啶酰菌胺的合成研究

本文报道一种啶酰菌胺的新方法,即用Pd(OH)2/C催化的对氯苯硼酸与2-硝基溴苯的Suzuki反应、其产物2-(4-氯苯基)硝基苯经水合肼-三氯化铁体系还原后与2-氯烟酰氯或2-氯烟酸缩合得目标产物。在Suzuki反应中,考察了反应温度、无机碱、季铵盐和溶剂对反应的影响后。再考虑到生产效率与生产成本的因素,发现以K3PO4·7H2O为无机碱,四丁基溴化铵(TBAB)为助剂,在DMF中,120℃下反应13h,Pd(OH)2/C能很好地催化对氯苯硼酸与2-硝基溴苯的Suzuki反应,并在这一的条件下考察Pd(OH)2/C循环利用的情况。     

以诺卡氏菌为模板的微纳米Ni-Fe-P吸波材料的制备及性能研究

采用化学镀技术在经过敏活处理的诺卡氏菌表面制备微纳米Ni-Fe-P吸波材料. 通过SEM(扫描电子显微镜), EDS(), XRD(X射线衍射), VSM()对材料形貌、成分、结构及磁性能进行了分析, 并探讨了菌体化学镀前处理机理以及装载量对镀层质量、镀液利用率以及磁性能的影响. 结果表明: 采用敏活一步法可使菌体表面具备化学沉积的条件. 随着诺卡氏菌装载量的提高, 诺卡氏菌表面镀层粗糙化、球形颗粒增多且分解产物增多, 当装载量为80 mL时, 镀层的质量以及镀液的利用率最好. 装载量的变化对镀层成分的影响不大, 当装载量为80 mL时, 镀层中Ni, Fe, P的质量分数分别为83.17%, 6.12%, 10.71%; 装载量的变化对镀层的磁性能影响不大且镀层为典型的非晶态结构. 采用矢量网络分析仪(VNA)对镀层的电磁参数进行了测量, 结果表明: 镀层在10～12, 15～17 GHz频段具有较好的吸波性能, 当吸收剂厚度为2 mm时, 反射损耗可达27 dB.     

青枯雷尔氏菌特征菌株高效离子交换色谱快速分离条件的优化

建立了高效离子交换色谱和紫外检测系统快速分离青枯雷尔氏菌的细菌色谱方法。通过比较青枯雷尔氏菌悬浮在哌嗪-HCl缓冲体系和双蒸水后的菌体数变化及细胞形态变化,分析该缓冲液对青枯雷尔氏菌生长活性及细胞表面特性的影响。结果表明,青枯雷尔氏菌悬浮在平衡缓冲液、洗脱缓冲液和双蒸水中的菌体数量无明显差异,分别为6.467×10⁹、6.267×10⁹和6.233×10⁹ cfu/mL。透射电镜观察发现,3种溶液处理后,青枯雷尔氏菌均保持完整的细胞结构。研究了缓冲液pH值、流速及菌体细胞浓度对青枯雷尔氏菌色谱分离效果的影响,确定青枯雷尔氏菌的最佳色谱分离条件为：缓冲液pH值为8.0,流速为2 mL/min,菌体浓度大于1.0×10⁸ cfu/mL且小于1.0×10¹⁰ cfu/mL。该分离条件缩短了分离时间,提高了分离效率,为快速分离青枯雷尔氏菌提供了一种有效的手段,同时也为细菌等微生物的分离提供了新途径。     

发酵虫草菌粉对免疫抑制小鼠的免疫调节和抗氧化作用

构建免疫抑制小鼠模型,将小鼠随机分为6组,即正常组、模型组、阳性组及发酵虫草菌粉高、中、低剂量组。小鼠以灌胃的方式给予不同剂量发酵虫草菌粉后,CCK-8法测T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖,ELISA法测脾淋巴细胞上清IgM、IL-6、IL-10和TNF-α含量,ELISA法测血清IgM,测定肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。发现与模型组相比,发酵虫草菌粉各剂量组均能提高小鼠脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖。随着菌粉剂量的升高,IgM、IL-6、IL-10和TNF-α的含量均升高,SOD活性增强,MDA含量降低。结果表明,发酵虫草菌粉能有效拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用,并能提高免疫抑制小鼠的抗氧化能力。 更多还原     

