鲨鱼软骨血管抑制因子的高效液相色谱与电喷雾质谱研究

电喷雾质谱 ( ESIMS)具有快速、灵敏等特点 ,近年来已成为鉴定和分析多肽、蛋白质和核酸的有力工具 .将 ESIMS与高效液相色谱 ( HPLC)联用 ,在蛋白质分子量、结构及活性位点等方面的研究已取得较大的进展 [1 ] .鲨鱼软骨血管抑制因子 ( SCAIF- I)是作者之一从鲨鱼软骨中提取的一种未知蛋白质[2 ] ,研究表明 ,SCAIF- I对肿瘤、癌症的抑制及治疗具有明显的疗效[3] .因此 ,对其结构的研究具有重要的意义 .本文报道了用 HPL C与 ESIMS对未知蛋白质 SCAIF- I的分子量及肽段部分序列的测定结果 .1　实验部分1 .1　样品制备　 SC…     

17400鲨鱼软骨血管生成抑制因子的纯化及生物学活性研究

采用盐酸胍抽提、膜超滤、丙酮分级沉淀、Sephadex-75柱层析和C₄反相高效液相色谱等分离步骤,从广东阳江鲨鱼软骨中纯化获得新的鲨鱼软骨血管生成抑制因子SCAI-c(SharkCartilageAngiogenesis In-hibitor-c,SCAI-c);SDS-PAGE电泳银染显示为一条带,根据蛋白质的相对迁移率计算,分子量为17400;它对鸡胚绒毛尿囊膜血管的形成具有显著抑制效应,并有明显的浓度依赖关系.SCAI-c与SCAI-a具有类似的生物学特征.     

微波消解衍生化气相色谱-质谱法测定鲨鱼软骨中的脂肪酸

 研究了用微波技术消解衍生化气相色谱 质谱法 (GC MS)快速测定鲨鱼软骨中脂肪酸的分析方法。用正交设计试验优化消解衍生化条件 ,以盐酸 甲醇 (体积比为 1∶4)体系作消解衍生化溶液 ,在 60 0W微波功率作用下加热 4min进行样品的前处理 ,将样品的消解、脂肪酸的衍生化及脂肪酸甲酯的萃取融于一体。方法具有灵敏度高、省时、省试剂、操作方便等特点。该法适用于大批量固体样品中脂肪酸的测定。     

关节软骨两相多孔介质非线性模型的有限元方法

基于混合物理论的两相多孔介质模型可以准确描述关节软骨的力学行为，关节软骨的渗透率与固体相体积应变相关。本文研究这一模型的非线性有限元法。具体采用伽辽金加权残值法得到有限元平衡方程，编制了有限元程序，进而对关节软骨围限压缩蠕变和应力松弛行为进行了数值模拟。与视渗透率为常数的线性模型的计算结果比较表明，在变形较大时，渗透率随固体相体积应变变化这一非线性效应不容忽视。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆和尿液中记忆丧失性贝毒软骨藻酸

建立了高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆及尿液中记忆丧失性贝毒软骨藻酸。人血浆及尿液样品加入6倍体积甲醇沉淀剂,涡旋离心后,取上清液进样测定。色谱柱为Zorbax SB C18柱(150×4.6mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(13∶87,V/V),流速为1.0mL/min。该方法检测血浆和尿液中软骨藻酸的线性范围均为1.8~115μg/L,相关系数r=0.999,检出限为0.9μg/L,定量下限为1.8μg/L。该方法具有操作方便、专属性强、灵敏度高的特点,适用于人体血浆及尿液中软骨藻酸的测定。     

兔膝关节软骨及软骨下骨的吡啶诺林的高效液相色谱测定

兔膝关节炎模型的关节软骨及软骨下骨 ,经盐酸水解 ,纤维素CF11分离吡啶诺林 (Pyr) ,高效液相色谱测定其含量 ;采用 μBondapakC18 柱 (10μm,3.9mm×300mm) ,以V 乙腈∶V 水[0.5 %(φ)七氟正丁酸]=25∶75为流动相,荧光检测器在λem 和λex 分别为390nm和297nm的条件下测定Pyr;在0.250～6.00μmol/L的范围内 ,Pyr含量与峰面积有良好的线性关系 ,r=0.9996 ,加标平均回收率是98 % ,相对标准差(n=6)是3.3 % ;样品测定结果显示 ,8周内 ,关节软骨中Pyr含量逐渐下降 ,软骨下骨中Pyr含量在早期下降 ,随后逐渐升高 ;骨胶原Pyr含量的变化是造成尿液Pyr升高的原因。     

