金纳米团簇功能化及其在生物医学中的应用

对单分子层保护的金纳米团簇(Au-MPCs)进行化学修饰,可制成多元单层修饰的金纳米团簇（Au-MMPCs）。常用的修饰方法为配体交换法,这种方法用带有生物活性基团的巯基化合物或二硫化合物取代Au-MPCs表面的配体分子,形成多元单层修饰的金纳米团簇。巯基化合物或二硫化合物中的生物活性基团可使所制备Au-MMPCs与蛋白质、核酸或细胞膜等作用,使Au-MMPCs具有相应的生物活性,从而能广泛应用于细胞转染、药物传输、酶活性调控等生物医学领域。本文介绍了用Brust-Schiffrin法制备Au-MMPCs的机理及影响因素,基于Au-MMPCs的方法及相关机理,综述了Au-MMPCs在生物医学中的应用。     

离子束注入对小麦幼苗保护酶活性及脂质过氧化作用的影响

采用能量为2 5 ke V的N+不同剂量(2×1 0 1 6 N+ / cm2、4×1 0 1 6 N+ / cm2、6×1 0 1 6 N+ / cm2、8×1 0 1 6N+ / cm2、1 2×1 0 1 6 N+ / cm2 )注入新疆春小麦种子,研究了N+离子束注入小麦种子后对小麦幼苗体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)含量的影响.结果表明,离子束注入新疆春小麦种子后,该种子萌发的幼苗体内MDA积累减少,SOD活性降低;高剂量注入后,CAT和POD活性提高.     

有机磷水解酶的大肠杆菌细胞表面展示与酶活特性

利用丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)KCTC1832菌株的冰核蛋白(InaK)的N-末端作为锚定单元和来自黄杆菌(Flavobacterium sp.)ATCC27551菌株opd基因编码的有机磷水解酶作为功能蛋白,构建了一株具有全细胞催化效应的大肠杆菌(Escherichia coli)表面展示工程菌MMBL-405.对该工程菌全细胞有机磷水解酶活性的正交试验结果表明,在诱导物IPTG浓度为 0.1 mmol/L、诱导温度为20℃、诱导时间为8 h和Co2 添加浓度为100 μmol/L的优化培养条件下,其全细胞酶活性可达到0.62 U/mg细胞干重,是目前国外同类工作所报道酶活性的13.7倍以上.对工程菌所携带的外源质粒在无抗性条件下的稳定性进行了测定,结果表明工程菌经连续转接7次和继代培养168 h后,质粒携载率仍达到60%.     

心肌细胞膜ATP酶活性在线测定及变化规律研究

基于流动注射停流技术和软物质在线采集技术建立了一种快速磷钼染色法测定细胞膜三磷酸酰苷(ATP)酶活性的方法.与传统方法相比,该分析方法速度提高了7倍,而且操作简便,试剂消耗少.将该方法应用于兔心肌细胞膜ATP酶活性变化规律的研究,结果显示酶活性在研究时间内按一定规律递减.为细胞膜及其受体的纯度、活性等相关研究提供了重要信息.     

烷基咪唑离子液体对脂肪酶催化酯水解反应活性的影响

考察了1-烷基-3-甲基咪唑类离子液体对柱状假丝酵母脂肪酶(CRL)催化橄榄油水解反应活性的影响,利用电导法确定了磷酸盐缓冲液中Br^-,Cl^-,[BF₄]^-系列咪唑离子液体的临界胶束浓度(CMC)和[PF₆]^-系列咪唑离子液体的溶解度.结果显示,离子液体的阴、阳离子对酶活性的影响规律与离子液体的Kosmotropicity性质无明显关联,但与离子液体在体系中的含量密切相关,在最适离子液体含量时,酶活性达到最高;阳离子[C_nMIM]⁺中的n越大,可促进酶活性的离子液体适宜含量越低;Br^-,[BF₄]^-系列离子液体的浓度超过CMC时则抑制酶活;阴离子对酶活性的最大促进作用顺序为Br^->Cl^->[BF₄]^->[PF₆]^-.离子液体对酶活性的影响随体系pH和温度的不同而改变,在最适离子液体浓度时的最适pH均为7.000.在pH 7.000,30 ^oC以及[C₈MIM]Br离子液体浓度为47.6 mmol/L的最佳条件下,最高相对酶活力和比活力分别达到1734%和54.4 U/mg protein.     

量子点标记天花粉蛋白的研究

将半导体量子点应用于记天花粉蛋白,研究了量子占标记天花粉蛋白的吸收光谱、荧光光谱和酶活性变化,与游离的QDs 相比,QDs-TCS的吸收光谱在400－600nm范围内不发生明显变化,QDs-TCS的发射光普发生蓝移,但发射半宽不变,标记上QDs后TCS的酶活性没有发生改变,利用双光子激发扫描荧光显微镜和激光共取焦显微镜同时观察QDs-TCS在人绒癌细胞内的分布发现,QDs-TCS能够跨膜进入细胞,并在细胸核周围呈聚集分布。     

重金属离子对猪胰α-淀粉酶活性影响的作用机理研究

通过在α-淀粉酶介质中加入Ce^3 ,Cd^2 和Pb^2 ,研究其对α-淀粉酶活性影响的作用机理。结果表明,低浓度重金属离子对酶活性有激活作用,高浓度则严重抑制酶活性。在高浓度下,Ce^3 ,Cd^2 和Pb^2 能完全竞争出α-淀粉酶中的Ca^2 。荧光滴定结果表明,Ce^3 ,Cd^2 和Pb^2 不仅可能完全占据Ca^2 的结合位点,而且还可能在Ca^2 的结合位点以外的氨基酸残基上结合,从而导致酶的构象改变。     

多孔壳聚糖膜固定葡萄糖氧化酶活性的X射线微区分析

甲壳素(chitin)是无脊椎动物,特别是节肢动物,如虾、蟹及昆虫等的外骨骼重要组成部分,其学名为β(1,4)-2-乙酰氨基-2-脱氧-D-葡萄糖。壳聚糖是甲壳素脱乙酰基的衍生物,其结构上具有许多—NH2、—OH等反应基团,对蛋白质具有极高的亲和性,且具有生物相容性好、无毒、可生物降解等     

Tb3+离子与植物辣根过氧化物酶的作用方式探讨

利用紫外可见吸收光谱、红外光谱、荧光光谱、原子吸收及酶分离方法,首次研究了稀土离子Tb^3 与植物辣根过氧化物酶(HRP)的相互作用方式．结果表明,Tb^3 与HRP作用方式包括：(1)Tb^3 与肽链上的氨基酸残基作用,影响酶活性中心的微结构;(2)Tb^3 能部分取代酶中的Ca^2 ;(3)Tb^3 能部分剪切肽链上的氨基酸残基,改变酶的结构。因此,Tb^3 与HRP的相互作用可能以一种方式为主,或几种作用方式同时存在。     

苜蓿胚状体的分离及其发育过程中几种酶活性的变化

通过组织培养技术获得了来源于苜蓿下胚轴愈伤组织的胚状体，并对胚状体的分离及发生和发育过程中过氧化物酶、酯酶和超氧化物歧化酶活性的变化进行了研究。结果表明，过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性变化表现出类似的规律性，即在球形胚时期二种酶的活性达到最大值，胚性愈伤组织时期次之，非胚性愈伤组织和子叶胚时期酶的活性较低。酯酶在球形胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶胚时期的活性明显高于非胚性愈伤组织时期，且按照胚状体发生和发育的进程，酶活性呈现出上升的趋势。