青海弧菌荧光素酶蛋白三维结构的分子模拟研究

基于荧光素酶催化发光的生物发光技术在化学、生命与环境科学等领域得到广泛应用. 部分萤火虫和发光细菌的荧光素酶晶体三维结构已经解析出来. 青海弧菌(Vibrio qinghaiensis sp.-Q67, 简称Q67)是从青海湖青海裸鲤中提取的一种新型淡水发光细菌, 已用于化学品的生物检测及毒性评价. 然而, 其催化发光过程中最重要的荧光素酶三维结构尚未解析, 阻碍了化学品对Q67产生毒性的机理研究进程. 本工作通过异源二聚体同源建模与分子动力学模拟方法构建了Q67荧光素酶的三维结构. 研究结果表明, Q67荧光素酶蛋白有α和β两个多肽亚基, 范德华力是维持α/β稳定结构的主要作用力, 而α/β亚基携带的净电荷产生的静电相互作用不利于体系稳定. 缔合的专一性则由α/β亚基接触面上的极性基团之间的氢键实现. 底物黄素单核苷酸与Q67荧光素酶的结合位点在α亚基活性口袋中, β亚基有利于保持α亚基活性口袋的稳定性.     

抗鳗利斯顿氏菌鸡卵黄抗体制备及其活性研究

鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)是常见的水产动物致病菌.为获得高效抗 L. anguillarum卵黄抗体(egg yolk antibodies, IgY),用纯培养的L. anguillarum制备抗原,免疫蛋鸡,联用乙酸-乙酸钠稀释、(NH4)2SO4与 Na2SO4盐析、透析法由蛋黄分离纯化 IgY.对制备的 IgY进行了体内、外抑菌与吞噬调理活性研究:分别将抗L. anguillarum 的IgY、由普通鸡蛋IgY与L. anguillarum (103 CFU·mL-1)等体积混合后注射克氏原螯虾(Procambarus clarkia),计算成活率;分别将抗L. anguillarum的IgY、普通鸡蛋IgY与L. anguillarum (106 CFU·mL-1)及血细胞混合后,接种平板培养、计数.结果表明,提取的IgY浓度为8.93 mg·mL-1,每个鸡蛋可获得IgY约120 mg,抗体纯度较高,效价为1:20480;体外抑菌率为65%;能促进细胞吞噬L. anguillarum,相对吞噬率为75%;对克氏原螯虾的保护率为33.3%.     

假结核耶尔森菌侵袭素蛋白基因的克隆及原核表达

目的克隆假结核耶尔森菌侵袭素蛋白基因并在原核表达系统中表达.方法根据GenBank上登录的假结核耶尔森菌侵袭素蛋白核酸序列设计引物,用PCR方法扩增假结核耶尔森菌侵袭素蛋白基因,并将其插入克隆载体pMD18-T中,测序鉴定正确后再将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,得到重组质粒pGEX-4T-1-inv.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳检测.结果假结核耶尔森菌提取的基因组,经PCR扩增,得到一段591 bp的片段,与预期结果一致;SDS-PAGE电泳分析,所得重组蛋白的分子量约46 kDa,与预期结果相同;重组菌体超声裂解后,经12%的SDS-PAGE电泳分析,结果显示该重组蛋白为包涵体蛋白.结论克隆的侵袭素基因核心片段可以在原核细胞中高效表达.     

粗壮脉纹胞菌降解稻草粗纤维培养基的优化

稻草是农业生产的主要副产物,因粗纤维高,利用率不高,基本用于燃料和肥料。以稻草为原料,利用从江西传统发酵食品中分离诱变筛选的高产纤维素酶菌株Neurospora crassa来发酵降解稻草,以制得新型稻草发酵饲料。通过Plackett-Burman(P-B)试验设计从7种培养基成分中筛选出对对纤维降解有显著影响的3个关键因素米糠、硫酸铵和尿素,然后再通过最陡爬坡实验逼近纤维素降解的最大值点,以此作为响应面实验的中心点。最后通过响应面(RSM)试验设计得到粗壮脉纹孢菌发酵降解稻草粗纤维的最佳培养基组成:稻草为89.3%,米糠为8.39%,(NH4)2SO4为1.63%,尿素0.68%。在此最优化培养基组成条件下,粗纤维降解率为49.65%。     

古菌蛋白质SSO6904的双体形式的NMR鉴定

古菌蛋白质SSO6904是最近发现的一个全螺旋结构的、具有弱的钙离子结合活性的蛋白质. 在蛋白质纯化过程中,通过凝胶过滤层析发现SSO6904具有稳定的单体和双体形式. ¹H NMR谱表明2种形式的核心结构类似. 2D ¹H-¹⁵N HSQC谱表明单体和双体的结构差异主要处在连接螺旋2和3以及5和6的2个Loop链接区域,这2个Loop链接区域是形成双体的关键区域,而其他区域具有相同的结构. 通过结构分析推测并搭建了一种结构域交换的SSO6904双体结构模型. 这种稳定的双体形式可能是调节SSO6904功能的一种方式.