东亚马氏钳蝎哺乳动物类神经毒素III的快原子轰击酶谱分析

应用快原子轰击酶谱分析检验了东亚马氏钳蝎哺乳动物类神经毒素III的氨基酸序列,对前人用Edman降解法测定的序列作了两处修正:(1)第60位氨基酸残基是脯氨酸而不是色氨酸;(2)C-端氨基酸是组氨酸而不是甘氨酸。分别用羧肽酶B降解和部分胰蛋白酶酶解后的质谱数据进一步证实了以上的修正。在分析中采用了化学修饰方法以减少表面抑制效应,从而得到完整的快原子轰击酶谱。     

微透析高效液相色谱法研究金属酶与小分子的相互作用

将微透析（microdialysis)高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC)联用技术应用于定量研究超氧化物歧化酶（superoxide dismutase)与组氨酸和组氨酸－金属离子配合物的相互作用。实验结果表明： Cu2Zn2SOD酶不仅与组氨酸，而且还可以与组氨酸－Co(Ⅱ）和组氨酸－Ni(Ⅱ)相互 作用，Cu2Zn2SOD酶中的部分Cu(Ⅱ)和Zn(Ⅱ)被诱导和置换出来，并相应地影响了 酶的活性；组氨酸－金属离子配合物的作用比组氨酸强，酶活性降低也更明显；酶 中结合的外来金属离子的量比从酶上被诱导和顶替下来的金属离子的量要少，说明 在溶液中有脱辅基酶的存在。     

微量元素在风湿关节病领域的研究

通过综述多年来的临床观察与实验研究，发现风湿关节病存在着某些酶活性的缺陷，同时伴有相应常量元素或微量元素代谢障碍，两者密切相关，在风湿关节炎的综合治疗中，适当调整相应元素的浓度可提高疗效和改善体质．文中还介绍如何调整微量元素治疗的体会。     

基于壳聚糖膜固定双酶的胆碱传感器的研究

提出了一种基于壳聚糖膜固定辣根过氧化物酶 胆碱氧化酶的胆碱传感器的制备方法。该传感器以电聚合于玻碳电极的硫堇作为电子传递介体,在pH6. 8,外加电压-0. 2V(vs.SCE)条件下,其峰电流与浓度范围 5. 0×10-5 ~3. 0×10-3 mol/L的胆碱呈良好的线性响应;检出限为 1. 0×10-5 mol/L。传感器有良好的选择性和稳定性,使用一月后,仍能保持其初始活性的 80%。     

细胞色素P—450模拟酶的快速混合停流时间分辨吸收谱研究

采用快速事停流技术，在实际反应条件下，考察了不同铁卟啉配合物Ｆｅ（Ｐｏｒ．）Ｃｌ（Ｐｏｒ．－ＴＰＰ、ＴＭＯＰＰ和ＴＦＰＰ）与单氧给体ＰｈＩＯ构建的模拟酶体系中催化活性物种的生成及催化烯烃环氧化过程，在氧给体ＰｈＩＯ作用下，Ｆｅ（Ｐｏｒ．）Ｃｌ均生成了四价铁氧卟啉配合物，但Ｆｅ（ＴＰＰ）Ｃｌ和Ｆｅ（ＴＭＯＰＰ）Ｃｌ存在严重的氧化分解，而Ｆｅ（ＴＦＰＰ）Ｃｌ则基本未发生氧化分解，且在底物ＤＰＢＤ存在下     

New Approach to Detecting Phenoxyl Free Radicals Generated in Enzyme Reaction by Stopped-flow Spectrophotometry

Quantification of free radical formation is critical for evaluation and interpretation of many radical-mediated biological processes1-4. Numerous studies have been devoted to the determination of free radicals, but the most of the reports have been focuse…     

化学发光单孵多层免疫技术检测粪样中轮状病毒

以酶联免疫吸附分析（ＥＬＩＳＡ）夹心测定粪样中轮状病毒（ＲＶ）实验为模型，将传统又孵式免疫操作变成单孵式，即在包被ＲＶ抗体Ａｂ的微孔中同时加入含ＲＶ的粪样上清液和根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记抗ＲＶ抗原共同孵育，其结果在载体表面形成多层酶免疫复合物，以ＨＲＰ催化鲁米诺－对碘苯酚－过氧化氢化学体系作为最终信号检测系统，从而建立起化学发光单孵多层免疫技术（ＣＬ－ＳＩＭＩＴ）。其灵敏度是ＥＬＩＳＡ的１６倍，     

四硫富瓦烯为介体的碳纤维束葡萄糖氧化酶微电极的研究

本文研究了一种将电子介体四硫富瓦烯(TTF,Tetrathiafulalene)引入葡萄糖氧化酶微电极的新方法,制成了TTF为介体的碳纤维束葡萄糖氧化酶微电极。该电极制作简单,响应迅速、灵敏,电极寿命可达15天。葡萄糖浓度在1。0×10~(-4)～1.5×10~(-3)mol/L范围内有线性关系。检出限为7×10~(-5)mol/L。用于人体血样中葡萄糖测定获得满意结果。     

基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究

由DNA甲基转移酶(DNMT1)催化的DNA甲基化在许多生物过程中起重要作用,包括基因转录,基因组印记和细胞分化~([1])。本文利用特异性酶切法成功开发了一种有效的测定DNMT1的电化学方法。首先,将硫醇修饰的双链DNA(dsDNA)自组装固定在金电极上,随后DNMT1识别dsDNA半甲基化序列并实现完全甲基化,最后通过甲基化特异性限制酶(BSSHⅡ)剪切,未发生完全甲基化的碱基序列将被剪切并移除电极表面。利用差分脉冲伏安法(DPV)分别测定剪切前后的亚甲基蓝(MB)还原电流。在最佳优化条件下,该方法线性范围为0.5 nM～50 nM,检测限为0.5 nM。这种方法可以简单有效地检测DNA甲基化和DNMT1活性,在DNA甲基化快速检测和基因毒理分析方面具有一定的实际意义。     

有机溶剂性质及其水含量对酶催化合成含D－氨基酸残基的二肽衍生物的影响

有机溶剂性质及其水含量对酶催化合成保护的寡肽及其衍生物有显著影响。系 统地研究了有机溶剂性质及在不同有机溶剂中水含量对α－胰凝乳蛋白酶催化合成 含D－氨基酸残基的二肽衍生物产率的影响。用α－胰凝乳蛋白酶、枯草杆菌蛋白 酶和嗜热杆菌蛋白酶在有机溶剂中催化合成了一系列保护的二肽及其衍生物，并研 究了水含量对反应产率的影响，得到了十分有意义的结果。