亲水相互作用色谱高效分析人尿液中的ATP

建立了亲水相互作用色谱法高效分析人体尿液中三磷酸腺苷(ATP)的方法。ATP是高能磷酸盐化合物,一种不可替代的生物分子。在本文中,分别使用反相色谱柱和亲水相互作用色谱柱测定ATP。结果表明:在亲水相互作用(HILIC)色谱分离模式下,流动相为甲醇-0.1%的甲酸水溶液=10∶90(v/v)、柱温30℃、流速0.4 mL·min~(-1)、检测波长258 nm时,对ATP的分离效果最佳。在此条件下,测定人尿液中的ATP含量,并在部分样品中的检出1.04～1.65 mg·L~(-1)。进一步加标试验的回收率在77.09%～112.83%之间,相对标准偏差低于13.50%。     

三维荧光校正法直接测定尿液中的利血平

利用化学计量学三维数据校正方法中的交替三线性分解算法(ATLD)和自加权交替三线性分解算法(SWATLD), 不经化学分离, 对采用激发-发射矩阵荧光法所得到的三维响应数据阵进行三线性成分分解, 再基于标样已知浓度, 利用简单回归法直接测定尿液中利血平(Reserpine)的含量. 结果表明, 当体系的主要组分数取3时, 两种方法均可迅速、 快捷地得到待测物的浓度, 有效地解决了荧光法定量测定时未知背景及干扰物光谱严重重叠而引起的问题.     

气相色谱-微池电子捕获器检测尿液中的三唑仑

建立了气相色谱-微池电子捕获检测器(GC-μECD)检测尿液中三唑仑的方法。筛选了pH值、提取溶剂、涡旋时间,优化了液-液萃 取条件。在0.2～50 ng/mL范围内,线性关系良好,相关系数为0.9995;方法的检出限为0.1 ng/mL,日内和日间测定的相对标准偏差分 别为4.17%和5.31%,平均回收率为93.9%。该方法操作简便、灵敏度高、线性范围广、回收率高,完全能够满足日常检测工作的需要。     

气相色谱-质谱联用技术用于尿样中β-阻断剂的初筛定量和确证

建立了一种同时测定5种β-阻断剂(卡替洛尔、艾司洛尔、普萘洛尔、索他洛尔、比索洛尔)的气相色谱-质谱方法(GC-MS),并用于疑似阳性实际尿样的初筛、定量和确证。分别对游离态和结合态药物进行了提取,合并提取液后采用N-甲基-N-三甲基硅基-三氟乙酰胺(C6H12F3NOSi, MSTFA)和N-甲基-双三氟乙酰胺试剂(C5H3F6NO2, MBTFA)进行混合衍生。确定了优化的GC-MS条件,建立了采用选择离子监测方式（SIM）初筛和全扫描方式（SCAN）确证的实验流程;建立了SIM模式下5种β-阻断剂的尿样加标工作曲线,其SIM方法的检出限达0.2～1.0 ng/mL,尿样的加标回收率为70.5%～103.4%,相对标准偏差小于14.9%。该方法成功地用于普萘洛尔阳性尿样的检测,并绘制了普萘洛尔的尿代谢曲线。该方法对兴奋剂检测中β-阻断剂滥用的控制有重要的意义。     

稳定同位素稀释-液相色谱-串联质谱法快速检测血浆和尿液中米酵菌酸和异米酵菌酸

建立了稳定同位素稀释-液相色谱-串联质谱法快速检测血浆和尿液中米酵菌酸和异米酵菌酸的方法.样品经乙腈蛋白沉淀净化、反相C18色谱柱分离后,采用电喷雾串联质谱,选择反应监测(SRM)模式下检测,溶剂标准曲线内标法定量.在2.0～400μg/L浓度范围内,米酵菌酸和异米酵菌酸呈良好的线性关系,相关系数大于0.9984;方法...     

