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71.
介绍利用肝素亲和色谱和高效液相色谱二步法分离纯化基因重组的人血小板第四因子(rhPF4)。采用肝素柱,用含不同浓度的NaCl的磷酸盐缓冲液(sodiumphosphatbufer,即PBS)(20mmol/L,pH7.4)分级洗脱,得到初步纯化的rhPF4(纯度达80%);再采用C18柱,乙腈(含0.1%三氟醋酸即TFA)-水(含0.1%TFA)为流动相梯度洗脱,得到进一步纯化的产物。方法快速、准确、分离效果好,经过两次分离后产物纯度达95%以上。 相似文献
72.
73.
报导了不同尺寸的大球缓慢压入颗粒床过程中所受阻力随深度变化的实验测量结果,发现阻力曲线在不同的深度区域有不同的增长规律,存在凹—凸转变.阻力在较浅的区域满足1.3次方的幂率增长,而在较深的区域趋向0.3次方的幂率增长.通过研究凹凸转变中拐点的性质,发现这种阻力增长速度趋缓的转变不是来源于前人认为的器壁支撑导致的介质压强饱和,而是来源于侵入物自身的体积效应.此外,适用于颗粒介质快速阻力的静水压力描述并不适用于阻塞态颗粒介质的慢速阻力行为,实验表明慢速阻力对深度的依赖关系不是线性,且测得的静水压力系数也远大于理论估算值.
关键词:
颗粒介质
阻力
力链重组 相似文献
74.
缬氨酸Schiff碱金属铜配合物(PBP-L-Val-Cu)是新合成的一类非酶类切割工具, 合成了4种类型样品分别为L-CH3 Cu, D-CH3 Cu, L-Ph Cu和D-Ph Cu. 以质粒DNA(pUC18)为材料,分别对这4种类型化合物进行核酸切割效率的研究, 得出适合的反应体系后, 通过琼脂糖凝胶电泳对反应不同时间后核酸切割产物进行检测, 最终分别得到每种化合物将超螺旋型DNA切割成为开环型DNA和直线型DNA的切割效率, 经比较得出L-CH3 Cu型的切割效率是最快的. 将直线型DNA切割产物用琼脂糖凝胶回收试剂盒进行回收, 得到的直线型切割产物可以在T4连接酶的作用下重新连接起来. 利用酶切法对切口进行检测, 结果表明, 切割作用是具有特异性的. 另外, 该化合物对质粒pNQ216也具有切割活性. 相似文献
75.
以Marcus-Hush电子转移理论为基础,提出了用量子化学密度泛函方法研究自交换和异交换电子转移反应的理论方案。在DFT B3LYP/6-311+G(2D)水平上研究了溶液中MO2/MO2^-,SO2/SO2^-和CIO2/CIO2^-等3个氧化-还原对的自交换以及它们之间的6个交叉电子转移反应的动力学性质,获得了与实验较为一致的结果。 相似文献
76.
77.
用宿主范围扩大的重组AcNPV在家蚕中表达TNF 总被引:1,自引:0,他引:1
用宿主范围扩大的核型多角体病毒双穿梭载体Bonpvid与重组转座质粒 pFast-TNF转座,使含有有TNF基因的表达盒插入Bonpvid的Tn7att的接受位点筛选阳性重组E.coli菌落,将提取的阳性重组子DNA分别转染家蚕BmN细胞和Sf-9细胞,获得了能表达TNF的重组病毒,SDS-PAGE和Western blot分析表明,TNF在上述两种细胞中得到表达,以家蚕作为生物反应器,将含有重组病毒的的细胞上清注射感染家蚕4龄幼虫,使TNF在蚕体表达,用BmN细胞中表达的TNF感梁肿瘤细胞,诱导细胞发生了凋亡。 相似文献
78.
1 引言高效亲和液相色谱(HPAC)是将经典亲和色谱的高特异性同高效液相色谱的快速、高效相结合产生的一种蛋白质的分离技术.它使经典亲和色谱原来需要几个小时才能完成的纯化工作缩短为十几分钟或更短,而且纯化倍数高,分离效果好.因此,HPAC在近年基因重组蛋白质的纯化方面得到了广泛的应用.基因重组人白细胞介素-2(rhIL-2)是生物体内具有重要生物学功能的细胞因子,目前已成功地进行了基因表达.本文以自制的rhIL-2单克隆抗体(McAb)的HPAC填料纯化了大肠杆菌(E.coli)表达的rhIL-2. 相似文献
79.
构建了羰基还原酶CR2重组酶体系,并优化了相关的酶促催化反应条件.通过在催化体系中添加辅酶NADP+(0.1 mmol/L)和辅底物葡萄糖(120 g/L),在30℃及p H=8.0的条件下反应4 h,CR2重组酶体系不对称还原N,N-二甲基-3-酮-3-(2-噻吩)-1-丙胺(DKTP,10 g/L),合成了高光学纯度(S)-N,N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺[(S)-DHTP,e.e.值99.9%],产率为62%.在酶促催化过程中,由于辅酶循环生成葡萄糖酸导致反应体系p H值下降而影响催化效率.通过调控反应体系p H值,(S)-DHTP的产率提高到68%.不同浓度底物的反应过程表明底物对CR2酶促反应具有抑制作用,且在10 g/L底物浓度下反应的时空产率可达1.3 g·L-1·h-1. 相似文献