类风湿性关节炎中医证候计算机数理统计方法初探

从１１０例类风湿性关节炎患者中选取临床最常见的肝肾两虚证、寒热错杂证及寒湿阻络证患者７４例与健康人３０例，仅就人发１４种必需微量元素含量进行计算机数理统计方法的研究，结果表明：三种中医证候类风关患者的Ｃｏ、Ｍｇ、Ｍｏ、Ｓｒ、Ｚｎ含量明显低于健康人，统计学分析呈非常显著性差异（Ｐ＜０．００１）。利用计算机数理统计方法对上述人群的微量元素进行筛选判别及分析，结果表明只要选择适当的特征参量，肝肾两虚证与寒热错杂证的类同关患者的分类判别准确率为９４．６４％，肝肾两虚证与寒湿阻络证患者以及寒热错杂与寒湿阻络证患者的分类判别准确率分别均为１００％．同时对健康人与上述三种中医证候的病例进行判别，其准确率为９５．１９％，获满意结果．     

Development and Validation of a HPLC Method for the Determination of Five Bioactive Compounds in the “Xuebijing” Injection

A reversed phase high performance liquid chromatographic (RP-HPLC) method with ultraviolet (UV) detector was developed for simultaneously determining five bioactive components (i.e., hydroxysafflor yellow A: HSYA; paeoniflorin, ferulic acid, benzoic acid, and danshensu) in “Xuebijing” (XBJ) injection, a widely used traditional Chinese medicine (TCM) for treating sepsis and multiple organ dysfunction syndrome. A Zorbox SB C₁₈ column was used with 0.2% phosphoric acid (V/V)-acetonitrile as the mobile phase under the condition of gradient elution. The five components were analyzed by using a timed wavelength measure according to their maximum absorption wavelength. The intraday and interday precisions of the five investigated compounds were less than 1.17% and the average recoveries ranged from 97.3% to 103.2%. There were good linear correlations between the concentrations of the five components and their chromatographic peak areas (R² ≥ 0.9998), the proposed method was successfully applied to determine the five components in different batches of XBJ injection products, the results indicated that the proposed method is simple, stable, and accurate and could be readily utilized as a quality control method for manufacturing process of XBJ injection.     

基因芯片用于组分中药新双龙方的配伍机制研究

采用基因芯片技术研究了中药新双龙方及其有效组分人参总皂苷和丹参总酚酸治疗急性心肌梗塞(AMI)大鼠的作用机制. 以结扎大鼠冠脉左前降支的方法制备急性心梗模型, 采用大鼠全基因组表达谱芯片分别筛选出AMI大鼠给药前及新双龙方与组分给药后的差异表达基因(Ratio>2或<0.5), 通过对4组差异基因的综合分析, 比较了新双龙方与组分作用方式的异同, 从分子调控水平上探讨复方配伍后的增效作用, 同时对与药效作用机理直接相关的钙离子转运相关的Cacna1d基因和血管修复相关的Flnb基因进行了实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)定量. 结果表明, 新双龙方与2种有效组分对心梗大鼠基因表达的影响不同. 对差异基因的聚类分析以及药物的调控作用比较结果均表明复方比组分的疗效更好; 通路分析结果表明, 新双龙方与组分均主要通过调控钙信号转导通路、 丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路(MAPK)信号等通路发挥药效作用, 且复方涉及更多通路; 筛选出了复方与组分共同调控的靶点基因, 其在3组中具有不完全相同的表达趋势, 但复方具有更积极的调控作用. 本研究结果从分子调控角度证实了复方新双龙方的配伍优势.     

一种基于DAD二极管阵列检测器技术的中药指纹图谱方法

用HPLC/DAD分别建立血府逐瘀口服液单波长指纹图谱和最大吸收指纹图谱, 对比两者峰数量和面积的变化情况, 采用药典委员会2004A版相似度软件评价两种方法的差异. 结果表明, 最大吸收指纹图谱比单波长指纹图谱或多波长指纹图谱更能全面地反映血府逐瘀口服液的色谱峰信息, 并且相似度结果差异明显. 该方法信息量大, 中药的整体性、宏观性及复杂性分析相适应.     

