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661.
研究一类作 为基因选择模 型的离散动力系 统y n + 1 = yn eb( 1 - 2 y n - k )1- yn + yn eb( 1 - 2 y n - k ) , n = 0,1,… ,的稳定性 ,其中 b∈(0,∞), K∈ {1,2,…} 相似文献
662.
产黄青霉菌中细菌血红蛋白的基因表达及工程菌的应用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用产黄青霉HY876作受体菌,建立amds(Acetamidase)基因为选择标记的VHb表达系统.该系统构建包括原生质体的制备和再生;用于真菌表达VHb基因的质粒pVHbM和pVHBI的构建;pVHbM或pVHbI与选择标记质粒pUcamds的共转化;将VHb基因整合到产黄青霉HY876基因组中.结果表明,只有部分转化子整合有VHb基因,VHb蛋白的表达量与其在染色体上整合的位点和整合拷贝数有关,不同转化子产生不同效应.该菌株的摇瓶发酵实验表明,VHb可促进青霉素的合成,使青霉素效价提高39%. 相似文献
663.
GUOTai YANGQian 《高等学校化学研究》2005,21(3):301-305
The chicken anemia virus protein, apoptin, which manifests selectivity and specificity to tumor cells, induces a p53-independent and Bcl-2-insensitive type of apoptosis in various human tumor cells. In this study, the apoptin gene was cloned from the total DNA of chicken anemia virus, and the recombinant vector was constructed. We used oligonucleotide microarray to study the changes of four genes, including Bcl-2, Bcl-xL, Bad and Bax. The post-transfection with the recombinant was also studied. The pro-apoptotic genes(Bad and Bax) and anti-apoptosis genes(Bcl-2 and Bcl-xL) were up-regulated in contrast to the controls. According to the published data, either Bcl-2 or Bcl-xL can form non-functional heterodimers by Bad and Bax binding together, resulting in blocking partly the release of cytochrome c from mitochondria. However, apoptosis could be inhibited by neither the endogenous Bcl-xL nor Bcl-2 over-expression. The experiments show that the apoptin-induced apoptotic pathway is related to the up-regulation of Bad and Bax. Bad was up-regulated by apoptin; then this up-regulated product of Bad was in favor of displacing Bax from binding to Bcl-xL or Bcl-2. Consequently. Bax exerted a pro-apoptotic dysfunction to mitochondria, thereby inducing the release of cytochrome c. Finally, apoptin induced the apoptosis of HHCC cells. These results indicate that the oligonucleotide microarray can reveal the genes related to the apoptosis induced by apoptin in HHCC cells. 相似文献
664.
LIZhao-fa WANGYan LIQing-shan ZHAOZhi-zhuangJoe FUXue-qi LIYu-lin LIYi-lei 《高等学校化学研究》2005,21(3):294-297
PRLs constitute a subfamily of protein tyrosine phosphatases(PTPs). In the present paper are reported the molecular cloning, expression, purification, and characterization of all the three members of the PRL enzymes in human and the only PRL in C. elegans. These enzymes were expressed as glutathione S-transferase (GST) fusion proteins in DE3pLysS E. coil cells, and the recombinant fusion proteins were purified on glutathione-Sepharose affinity columns. Having been cleaved with thrombin, GST-free enzymes were further purified on an S-100 Sepharose gel filtration column. The purified proteins show single polypeptide bands on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. With para-nitrophenyl phosphate(p-NPP) as a substrate, PRLs exhibit classical Michaelis-Menten kinetics with Vmax values two orders of magnitude smaller than those of classic PTPs. The responses of PRLs to ionic strength, metal ions and phosphatase inhibitors are similar to those of other characterized PTPs, but their optimal pH values are different. These data thus reveal distinct common biochemical properties of PRL subfamily PTPs as well. 相似文献
665.
WANG Hui-tang SHAN. Ya-ming TANG Li-li GAO Li-zeng WANG Li-ping LI Wei LI Yu-xin 《高等学校化学研究》2005,21(6):677-679
An antibody phage library was screened with two target molecules, IFNα-2a and FGFR-GST, and the KD value of each round of panning was measured. It was found that the apparent KD values decreased along with each additional panning round, which indicates the increase of the binding affinity between the phage and the target molecules. This result shows that the KD value is a reliable intrinsic parameter and a new method for screening efficiency detection is thus provided. 相似文献
666.
毛细管电泳技术分析PDGF-B基因启动子与蛋白质的复合物 总被引:2,自引:0,他引:2
利用 1.0 %T ,0 %C的线性聚丙烯酰胺 (即丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量分数是 1.0 % ,交联度为 0 % )作为筛分介质 ,对人体血小板长生因子 (PDGF) B基因启动子与核蛋白形成的复合物进行了分析。结果显示主要有两种核蛋白与PDGF B基因启动子具有较强的结合能力 ,能形成DNA蛋白质复合物。所得结论与传统凝胶电泳相似。该方法具有较高的分离度和良好的重现性 ,整个分析可在 5 0min内完成。该方法不失为一种基于PDGF为研究目标、用于PDGF与蛋白质复合物形成及抑制行为分析的快速、准确的实用方法。 相似文献
667.
肽核酸是一种潜在的反义和反基因药物。膦肽结构的引入克服了肽核酸低水溶性和低细胞膜通透性等缺点,有利于肽核酸的应用。本研究报道手性磷肽核酸单体的合成。还原氨化方法被用于实现N-Boc,N-Fmoc保护的丙氨醛与甘氨膦酸二酯的偶联,BBC-Cl,FEP等缩合剂被用于实现碱基侧链和母链的高效缩合。 相似文献
668.
基因传感技术及目前存在的问题和发展对策 总被引:5,自引:0,他引:5
对最近几年报道的比较有特色的光学、压电、电化学等基因(DNA)传感器方面的研究工作进行介绍,并就目前基因传感器研究中存在的问题进行了分析讨论,提出了相应的发展对策. 相似文献
669.
670.
本文采用半化学半酶促法合成了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)的全基因,并在大肠杆菌系统中利用P_RP_1串联启动子进行了温控型的高效表达,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,在摇瓶培养的大肠杆菌中,NAP-1/IL-8的表达量可占菌体可溶性蛋白的18.5%,而在实验室规模的发酵试验中,其表达量则占可溶性蛋白的10.9%.经凝胶过滤层析和阳离子交换层析两个简单的纯化步骤,得到SDS-PAGE纯的重组NAP-1/IL-8,采用琼脂糖平板法进行测定,表明所得NAP-1/IL-8纯品在<10ng/ml的水平上显示出强烈的嗜中性白细胞趋化活性,家兔皮肤试验的结果显示,重组人NAP-1/IL-8可在家兔体内引起早发型超敏反应,采用Edman降解法测定重组人NAP-1/IL-8纯品N末端36个氨基酸的序列,与天然人NAP-1/IL-8的成熟分子完全符合。 相似文献