糖苷酶底物6-氯-4-甲基伞形酮-α-L-艾杜糖醛酸苷的合成

为了开发用于粘多糖贮积症I型疾病检测的α-L-艾杜糖醛酸荧光酶底物,以廉价易得的葡醛酸内酯为起始原料合成1,2,3,4-四-O-乙酰基-β-D-葡萄糖醛酸甲酯,经过自由基溴代及自由基还原合成1,2,3,4-四-O-乙酰基-α-L-艾杜糖糖醛酸甲酯,以Mitsunobu反应为关键步骤合成糖苷键,最后脱除保护基团得到6-氯-4-甲基伞形酮-α-L-艾杜糖醛酸苷.用单晶衍射确证了关键中间体的结构,初步的酶学测试证明该底物可用于α-L-艾杜糖醛酸酶活性的快速检测.     

具有谷胱甘肽过氧化物酶活力的含碲环糊精衍生物

设计并合成了谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)模拟物6A,6A’-二苯胺-6B,6B’-二碲桥联-β-环糊精(6-AnTeCD),采用双酶偶联法进行GPx活力测定和酶反应动力学分析,通过噻唑蓝(MTT)比色法评价了6-AnTeCD对H2O2诱导心肌细胞氧化损伤的保护作用.结果表明,6-AnTeCD催化谷胱甘肽(GSH)还原过氧化氢(H2O2)的活力高于6-AnSeCD、6,6’-二碲桥联-β-环糊精(6-TeCD)和Ebselen等GPx模拟物.稳态动力学分析显示,6-AnTeCD的催化机制为乒乓机制.6-AnTeCD分子兼具引入底物结合部位和改造催化部位的双重优点,具有分子量小、毒性低及可有效保护心肌细胞免受氧化损伤的优点.     

苯磺酰胺从碳酸酐酶II中脱离过程的分子动力学模拟

综合运用分子动力学模拟和自由能计算方法研究了苯磺酰胺分子从碳酸酐酶II (CA II)的活性位点脱离过程中底物与酶之间的动态相互作用. 脱离过程的平均力势(PMF)显示, 底物脱离时存在一个特殊的结合状态. 其中, 静电相互作用占据了主导地位. 轨迹分析显示, 除了金属离子的配位作用之外, 底物脱离路径上的关键残基Leu198、Thr199和Thr200通过与底物磺胺基的氢键作用阻碍了底物从酶中的脱离. 当前的研究对于深入认识磺胺类药物与CA II的详细结合过程和相关的药物改良与设计具有重要的指导意义.     

核苷中2'-位取代基对Burkhoideria cepacia脂肪酶选择性酰化核苷的影响

研究了核苷结构中2'-位含有不同取代基时Burkholderia cepacia脂肪酶促3'-位羟基高区域选择性酰化反应.结果表明,该脂肪酶催化核苷类似物酰化的优势产物均为3'-酯,且随着酰基供体链的增长,3'-区域选择性逐渐升高;在酶促核苷癸酰化反应中,当核苷2'-位含有H,F,Cl和Br取代基时,3'-区域选择性最...