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682.
683.
aprE基因表达的分子生物学和微量热法分析 总被引:3,自引:0,他引:3
利用分子生物学方法(SDS-PAGE和酶活检测法)未检测到所克隆的aprE基因在大肠杆菌中的表达产物(碱性蛋白酶), 而微量热法检测结果发现: 重组菌株的生长代谢产热曲线之间存在明显的差异. 根据这些差异, 分析了该基因的上、下游调控序列对该基因在大肠杆菌中表达的重要作用, 从而进一步对该基因进行了亚克隆, 得到了生物学方法可检测到的表达产物. 由此推测, 微量热技术有可能为检测外源基因表达及其调控, 以及为指导进一步基因工程操作提供一种新的快速灵敏的技术和方法. 相似文献
684.
PEG化壳聚糖/DNA自组装复合物的制备、表征和体外Hela细胞转染研究 总被引:11,自引:0,他引:11
通过有机合成和高分子聚合等方法将亲水性的聚乙二醇接枝到壳聚糖的氨基侧链上,得到了改性的壳聚糖—聚乙二醇接枝共聚物,应用现代波谱等技术对中间产物和最终产物进行了表征,采用绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP—N1为DNA模型,在溶液中通过自动(静电)吸附得到PEG化的壳聚糖/DNA自组装复合物,初步研究了该自组装复合物对Hela细胞的体外转染效率。结果表明,活化的聚乙二醇被成功地接枝到壳聚糖上,使不溶于水的壳聚糖改性为水溶性的PEG化的壳聚糖。PEG化壳聚糖/DNA自组装复合物在Hela细胞体外转染率达到81%。因此,PEG化的壳聚糖有可能成为基因转染的非病毒载体。 相似文献
685.
Hui LI Da Fu CUI Jin Qing LIANG HaoYuan CAI Yu Jie WANG 《中国化学快报》2006,17(11):1481-1484
A homemade array surface plasmon resonance (SPR)-based imaging biosensor was used to develop sensitive and fast immunoassays to determine sulfamethoxazole (SMOZ) and sulfamethazine (SMT) in buffer. Two conjugations of sulfonamide-bovine serum albumin (BSA) were separately immobilized on two different rows of the array chip with one row as reference. The immobilization was carried out in the instrument to monitor the quantity of the conjugations immobilized. The antibody mixed with the sulfonamide in the buffer was injected over the surface of the chip to get a relative response which was inversely proportional to the concentration of the sulfonamide in the PBS buffer. Two calibration curves were constructed and the limit of detection for sufamethoxazole in buffer was 3.5 ng/mL and for sulfamethazine 0.6 ng/mL. The stability and specificity of the antibody were also studied. The monoclonal antibody did not bind with BSA. 相似文献
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688.
猪繁殖和呼吸综合征(PRRS)是一种严重影响养猪业的高度传染性疾病,目前预防这种疾病的疫苗免疫还存在一定缺陷。本研究旨在探索一种有效的佐剂以提高其免疫效力。将猪IL-23基因重组质粒用壳聚糖和普朗尼克材料包裹制成纳米颗粒,命名为VRIL23-CNP-Pluronic。将28日龄小鼠分为两组,分别肌肉注射VRIL23-CNP-Pluronic(实验组)和VR1020-Pluronic(对照组),两组均同时接种PRRSV疫苗,在接种后第0、7、14、28和35天采集血样并分析免疫变化。实验组中PRRSV特异性抗体、IgG1和IgG2a水平、CD4+和CD8+T淋巴细胞数量均极显著高于对照组(p0.01);经qRT-PCR分析,与对照组相比,实验组小鼠的IL-23、TLR1、TLR6、STAT1、IL-10、TNF-α、IL-15和CD62L基因表达水平均极显著上调(p0.01)。结果表明,VRIL23-CNP-Pluronic能促进小鼠对PRRSV疫苗的免疫应答,并为其作为新型PRRSV疫苗佐剂的开发提供理论基础。 相似文献
689.
上世纪末“人类基因测序”被认为是一项类似人类登月的伟大工程,正是分析化学家对毛细管电泳分析方法的重大革新,促使这项伟大的工程得以提前完成,从而揭开了后基因时代的序幕。功能基因组学、蛋白组学、代谢组学和糖组学等组学的发展,生命科学、环境科学和材料科学等领域的发展,向分析化学提出了更高、更严峻的挑战,也为分析化学的发展提供了新的机遇。 相似文献
690.
亲和层析结合生物质谱技术分析鉴定猕猴血清中的重组人内皮抑制素 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了将固相亲和层析与生物质谱技术相结合 ,分离提取鉴定给药猕猴血清中含有 6×His序列的重组人内皮抑制素的方法。用固相免疫亲和层析和金属螯合层析两种方法分别提取并富集血清中的重组药物 ,采用基质辅助激光解吸 电离飞行时间质谱的直接分析和肽质量指纹谱分析与数据库检索 ,分别对两种亲和提取方法得到的药物蛋白前体collagenXVIII[Homosapiens](IDofSWISS -PROT TrEMBL :Q8WXI5 )进行了鉴定 相似文献