线粒体特异性检测与调控

线粒体(mitochondria)是一种由双层膜包被的细胞器,存在于大多数细胞中,能够通过位于线粒体内膜上的呼吸链产生能量,被称为细胞的"能量工厂"。此外,线粒体参与到细胞分化、信息传递和细胞凋亡等过程,并调控细胞周期和细胞生长。线粒体的功能障碍与多种人类疾病相关,如帕金森氏病、阿尔兹海默氏病、心血管疾病和某些癌症等。鉴于其在生物体中的重要作用,线粒体一直是科学家们的研究重点。本文就线粒体特异性检测和调控研究的最新进展进行了综述。     

微量热法研究氰化物对鲤鱼肝线粒体代谢的影响

A microcalorimetric technique based on the metabolic heat-output was explored to evaluate the inhibition of cyanide on the mitochondrial metabolism of aquatic animal, Cyprinus carpio. The power-time curves could be divided into four parts： lag phase, active recovery phase, stationary phase, and decline phase, and the corresponding thermokinetic parameters were obtained. The maximum heat production rate Pmax decreased in a linear manner with the increase of concentration of cyanide, however, such mitochondria of aquatic animal were still metabolized actively even under the action of high concentration of cyanide. All the observations suggested that the mitochondria of this aquatic animal should exhibit considerable ability of cyanide-resistant respiration.     

水稻线粒体DNA热变性的动力学研究

作为重要的细胞器之一，线粒体有其自身的遗传系统，它不仅有其自身的基因组，也有其独立的转录、翻译系统，甚至其使用的遗传密码也与核基因不同．线粒体DNA（mtDNA）对于线粒体本身的生物发生意义重大，尽管大多数线粒体蛋白是由细胞核基因组编码，但线粒体DNA仍有10％左右的     

有机双光子线粒体内活性小分子荧光探针研究进展

线粒体在细胞的能量代谢中发挥着关键作用,其内部环境的微小变化会影响细胞的正常生命活动。同时线粒体内许多活性小分子在细胞的许多生理过程中也起着关键作用。因此,可视化监测线粒体自身及内部微环境的变化对于生命现象的研究和疾病的诊断与治疗具有非常重要的意义。荧光分析法因具有操作简便、灵敏度高、选择性好、实时检测以及损伤小等优点而得到了广泛的研究和应用。双光子荧光探针技术相对于单光子荧光技术具有长波吸收短波发射、高度的三维空间选择性、大的穿透深度、避免荧光漂白和光致毒以及降低组织自发荧光干扰等特点,在生命科学领域具有广阔的应用前景。该文介绍了有机双光子吸收基本原理以及有机双光子线粒体内活性小分子荧光探针的研究现状,同时对有机线粒体内活性小分子荧光探针今后的发展趋势进行了展望。     

缢蛏线粒体DNA提取方法的比较

分离缢蛏肌肉组织,液氮磨碎后,用3种方法提取线粒体DNA,紫外分光光度法定量．用琼脂糖凝胶电泳和线粒体COI基因PCR扩增产物鉴定所提取的线粒体DNA．结果显示OD260／OD280均在1．69-1．85之间．高盐沉淀法提取的线粒体DNA量最多．     

稀土离子(La3+, Gd3+, Yb3+, Ce3+)对线粒体的氧化损伤

主要考察了稀土离子对线粒体氧化损伤(膜脂质过氧化、膜蛋白氧化、线粒体DNA氧化)的作用。结果表明,稀土离子(La3 ,Gd3 ,Yb3 ,Ce3 )浓度大于2×10-5mol.L-1时,对线粒体膜脂质过氧化、膜蛋白氧化均有明显的促进作用;在对Fe2 诱导的线粒体氧化过程中,La3 ,Gd3 和Yb3 能明显地增强Fe2 的氧化作用,而Ce3 对Fe2 的作用表现出明显的拮抗作用,此外Ce3 对Fe2 诱导的线粒体DNA氧化损伤表现出明显的拮抗作用,显示了Ce3 的特殊性。     

线粒体荧光标记的单颗粒水平高通量评估方法

线粒体是真核细胞能量代谢和信号转导的调控中枢,虽然各种灵敏、特异的线粒体荧光标记技术已经被广泛应用于线粒体研究,但仍缺乏单线粒体水平的荧光染色性能评估方法。基于超高灵敏流式检测技术( High sensitivity flow cytometry, HSFCM)能对单个线粒体进行高灵敏、高通量、多参数定量分析的独特优势,本研究发展了一种单线粒体水平的荧光标记高通量评估方法。将携带靶向线粒体绿色荧光蛋白基因的pAcGFP1-Mito质粒转染至人宫颈癌HeLa细胞中,用G418筛选出稳定转染细胞,分别从瞬时转染和稳定转染的细胞中提取线粒体。此外,从未转染质粒的正常HeLa细胞中提取线粒体,分别进行MitoTracker Green标记以及SYTO 62线粒体DNA染色,应用实验室自行研制的超高灵敏流式检测装置在单线粒体水平对这4种线粒体标记方法的荧光亮度、标记效率和稳定性进行评估。实验结果表明,稳定转染细胞中单个线粒体的绿色荧光蛋白(GFP)荧光亮度为瞬时转染的17.7倍,比MitoTracker Green标记的线粒体亮度高约两个数量级,且标记稳定性好。本研究为线粒体标记方法的选择提供了一种先进的分析方法。     

一种5,5′,6,6′-四氯-1,1′-3,3′-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物的合成方法

JC-1作为一种荧光探针，广泛应用于线粒体细胞膜的电位测定。本文以1,2,4-三氯-5-硝基苯为起始底物，经多步反应以18%的总收率获得JC-1。      

液相色谱-电化学检测法测定小鼠血浆和组织线粒体中的辅酶Q和维生素E

 建立了同时测定氧化型和还原型辅酶Q以及维生素E的液相色谱 电化学检测方法。样品中氧化型和还原型辅酶Q9和Q10 以及维生素E混合物经过液相色谱分离柱分离 ,在 - 5 5 0mV的电化学调节池中将氧化型辅酶Q还原为还原型 ,再经过 15 0mV分析池将样品中原有的还原型辅酶Q和经过调节池还原的辅酶Q以及维生素E一同氧化。该方法用于小鼠组织线粒体和血浆样品中氧化型和还原型辅酶Q9和Q10 以及维生素E的同时检测 ,灵敏度高 ,选择性好 ,结果令人满意。     

日本沼虾(Macrobrachium nipponense)触角腺的超微结构

利用透射电镜对日本沼虾触角腺的体腔囊、迷路、原肾管和膀胱的超微结构进行了研究．体腔囊由足细胞和内皮细胞组成，其中足细胞的三级足状突起分支细而多，并密布于裂隙膜上，足细胞及其足状突起之间可见隔壁连接，内皮细胞与开放式血腔相临、沿基底膜有许多窗孔．迷路细胞游离端具长而发达的微绒毛，基底及两侧质膜内陷发达，并具丰富的长杆状线粒体．原肾管细胞的微绒毛短少而零乱，基底及两侧质膜内陷更为发达，原肾管细胞之间存在有中间连接和隔壁连接．研究结果证实：日本沼虾触角腺的体腔囊、迷路和原肾管的超微结构与哺乳动物肾单位的肾小球、近曲小管和远曲小管的超微结构相似，具有肾单位一样的生理功能，而膀胱扁平细胞还兼有肾脏收集管的功能．