我国中部地区热泉嗜热菌的分离及其产酶研究

从我国中部的四川喜德、普格地区以及陕西南部地区分别采集地表热泉和地下热水水样，采用培养方法分离得到47株中度嗜热细菌．16S rRNA基因片段序列的分析和比对结果表明，采集地的嗜热细菌以芽孢杆菌为主，并且主要分布在Anoxybacillus和Geobacillus 2个属中．同时，通过平板法对分离的嗜热菌进行产酶定性实验，发现其在60℃或70℃条件下能够分泌多种耐热的水解酶类，其中60％的菌株能够利用吐温，38％的菌株分泌蛋白酶，29％的菌株能够降解木聚糖，38％的菌株产生淀粉酶．根据筛酶统计结果，所分离的菌株在种间和种内均存有显著的产酶差异．     

枯草杆菌α-淀粉酶在一些色谱体系中的热力学和超热力学研究

通过测定不同温度范围的热力学平衡常数、焓变、熵变、自由能变和补偿温度,研究了枯草杆菌α-淀粉酶在几种色谱介质上的热力学和超热力学。结果表明,在RP-C18反相介质、Zn2+螯合的Sepharose fast-flow亲和介质和WCX-1阳离子交换介质上,当温度分别在13-30和30-50℃范围时,它们的lnKSL分别随绝对温度的倒数线性变化;而在PEG-400和修饰的PEG-400疏水色谱介质上,当温度分别在13-40和13-30℃范围时,它们的lnKSL分别随绝对温度的倒数线性减小,但当温度分别高于40℃和30℃时,它们则随绝对温度的倒数剧烈减小。通过研究不同温度范围的焓变、熵变、自由能变和α-淀粉酶构象变化之间的关系,发现在RP-C18反相和Zn2+螯合的Sepharose fast-flow亲和介质上在30- 50 ℃温度范围内,在WCX-1阳离子交换介质上在13-30 ℃温度范围内,α-淀粉酶的吸附过程由焓变和熵变共同所支配,而在Zn2+螯合的Sepharose fast-flow亲和介质上在13- 30 ℃温度范围内,在WCX-1阳离子交换介质上在30-50 ℃温度范围和在PEG-400 和修饰的PEG-400疏水色谱介质上在13-65 ℃温度范围时,α-淀粉酶的吸附过程仅仅由熵变所控制。最后,通过α-淀粉酶在这些色谱体系中的补偿温度进一步发现,它们的焓变仅仅只能通过它们构象变化所引起的熵变所补偿。     

钙、镁离子对淀粉酶催化激活作用的热动力学

利用热活性检测仪测定了无激活剂和有激活剂时淀粉在淀粉酶催化作用下的热功率－时间曲线,借助热动力学理论和对比进度法对曲线进行处理,得到了无激活剂时酶催化反应的米氏常数(Km)和最大速率(vmax),以及有激活剂(Ca2＋,Mg2＋)时酶催化反应的表观米氏常数（Km1）和最大速率（vmax）.通过比较,得到了金属离子对酶催化反应定量的激活效果.     

聚乙烯吡咯啉酮－盐－水液－固萃取体系分离纯化α－淀粉酶的研究

本文研究了α－淀粉酶、酪蛋白、牛血清白蛋白在聚乙烯吡啉酮－盐－水液－固萃取体系中的萃取行为，着重讨论了ｐＨ值、（ＮＨ４）２ＳＯ４浓度及激活剂ＮＳＣ１对酶萃取率的影响。实．验结果表明，在一定条件下，酶大部分被萃入聚合物固相，而杂蛋白则主要分布在盐水相。用该体系分离纯化α－淀粉酶，平均酶活力收得率达９８．９％，一次纯化倍数１．５１。     

利用色谱法研究α—淀粉酶变性动力学

提出用尺寸排阻色谱法研究酶的变性动力学。此法将高效色谱分离同灵敏的紫外检测结合起来，消除了紫外法测定蛋白质变性速度时变性体的影响。确定了α－淀粉酶在盐酸胍溶液中变性时的反应级数。测定了不同浓度变性剂中酶的变性速度常数，并和答活速度常数进行了比较，讨论了影响酶变性速度的因素。     

PREPARATION OF STARCH SUCCINATE WITH INTERMEDIATE DS BY AQUEOUS SLURRY REACTION

The succinylation of cornstarch by slurry reaction has been studied using sodium hydroxide as catalyst.Several reaction parameters affecting the succinylation were investigated including the concentration of starch in water,the ratio of succinic anhydride to starch,the reaction time and the reaction temperature,The favorable conditions for an intermediate degree of substitution(DS) and reasonably high reaction efficiency(RE) are pH 8.5-9.0,50% starch by weight to water.succinic anhydride to starch 1/1(w/w),reaction time 4h,reaction temperature 30℃ .Under these conditions,the DS of 0.45 and RE of 28% were achieved.The addition of an adequate amount of crosslinking agent imparted starch succinate water absorbency.     

非专一性酶催化壳聚糖水解反应的特性

某些非专一性酶对壳聚糖具有一定的降解作用，具有普遍的壳聚糖酶的活性。α-淀粉酶对壳聚糖的降解作用受温度、底物浓度、酶浓度、反应时间、pH等因素的影响，其最佳反应条件为壳聚糖浓度20g/L，酶浓度4g/L,pH值6.0，反应温度50℃。降解反应初期是以内切的方式进行，所得到的壳寡糖具有较低的分散度。     

海洋来源产淀粉酶放线菌的分离鉴定、诱变选育及培养条件优化

采用鉴定培养基初步筛选产淀粉酶的菌株,利用YOO改良法测定其酶活力,复筛产酶能力强的菌株作为研究对象.通过热、超声波及紫外线等多种物理诱变选育高产淀粉酶菌株;采用单因子及正交试验优化菌株产酶培养条件.通过形态鉴定、生理生化鉴定以及分子生物学手段对其16S rDNA进行测序,建立系统发育树,进行系统学分析.结果从浙江舟山沿海海泥、海藻中分离到产淀粉酶的放线菌菌株43株,其中产淀粉酶能力较高的3株.放线菌A24产淀粉酶能力经选育后有较大提高:从初始酶活力111.5 U.mL-1经紫外诱变增至282.7 U.mL-1,再经培养优化后提高到353.67 U.mL-1.经形态、生理生化鉴定及16S rDNA的系统发育学分析结果表明A24菌株为Streptomycessp.A24,GenBank登录号GU184337.     

硅胶-环糊精固定金属离子亲合吸附剂的制备及性能

以硅胶键合β-环糊精(-βCD)为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为螯合基,制备了新型固定金属离子亲合吸附剂.通过13C固体核磁、元素分析对其进行了表征.每克吸附剂分别含IDA分子158μmol,-βCD分子136μmol.研究了吸附剂对α-淀粉酶的吸附特性.