NMR在α-synuclein的结构及相互作用研究中的应用

α-synuclein(AS)是一种和帕金森病(PD)密切相关的天然无结构蛋白,是PD标志物路易小体(LB)的主要成分.AS异常聚集和纤维化被认为是引起PD的主要原因之一,因而针对其结构、聚集和功能的研究一直是国际上的热点.核磁共振(NMR)技术能获得具有原子分辨率的蛋白质结构和动态信息,尤其适合研究其它生物物理方法难以研究的天然无结构蛋白.该综述主要讨论NMR技术结合其他技术手段在AS的结构、聚集机制、以及与生物膜、金属离子和其它蛋白质相互作用研究中的应用.这些研究结果为探索PD的发病机制提供了有益的线索.     

肾性骨病防治新方法探索

近些年来随着物质条件的改善、生活方式的改变以及环境因素的影响,患慢性肾功能衰竭的病人逐年大幅度递增。据统计:慢性肾炎患者中45%、糖尿病患者中30%、高血压患者中20%的人群最终都会发展到慢性肾功能衰竭即尿毒症期。尿毒症患者不仅在经济上、心理上承受了巨大压力,同时身体上伴随着多种并发症:肾性骨病、肾性贫血、极度营养不良等等。其中肾性骨病最难以控制。随着患者病程加长,尿毒症患者的甲状旁腺素从正常人的16~65 pg/m L到几百pg/m L再到一千多pg/m L,最终部分患者不得不切除甲状旁腺。然而切除甲状旁腺患者病情得到短时间缓解,但最后仍然无法控制病情发展。从2012年开始,我们科研组在李增禧研究员的带领下,运用40多年来的研究成果,充分利用元素在人体新陈代谢和生化反应过程中的协同与拮抗关系,掌控钙代谢过程中的关键环节,增加人体对钙离子的有效吸收和利用,成功地控制了尿毒症患者骨钙的进一步流失。患者得到充足的钙营养,就保障了尿毒症患者血钙的9大生理功能正常发挥,使患者的生活质量得到了较大的提高,减轻了病人的痛苦和家庭的经济负担,得到了很多患者和医务人员的认同和肯定。     

溶液中金属盐对溶菌酶高级结构的影响

探索蛋白质结构稳定性及其淀粉样纤维化的环境条件具有重要意义.本文采用了荧光光谱法研究溶液中的金属盐对鸡卵清溶菌酶内源荧光和淀粉样纤维化的影响.结果表明,金属盐能够增加溶菌酶的热稳定性,减小淬灭剂对内源荧光的作用,对溶菌酶的高级结构具有一定的稳定作用.另一方面,在长时间热胁迫的情况下,金属盐可促进溶菌酶分子的聚集而纤维化.金属盐的这种双重作用分别与其阳离子和阴离子的性质有关.     

反相高效液相色谱法测定康肾颗粒中的葛根素

建立了反相高效液相色谱分离、质谱定性、紫外检测定量测定康肾颗粒中葛根素含量的方法。采用YMC-ODS色谱柱(4.6 mm i.d.×100 mm,10 μm),选用甲醇(含0.1%三氟醋酸)和水(含0.1%三氟醋酸)体系为流动相,非线性梯度洗脱分离,流速1.0 mL/min,检测波长250 nm;用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析鉴定对照品和样品的馏分,在确定目标峰后进行紫外检测定量测定。结果表明,葛根素在0.132 ~1.32 μg范围内其峰面积与进样量呈良好的线性关系（r=0.9997）,平均加标回收率高于103%,相对标准偏差低于2.0%(n=6)。应用该方法测定康肾颗粒中葛根素,其平均含量为3.09 mg/g。该方法简单、快速、重现性好。     

A High-affinity Activator of G551D-CFTR Chloride Channel Identified By High Throughput Screening

A stably transfected CHO cell line coexpressing G551D-CFTR and iodide-sensitive yellow fluorescent protein mutant EYFP-H148Q-I152L was successfully established and used as assay model to identify smallmolecule activators of G551D-CFTR chloride channel from 100000 diverse combinatorial compounds by high throughput screening on a customized Beckman robotic system. A bicyclooctane compound was identified to activate G551D-CFTR chloride channel with high-affinity(Kd=1.8 μmol/L). The activity of the bicyclooctane compound is G551D-CFTR-specific, reversible and non-toxic. The G551D-CFTR activator may be useful as a tool to study the mutant G551D-CFTR chloride channel structure and transport properties and as a candidate drug to cure cystic fibrosis caused by G551D-CFTR mutation,     

