用HGAA法和DANMF法测定血清和猪肝中硒

以ＨＮＯ３－ＨＣｌＯ４消化试样，用Ｈ２Ｏ２还原Ｓｅ（Ⅵ）至Ｓｅ（Ⅳ）后，以氢化物原子吸收法和２，３二氢基萘荧光法分别测定了血清和猪肝中总硒。试验表明，两种方法有相当的检出限、准确度和精确度。对猪肝标样ＧＢＷ０８５５１和血清样的分析，方法的ＲＳＤ（ｎ＝５）猪肝样为４％，血清样为２％。     

酮咯酸、菲普拉宗与血清蛋白相互作用的研究

血清蛋白是血浆中含量最丰富的重要载体蛋白,它可与许多内源性物质和药物广泛结合［１］,酮咯酸、菲普拉宗分别为非甾类、吡唑酮类消炎镇痛新药［２］．有关酮咯酸、菲普拉宗与蛋白质相互作用的文献尚未见报道．本文研究了在人体生理条件下,酮咯酸、菲普拉宗与牛血清蛋白、人血清蛋白的相互作用,利用药物对血清蛋白荧光的猝灭求出了酮咯酸、菲普拉宗与蛋白质的结合常数和结合位置．并根据热力学参数确定了它们之间的主要作用力类型．这对于阐明不同药物对蛋白的不同作用方式及药物在人体内的作用机制都有一定的意义．１　实验部分１．１…     

荧光分光光度法研究对乙酰氨基酚与牛血清白蛋白之间的相互作用

在模拟人体生理环境下,用荧光分光光度法及紫外-可见分光光度法研究了解热镇痛药对乙酰氨基酚(简写作PTL)与牛血清蛋白(BSA)之间的相互反应.试验结果发现:由于非辐射能量转移引起的荧光猝灭,BSA的荧光强度因与PTL相互之间的结合反应而明显降低.按Stern Volmet方程和Lineweaver-Burk方程对所得实际数据进行了处理,求得此结合反应的静态平衡常数(KLB)为2.592×103 mol·L-1(297 K),其结合位置距212位色氨酸1.94 nm.根据结合反应的热力学参数,推断PTL与BSA之间的结合力为疏水作用力.     

邻菲咯啉合铜配合物与牛血清白蛋白的相互作用

利用荧光光谱法研究了两种配合物,[Cu（phen）（L-Phe）（H2O）]ClO4（1）（L-Phe为L-苯丙氨酸根）和[Cu（phen）（Gly）（H2O）]ClO4·2．5H2O（2）（Cly为甘氨酸根）,与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。结果表明,牛血清白蛋白的荧光强度随着配合物浓度的增大而逐渐降低,配合物（2）与BSA的结合常数大于配合物（1）与BSA的结合常数,牛血清白蛋白对配合物的结合位点数为1,荧光猝灭作用机理为静态猝灭．     

荧光共振能量转移测定牛血清白蛋白的研究

随着生物分析技术进入了后基因组时代,生命科学领域里的研究课题不断深入,DNA、RNA、蛋白质和其他生物大分子的检测技术发展十分迅速,生命科学中单分子分析技术不断揭示出生命活动的客观规律.相关的新的分析方法和仪器不断取得进展,成为生命科学的前沿领域.     

探针5-硝基水杨酸同步荧光法测定生物样品中蛋白质

在模拟体液离子强度下,基于5-硝基水杨酸(5-NSA)与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以5-NSA为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法. 体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质、反应温度等因素的影响. 结果表明,在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在3.2×10-8～6.4×10-8 mol/L的质量浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为1.7×10-8 mol/L(n=11). 对血清、尿样和唾液样品进行了测定,回收率在99.96%～100.04%之间.     

腺苷与人血清白蛋白间相互作用的荧光光谱及分子模型法研究

在模拟人体生理条件下,结合紫外光谱和分子对接模型运用荧光光谱研究了腺苷与人血清白蛋白(HSA)间的键合作用。腺苷有较强的能力猝灭人血清白蛋白的内源荧光,且根据Stern-Volmer方程判断出猝灭机制为静态猝灭。本文运用相应的荧光值和Vant’Hoff热力学方程求得了不同温度下的结合常数(K)以及一些热力学参数,如焓变(ΔH)和熵变(ΔS)。结果表明：键合过程中疏水作用力对新化合物的稳定性起主要作用,这与分子对接模型方法研究的结果基本一致。另外还研究了常见离子对结合常数的影响。     

毛细管电泳应用于测定牛血清白蛋白与脂质体的相互作用

建立了一种用毛细管电泳法检测牛血清白蛋白(BSA)与脂质体相互作用的分析方法。氧化指数的测定实验结果表明经过冷冻干燥的脂质体稳定性更好;毛细管电泳表征脂质体的电荷性质实验结果表明脂质体在pH 5.0～8.0的条件下呈电中性。在pH 7.0的条件下,以各种浓度的脂质体混悬液为电泳缓冲液,以0.8%二甲亚砜(DMSO)为内标,随着缓冲液中脂质体质量浓度从0增加到2.4 mg/mL,BSA的有效淌度从-2.232×10-4 cm2·V－1·s－1变化到-3.046×10-4 cm2·V－1·s－1;结合Scatchard分析,测得BSA与脂质体的结合常数为2.522×103(g/mL)－1。该方法简单、快速,为研究蛋白质与脂质体的相互作用提供了新的技术手段。     

光度法研究L-半胱氨酸修饰的ZnS纳米粒子与牛血红蛋白的作用

L-半胱氨酸;ZnS纳米粒子;牛血红蛋白;紫外光谱;荧光光谱;FTIR-ATR     

光谱法与分子模拟技术研究杨梅素与牛血清白蛋白的相互作用

利用紫外光谱、荧光光谱、红边激发荧光位移(REES)法、圆二色谱(CD)结合分子模拟技术共同研究了模拟生理条件下杨梅素与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,阐述了相互作用机制.分子模拟结果表明,杨梅素与蛋白在亚结构域II A的疏水腔内结合,主要作用力为疏水作用力和氢键.依据荧光猝灭法判断猝灭机制为静态猝灭,并得到不同温度下药物与蛋白相互作用的结合常数(Ka)及结合位点数(n),根据热力学参数判断出作用力类型,并且计算出杨梅素与蛋白的结合距离,与分子模拟得到的判定结果基本一致.通过紫外光谱、同步荧光光谱以及REES法获得的信息讨论了相互作用时BSA中色氨酸(Trp)微环境的变化;并利用CD谱的测定结果定量计算了BSA二级结构中α-螺旋含量的变化.