Strategy and Chromatographic Technology of Quality Control for Traditional Chinese Medicines

The application of chromatography, a modern technology, for highly efficient separation and analysis in the research of therapeutic basis matter and quality control of traditional Chinese medicines (TCM), is summarized. A new strategy with metabonomics is put forth to achieve integral study on the therapeutic basis matter and the action mechanism of TCM and to reveal and control the comprehensive quality of TCM. The result shows that modern chromatography and hyphenated techniques are one of the important technique platforms in the quality control of TCM.     

高分辨采样二维液相色谱法同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷含量

采用高分辨采样二维液相色谱法（HiRes 2D-LC）对金银花中绿原酸和木犀草苷进行准确定量分析。第一维液相色谱采用C18色谱柱，以乙腈和0.4%（v/v）磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱；第二维液相色谱采用SB-Phenyl色谱柱，以乙腈和0.5%（v/v）乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱；二维接口采用五位十通阀，并配置2个多中心切割阀，对绿原酸组分和木犀草苷组分进行多次连续切割。实验结果表明，二维液相色谱分析提高了绿原酸和木犀草苷色谱峰的确认能力，可揭示一维液相色谱分析中共洗脱或隐藏峰的信息；高分辨采样模式实现了一维目标组分的片段式整峰切割，提高了二维液相色谱分析的准确定量能力；通过线性关系、基质加标回收和重复性等考察结果，表明高分辨采样二维液相色谱具有优异的定量准确性和重复性，为中药等复杂基质组分样品的分离和准确定量提供了新方法。     

红参类中药注射剂红外光谱法宏观质量控制标准的研究

采用傅里叶变换红外光谱法(FTIR)并结合二阶导数谱和二维相关红外光谱技术(2D-IR),对三种红参类中药注射剂(参附、参麦、生脉)进行了三级鉴定(别)研究。跟踪并找出了批次间、种类间以及中药注射剂与原药材之间谱图的变化规律,根据混合物体系主体成分掩盖的特点,进行了谱图的整体解析,指出了红参类中药注射剂的共有峰和差异特征峰,初步建立了红参类中药注射剂的宏观质量控制标准。提供了宏观质量控制的重要参考数据和评价依据。     

高效液相色谱-线性指纹定量法评价人参归脾丸的三波长指纹图谱

以样品指纹向量与对照指纹向量的多元化学组分间存在线性函数关系为基础,引入相关系数r、斜率a、截距b及线性定性相似度S_L、线性定量相似度M_L等概念,建立线性指纹定量法(linearly quantified fingerprint method, LQFM)模型以定性、定量控制中药质量。用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)同时测定了10批人参归脾丸(Renshen Guipi Wan, RSGPW)分别在203、228和326 nm下的高效液相色谱指纹图谱,运用LQFM理论模型,鉴定RSGPW质量。LQFM能显著区别不同来源的产品,同一厂家产品质量控制一致。鉴定结果与已知的系统指纹定量法评价结果对比,LQFM对中药多元化学成分的复杂系统能实现客观的定性、定量评价。多波长指纹图谱能最大限度地兼顾中药各成分的紫外吸收特征,对中药质量控制具有更全面和可靠的特点。     

血浆游离脂肪酸代谢轮廓柱前衍生定量方法在糖尿病患者中医虚证分型中的应用

以α-溴代苯乙酮为衍生化试剂,十七酸为内标物,建立了糖尿病患者血浆中游离脂肪酸(FFA)代谢谱分析法,实现了6种主要FFA及6种微量FFA的定量分析。用此方法分析了75位临床糖尿病患者的血浆FFA代谢谱,并通过线性判别分析(LDA)对气虚和气阴两虚两种中医虚证进行了关联分析,正判率为94.3%。逐步判别分析结果表明,花生四烯酸(C20:4)和油酸(C18:1)承载了这两种虚证的重要信息,可作为潜在的标志物。利用代谢组学技术研究血浆FFA代谢谱与中医虚证的相关关系对规范证候临床诊断,提高中医药诊疗体系的可信度与可重复性具有重要意义。