二烯丙基双酚A醚接枝聚乙烯增容聚碳酸酯/聚乙烯合金中的纤维化增韧现象

采用二烯丙基双酚A醚 (DBAE)接枝聚乙烯 (DBAE g PE)作为聚碳酸酯 (PC) /聚乙烯 (PE)合金的增容剂 ,通过测试合金的冲击强度和裂纹扩展功 (G1C)发现 ,PC含量约为 15份时 ,被增容的合金出现超常的增韧现象 .对合金的断裂表面形态用扫描电子显微镜 (SEM )观察发现 ,未增容的合金呈典型的脆性断裂 ,增容的合金在PC为 15份时 ,PC出现明显的塑性变形 ,形成纤维 .本文就此提出纤维化增韧机制 ,并结合结构模型用纤维化增韧机制初步解释了PC/PE合金的超常增韧现象 .     

肌球蛋白Ⅱ缺失细胞胞质分裂机制研究

哺乳动物细胞胞质分裂过程中伴随着一系列形态学改变,随着分裂沟不断收缩,形成连接两个子细胞的细胞间桥.间桥不断拉长、变细,直至断裂、生成两个子细胞.采用细胞力学和形态学测量及分析方法,通过施加肌球蛋白Ⅱ抑制剂,定量研究了NRK细胞间桥变细动力学;采用细胞免疫荧光技术,检测了早期胞质分裂肌动蛋白的分布,揭示肌球蛋白Ⅱ缺失细胞胞质分裂可能的机制.结果表明:施加肌球蛋白Ⅱ抑制剂的NRK细胞,其整体形态学和细胞间桥形态学曲线明显不同于0.3%DMSO组.根据流体力学特性和所测量的力学参数对曲线进行模拟发现,表面张力对肌球蛋白Ⅱ抑制组细胞的间桥动力学曲线轨迹影响很大.研究结果提示由细胞力学特性决定的拉普拉斯压力和细胞运动共同参与了肌球蛋白Ⅱ缺失细胞胞质分裂的调节.     

日本沼虾(Macrobrachium nipponense)触角腺的超微结构

利用透射电镜对日本沼虾触角腺的体腔囊、迷路、原肾管和膀胱的超微结构进行了研究．体腔囊由足细胞和内皮细胞组成，其中足细胞的三级足状突起分支细而多，并密布于裂隙膜上，足细胞及其足状突起之间可见隔壁连接，内皮细胞与开放式血腔相临、沿基底膜有许多窗孔．迷路细胞游离端具长而发达的微绒毛，基底及两侧质膜内陷发达，并具丰富的长杆状线粒体．原肾管细胞的微绒毛短少而零乱，基底及两侧质膜内陷更为发达，原肾管细胞之间存在有中间连接和隔壁连接．研究结果证实：日本沼虾触角腺的体腔囊、迷路和原肾管的超微结构与哺乳动物肾单位的肾小球、近曲小管和远曲小管的超微结构相似，具有肾单位一样的生理功能，而膀胱扁平细胞还兼有肾脏收集管的功能．     

慢性呼吸性酸碱平衡紊乱时肾调节能力的量化研究

在慢性呼吸性酸碱平衡紊乱研究中,引入一新的概念,即顺应性C=Δ[HCO_3^-]/ΔPaCO_2,它的变化范围大小能够描述肾调节能力的大小.为了将肾调节能力进行了量化,以X=PaCO_2为自变量,Y=C=Δ[HCO_3-]/ΔPaCO_2,它的变化范围大小能够描述肾调节能力的大小.为了将肾调节能力进行了量化,以X=PaCO_2为自变量,Y=C=Δ[HCO_3^-]/ΔPaCO_2为因变量,分别绘制出顺应性C=Δ[HCO_3-]/ΔPaCO_2为因变量,分别绘制出顺应性C=Δ[HCO_3^-]/ΔPaCO_2范围中左端点和右端点的散点图,并求出其拟合曲线方程及其变化率,这种定量方法为进一步深入研究肾的调节能力提供依据.