2-(4-取代-苯基)-3-异噻唑啉酮抗菌活性的定量构效关系研究

用密度泛函理论和逐步回归分析方法对22种新合成的2-(4-取代-苯基)-3-异噻唑啉酮化合物进行了结构与抗菌活性研究. 通过对平衡几何构型、前线轨道组成和Mulliken电荷分布的分析得出: S(1), N(2)原子是该类化合物的主要活性部位, 且5位氯取代的化合物抗菌活性较好. 通过回归分析, 筛选了影响抗菌活性的主要因素, 建立了定量构效关系方程. 结果表明, 硫原子的亲核前线电子密度、3D-Balaban指数、S(1)-N(2) Wiberg键级和Schultz分子价拓扑指数是影响异噻唑啉酮类化合物抗大肠杆菌活性的主要因素, 所得模型对化合物抗菌活性有较好的预报能力.     

乙醇含量的酶法测定

利用醇脱氢酶(ADH)催化乙醇与氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)反应的原理，通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)吸光度的变化率得出其酶促反应速度，对应不同的乙醇含量而制得标准曲线，试样中乙醇含量由测定值查标准曲线求得；讨论了pH值和抑制剂对测定的影响；方法简便、快速、准确。     

醇脱氢酶在反胶束溶液中的酶学性质研究

以十六烷基三甲基溴化铵(CATB)-辛烷-戊醇反胶束体系对醇脱氢酶(ADH)进行固定化,考察了pH、含水量、表面活性剂和助溶剂浓度对ADH固定化的影响。对游离酶和固定化酶的催化动力学性质研究表明:酶促反应的最适pH值均为9.0,最适温度分别是28℃和20℃,对乙醇的米氏常数分别为8.8mmol/L和5.5mmol/L。25℃时,游离酶存放120min约失活90%,而固定化酶仅失活30%,表明反胶束固定化ADH具有较好的热稳定性。     

小鼠组织中肝靶向前药5-氟尿嘧啶含量的高效液相色谱法测定

以5-溴尿嘧啶为内标,建立了高效液相色谱法测定小鼠组织中肝靶向前药(半乳糖化人血清白蛋白与5-氟尿嘧啶偶联物)中5-氟尿嘧啶(5-FU)含量的分析方法.样品经盐酸水解、乙酸乙酯提取、离心后,取上清液在40 ℃下用N2吹干,用流动相溶解、定容后进样分析.色谱条件:安捷伦Hypersil C18色谱柱(4.0 mm×250 mm, 5 μm),流动相为甲醇-磷酸缓冲溶液,流速0.7 mL/min,UV检测波长为270 nm.方法的线性范围为1 ～20 mg/L,检出限(S/N=3)为0.1 mg/L,回收率为93% ～104%.该法操作简便、灵敏度高,适于组织中肝靶向前药半乳糖化人血清白蛋白与5-氟尿嘧啶偶联物(Gal-HSA-5-FU)的5-FU含量测定.     

甲氨喋呤-乳糖酰基壳聚糖的制备及其体外实验

制备了不同乳糖酰基取代度的N-乳糖酰基壳聚糖(LCH), 并通过红外光谱(IR)及核磁共振氢谱(1H NMR)对其进行了结构表征. 体外放射性配基竞争结合实验结果显示, 当乳糖酰基取代度为15.5%~38.9%时, LCH对肝实质细胞膜表面去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)具有特异亲和性, 即具有潜在的肝靶向性. 将甲氨喋呤(MTX)与壳聚糖以酰胺键偶联, 制备MTX-壳聚糖(MTX-CH), 再与乳糖酸反应生成目标产物MTX-乳糖酰基壳聚糖(MTX-LCH), 并通过紫外分光光度法(UV)检测MTX的取代度为5.6%, 乳糖酰基取代度为33.8%. 溶解性实验结果显示, MTX-LCH溶于pH=1~14的水溶液; 体外释放实验结果表明, MTX-LCH性质稳定, 能明显延缓MTX的释放.     

固定化醇脱氢酶的制备及性质

以壳聚糖为载体,通过交联结合使醇脱氢酶(ADH)得以固定化。固定化的最适条件为:交联剂戊二醛浓度0.6%,pH值6.8,酶的偶联时间2.5h。对游离酶和固定化酶的动力学性质研究表明,酶促反应的最适pH分别为8.2和8.4,最适温度为34℃和35℃。酶的米氏常数为13mmol·L-1和48mmol·L-1。与游离酶相比,固定化酶在复用性上具有优势。应用固定化酶测定了试样中铬含量。     

光动力作用促人肝癌细胞HepG2凋亡及对bax，bcl-2蛋白表达的影响

应用流式细胞仪分析光动力作用后细胞凋亡及免疫组化染色检测凋亡相关蛋白bcl-2蛋白，bax蛋白表达水平．发现血卟啉光动力实验组人肝癌细胞HepG2凋亡率达24．23±1．86％，与对照组相比，差异非常显著（P〈0．01）；光动力作用后凋亡相关蛋白bcl-2表达显著高于对照组（P〈0．05）；实验结果显示血卟啉光动力作用具有诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的生物学效应，而凋亡调控蛋白bcl-2表达水平的降低可能是血叶林光动力作用诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的一个重要机制．     

叶酸的低温磷光分析

叶酸有光、酸中强、碱中弱、HCl浓度高,光强,但不稳定。叶酸经紫外光照射后光增强,增强量与叶酸含量成比例,建立了叶酸的低温光分析法,并用作小鼠,豚鼠肝中叶酸含量分析