Preparative Purification and Bioassay of Bt Toxin from CrylAb Transgenic Rice

A method of extracting and purifying CrylAb protein(Bt toxin) from CrylAb transgenic rice was established. Most of the Bt toxin present in the tissue of CrylAb transgenic rice was extracted effectively with a solution of 50 mmoi/LNa2CO3 and NaHCO3. The crude protein containing Bt toxin was obtained after the pretreatment of CrylAb transgenic rice with ultra-filtration, ammonium sulfate precipitation and centrifugation. The dialysed crude protein was futher separated on DEAE Sephadex A-50 columns and Sephadex G-150 columns. The protein bound on DEAE Sephadex A-50 gel was eluted with buffer solution B(10 mmol/L tris-HCI buffer 1.0 mmol/L EDTA, pH=8.0) mixed with 0. 1, 0. 3, 0.5 and 0.8 mol/L NaCI in a discontinuous gradient elution mode. The peak of the Bt toxin eluted from the columns was identified by ELISA and bioassayed with larvae of tobacco hornworms and silkworms. The purity and the bioactivity of the Bt toxin were determined by means of SDS-PAGE and larvicidal assay, respectively. The purity of the Bt toxin obtained by this method is high, and its insecticidal activity is retained after the toxin is purified.     

线粒体和亚线粒体体外代谢及漆酶影响的微量热研究

首次将微量热用于亚细胞层次的研究，测定了鲤鱼肝脏线粒体和亚线粒体代谢的热谱及其漆树漆酶的影响，并用ＭＴＤ方程和演化计算技术对它们的代谢热动力学参数进行了全局优化。     

辣根过氧化物酶对心肌线粒体过氧化损伤的保护作用

以黄嘌呤氧化酶／次黄嘌呤自由基诱生系统建立了稳定的离体心肌线粒体的损伤模型，并应用此模型研究辣根过氧化物酶对心肌线粒体自由基氧化损伤的保护作用，结果表明，辣根过氧化物酶能抑制心肌线粒体中氧自由基的形成，降低膜脂的过氧水平，保护了线粒体膜酶活性，有效地防止自由基对线粒体结构和功能的损伤。     

光周期敏感不育水稻中激素的二阶导数卷积伏安法研究

二阶导数卷积伏安法应用于水稻中痛量雌雄激素的检测，具有快速，灵敏，干扰少的特点。本文以光周期敏感核不育水稻农垦５８Ｓ为材料，以农垦５８作对照，了叶焉和穗中雌，雄性激素的含量，研究了不同光周期条件下两类激素的变化。     

双核芳基Os(Ⅱ)配合物的合成及诱导肿瘤铁死亡机制

本文报道了一种双核锇Os(Ⅱ)配合物[Os （η⁶-bip）（1，3-bib） Cl]₂Cl₂（bib-Os），其中η⁶-bip=η⁶-联苯，1，3-bib=1，3-二（1H-咪唑-1-基）苯。并通过¹H NMR和ESI-MS进行基础表征。配合物bib-Os具有良好的脂溶性，易在细胞中积累。配合物bib-Os对人卵巢癌A2780细胞表现出高效的抗增殖活性，可产生活性氧（ROS）并诱导线粒体损伤。脂质过氧化物（LPO）积累、谷胱甘肽（GSH）消耗和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）下调表明，配合物bib-Os诱导A2780细胞死亡的主要机制是铁死亡，bib-Os是第一例诱导肿瘤细胞铁死亡的Os金属配合物。     

多吡啶类双核镍配合物的合成、晶体结构及抗癌活性

合成了2个相似的多吡啶类双核镍配合物[Ni_2(L)_2Cl_2](ClO_4)_2·3H_2O (1)和[Ni_2(L)_2Cl_2](PF_6)_2 (2)(L=N,N-bis(pyridin-2-ylmethyl)-4-(4-((pyridin-2-ylmethyl)amino)benzyl)aniline),通过X射线单晶衍射对其结构进行测定并解析,并利用元素分析、红外光谱对其进行表征。另外,通过噻唑蓝(MTT)比色法检验了 2个配合物对HeLa细胞、BGC-823细胞、NCI-H460细胞以及HepG-2细胞的体外毒性作用,结果表明2个配合物均对NCI-H460细胞表现出良好的毒性作用,IC_(50)值分别为(26.0±2.2)μmol·L~(-1)(1)和(31.3±2.7) μmol·L-~1 (2)。进一步通过Hoechst 33342染色、活性氧水平检测、线粒体膜电位的测定和分析探究了配合物1的抗肿瘤作用机制,结果表明,该配合物可能通过线粒体途径来诱导细胞凋亡从而对癌细胞产生致死作用。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定水稻田中甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的残留量

