因5’非编码区cDNA片段.以建立起dsRNA体外扩增系统.将扩增的BTV-HbC3毒株的S7基因5’非编码区片段通过粘端连接克隆到pUCm-T载体中.用PCR技术和限制性内切酶分析鉴定,表明获得重组质粒pUCm-T-BTV-HbC3-S7.通过核苷酸序列分析方法分别将2个毒株的S7基因5’非编码区与呼肠孤病毒-3(reovirus-3)型比对。发现BTV-HbC3株与呼肠孤病毒-3 L2基因5’非编码区基因具有完全的同源性.将BTV-HbC3毒株接种在不同细胞系如猴肾传代细胞(Vero)、人肝癌细胞(Hep-3B)和小鼠成纤维细胞(L929)等细胞株上,比较BTV-HbC3在不同种系细胞上的增殖特征,并且用双向免疫扩散试验证实BTV-HbC3和BTV-10型之间的血清学关系.结合本实验室的研究结果提示BTV-HbC3株可能是蓝舌病毒的一个新的基因型. 相似文献
148.
PCR人含有丙肝病毒全长非结构蛋白的载体pBlueBac25中扩增出全长的NS2基因DNA片段,分别克隆到表达载体pQE30和转座载体pFasBacHTb的多隆位点(MCS),PFastNS2通过转座插入穿梭载体Bacmid的表达盒;pQENS2转化JM109菌株,诱导表达出N端含有6个His的全长His的全长NS2蛋白,用Ni-NTA-agarose柱层纯化,获得提纯的全长NS2蛋白。 相似文献
149.
根据核苷酸序列分析结果设计引物,通过PCR的方法,在嗜碱芽孢杆菌NTT33的总DNA和p1350中分别扩增到预计大小的片段,证明p1350中的外源DNA片段来自于嗜碱芽孢杆菌NTT33.同时也获得了含有pelA完整ORF的DNA片段.经计算,该基因表达的成熟蛋白质的分子量为34.76×103.构建表达载体pBV220-pel,在E.coliDH5a中进行表达.SDS-PAGE检测发现,表达的蛋白质分子的大小约为35×103,与预测的相符.初步研究其酶学性质发现,该酶在pH9.0~pH10.0,45℃的条件下有较高的活性,而且必需Ca2+参与反应. 相似文献
150.
为研究藻蓝蛋白β亚基的生物合成途径,通过构建相容的3种重组质粒pET—cpcB(C155Ⅰ)、pCDFDuet—cpeS和pACYCDuet—hol—pcyA,将裂合酶基因cpeS、血红素氧化酶基因hol、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和藻监蛋白β脱辅基蛋白基因cpcB(C155Ⅰ)共同转入大肠杆菌.通过色素蛋白锌电泳和光谱检测,结果表明产生了有生物活性的CpcB(C155Ⅰ)-PCB.而在裂合酶基因cpeS不转入大肠杆菌的情况下,大肠杆菌内只有7.6%的CpcB(C155Ⅰ)-PCB产生.实现了大肠杆菌内藻蓝蛋白β亚基84位半胱氨酸残基与PCB连接,为进一步在大肠杆菌内合成天然的藻蓝蛋白奠定了基础. 相似文献