电感耦合等离子体原子发射光谱法测定鲨鱼软骨中硫酸氨基聚糖

报道了鲨鱼软骨中硫酸氨基聚糖测定的新方法－电感耦合等离子体原子发射光谱法（ＩＣＰ－ＡＥＳ）。该方法简单，分析速度快，准确度高。本文首先提出鲨鱼软骨中硫酸氨基聚糖测定的经验公式为：Ｗａｐｓ＝８．２２７·Ｔｓ（Ｗａｐｓ为硫酸氨基聚糖含量，Ｔｓ为鲨鱼软骨中总硫含量），能满足定量分析要求。     

软骨组织工程构建中的生物力学

关节软骨是关节表面具有弹性的承重组织, 其结构复杂, 由固体相和液体相组成. 固体相包括胶原纤维、蛋白多糖等, 属纤维增强型复合结构; 液体相包括水、电解质等.关节软骨提供了一个低磨损和低摩擦的光滑界面, 起缓冲振动和传递载荷等支撑作用. 由于膝关节承受的运动量大、应力高, 关节软骨损伤在临床上较为常见. 但软骨内没有血管, 代谢缓慢, 其损伤后难以实现自我修复. 组织工程从理论上建立了一种治疗软骨缺损的理想方法, 但尚未成为临床上常规的治疗选择. 如何获得结构和功能相匹配, 同时适用于临床治疗的工程软骨, 至今仍是亟需解决的问题.在体外构建功能化工程软骨, 关键在于运用生物反应器对组织施加合适的力学载荷: 首先保证工程软骨复合体内信号分子、营养和废物的有效运输; 其次对支架内种子细胞产生特定的力学刺激; 同时促进细胞外基质结构与功能的适应性发展.本文对力学载荷在软骨组织工程构建中的应用进展加以综述: 按照作用于组织层面的力学载荷传递所需的介质属性, 将其分为液体介导、固体介导和其他媒质介导三种类型, 重点关注不同载荷对工程软骨功能化构建的作用和效果; 分析讨论软骨组织工程构建中存在的关键生物力学问题; 总结和展望软骨组织工程未来的发展趋势.软骨组织工程体外培养需要考虑力学载荷和生化刺激的耦合作用; 在合适的生化条件下进行滚动、滑动和压缩复合加载, 将有利于工程软骨的体外功能化构建.      

碳纳米管复合海藻酸微球药物载体的释药性能

利用PEO137-b-PPO44-b-PEO137三嵌段聚合物促进碳纳米管在溶液中的分散,进而制备出碳纳米管复合海藻酸微球药物载体.碳纳米管的引入对海藻酸微球的结构与形态无明显影响,但有效地提高了其稳定性,药物包封率从76.5%提高到89.2%.进一步研究发现碳纳米管复合海藻酸微球的溶胀行为和药物释放行为继承了海藻酸的pH敏感性,在胃pH 1.0环境中溶胀度仅为约76%,而在肠和结肠pH环境中溶胀度可达到2 000%以上甚至溶蚀,适合于用作肠和结肠中的药物控制释放.同时,碳纳米管的引入能够有效地降低药物的释放速率,提高缓释效果,而且不会额外地增加载体的细胞毒性.     

用荧光光谱跟踪钙-海藻酸水溶液的Sol-gel转变

为了克服传统方法在测定凝胶化点的同时, 作用力对物理交联点的破坏和对大分子链运动的干扰, 探索和建立不施加应力的凝胶化点测定方法, 采用荧光光谱跟踪了异硫氰酸荧光黄(FITC)标记海藻酸与钙离子在水溶液中螯合的物理凝胶化. 随着凝胶化的进行, 荧光相对强度和各向异性比在凝胶化时间曲线的80 min时出现了明显的转折点, 与Winter方法得到的凝胶化点(80 min)完全一致. 因此可以利用FITC标记的荧光发射相对强度及各向异性比来决定钙-海藻酸体系凝胶化点.