建立了水稻植株、土壤、稻田水和稻米中甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。样品用乙酸乙酯提取,经PCX固相萃取柱净化浓缩,收集的洗脱液再经乙酸乙酯萃取,上层萃取液由氮气吹至近干后,用甲醇定容。试样采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱进行分离,以乙腈-醋酸铵为流动相,采用电喷雾正离子(ESI+)模式测定。甲氨基阿维菌素苯甲酸盐在1~200μg/L质量浓度范围内呈良好线性,相关系数不低于0.999。在0.1~50.0μg/kg加标水平下,水稻植株、土壤、稻田水和稻米的回收率为70%~110%,相对标准偏差(RSD)为0.3%~15.9%,定量下限(LOQ)为0.1μg/kg。该研究同时发现土壤和水稻植株样品对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐表现出明显的基质抑制效应,稻田水样品则表现为基质增强效应。     

固相萃取-离子色谱法测定血液中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸

草甘膦是目前世界上使用量最大的除草剂之一,被广泛应用于控制农田或非耕作用地中一年生或多年生杂草的生长[1]。草甘膦是一种生物蛋白质合成抑制剂,其通过抑制5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸盐合成酶(EPSPs)的活性,使植物体内蛋白质合成受阻,致使植物死亡[2]。草甘膦原药在美国毒性分级中被评定为Ⅲ,被认为是相对较安全的农药,但经商品化改造的草甘膦的毒性是前者的数倍[3],会造成人体上皮细胞膜的损伤[4]、细胞中的血浆损伤和线粒体功能受损[5],甚至有致癌的风险。     

高静水压诱导水稻产生突变的研究

 以78 MPa高静水压力处理已浸泡10 h的水稻（Oryza sativa L.）粤香占、粤丰占和测64种子12 h,成苗后移栽至大田,对其处理当代和后代的农艺性状进行调查和分析,结果表明,处理当代中,粤香占、粤丰占和测64的穗粒数分别增加了5.2%、1.2%和17.0%,且测64达到显著性差异水平;测64处理的生育期延长10 d,而粤香占和粤丰占则分别早熟5 d和2 d 。在处理的当代和后代中出现了可遗传的突变体,突变性状中既有质量性状也有数量性状,其中紫色叶鞘和穗下节伸长属于质量性状突变,株高、粒长和穗粒数等属于数量性状突变。突变频率因品种不同而存在差异,表现为：测64>粤丰占>粤香占。通过4年6代的筛选,共获得近100份包括叶、茎、穗、粒、育性和生育期等性状发生明显变异的突变体,已稳定的突变株系22个,其中7个突变株系的综合性状明显较对照好,具有良好的应用前景。     

水稻中的纳米硅及其紫外吸收

为了了解水稻中硅的亚显微结构及其紫外吸收特性,根据强酸不会腐蚀SiO₂玻璃的事实,选择湿消化方法分离水稻中的硅体。以浓硫酸和硝酸混合液分别处理水稻叶片和稻壳,经多级沉降分离出其中的硅体。X射线光电子能谱结果表明硅体距离表面10 nm以内碳相对质量为35.05%,远高于硅体表面(5.88%),说明硅质壁能够阻止强酸进入硅体内部,避免硅体内氧化,保持硅体结构完整和相对独立的理化性质。电镜显示硅体SiO₂结构致密,由1～2 nm的SiO₂凝胶粒子粘聚而成,纳米颗粒相互融合组成排列方向一致的纳米棒,内部还有微米尺度(≤1μm)和纳米尺度(≤1～2 nm)的隙孔。颖壳硅体最大吸收位于285 nm;叶片纳米硅对紫外辐射的吸收极其有限,表明水稻颖壳和叶片硅体对紫外辐射具有不同的抵抗机制。