固相萃取-分光光度法测定人体尿液中亚硝酸盐的含量

亚硝酸盐中毒发生时,为了快速准确测定人体尿液中的亚硝酸盐的含量,建立了固相萃取-分光光度的分析方法。本方法是基于亚硝酸盐的重氮偶合反应,采用固相萃取技术对尿液进行净化处理后,消除了基质干扰,提高了测试灵敏度,通过对比考察了固相萃取柱类型、重氮化剂种类、重氮化剂质量浓度、反应酸度、偶合剂质量浓度及反应时间等试验参数对测试结果的影响,得出了最佳的试验条件,确定了试验方法为尿液离心后经HLB固相萃取柱净化除杂,取过柱液2.0 mL于比色管中,用水定容至5.0 mL,依次加入0.5 mL对氨基苯磺酰胺酸性溶液（50.0 g/L）和0. 5 mL盐酸萘乙二胺溶液( 2.5 g /L)进行重氮偶合显色反应10 min,于波长544 nm 处进行吸光度的测定,以工作曲线外标法定量。 结果显示,亚硝酸盐在0.033-0.986 μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9998,尿液在0.246-2.054 μg/mL三种加标水平范围内亚硝酸盐的平均回收率为96.3%-106.1%,表明HLB固相萃取柱有效去除了影响重氮偶合反应的干扰物质,达到了满意的净化效果。日内和日间测定值的相对标准偏差（RSD）分别为2.01% -3.58%和2.21%- 4.75%,方法检出限为0.010 μg/mL,定量下限为0.033 μg/mL。该方法操作简单、快速,精密度和准确度良好,且检出限低,适用于人体尿液中亚硝酸盐含量的快速检测。     

高效液相色谱-化学发光法测定复方吲哚美辛酊及人体尿液中的吲哚美辛

在酸性条件下,硫酸铈将分别氧化钌(II)联吡啶和吲哚美辛,产生的氧化产物会相互反应而发生化学发光。据此建立通过HPLC分离、用化学发光检测器测定吲哚美辛的方法。在优化的实验条件下,测定吲哚美辛的线性范围为22.95~61.20μg/mL,检出限(3σ)为6.12μg/mL,相对标准偏差为2.7%(n=11)。方法可用于生物药品复方吲哚美辛酊及人体尿液中吲哚美辛的含量。     

高效液相色谱-串联质谱法检测动物尿液中的15种β-受体激动剂

建立了高效液相色谱-串联质谱检测动物尿液中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗、马布特罗、妥布特罗、班布特罗、马贲特罗、塞布特罗、齐帕特罗、福莫特罗、氯丙那林、特布他林、喷布特罗和溴布特罗等15种β-受体激动剂的分析方法。样品用高氯酸溶液酸解及沉淀蛋白质,经HLB固相萃取小柱净化、富集后,以甲醇和0.1%(体积分数,下同)甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测(MRM)模式进行定性和定量分析。15种β-受体激动剂在0.25～20 μg/L的范围内线性关系良好(r≥0.9995)。在0.25、1.0、10 μg/L添加水平下的回收率为62.1%～107%,相对标准偏差(n=10)为3.5%～9.9%,定量限(以信噪比＞10计)为0.25 μg/L。该方法精密度好,灵敏度高,能简便、快速、准确地测定动物尿液中的15种β-受体激动剂。     

中空纤维膜液相微萃取-高效液相色谱联用技术测定尿液中痕量己烯雌酚

采用中空纤维液相微萃取与高效液相色谱联用技术测定了尿液样品中的痕量己烯雌酚;考察了样品相酸度、中间相种类、接收相浓度、搅拌速度、萃取时间等对液-液-液三相微萃取效率的影响,进而确定了最佳萃取条件.结果表明,当样品相pH为2.5,中间相为甲苯,接收相为3μL 0.25mol/L氢氧化钠溶液,搅拌速度为800r/min,萃取时间为50min时,萃取效率最佳.在最佳萃取条件下,样品的回收率为76.4%,相对标准偏差为3.8%.     

高效液相色谱法测定黑色素瘤小鼠尿液中达卡巴嗪

达卡巴嗪是治疗恶性黑色素瘤的一线化疗药物。它在体内主要经肝脏代谢,同时部分药物仍以原药形式经尿液排出。这就意味着可以通过监测尿液中达卡巴嗪的含量评估其在人体内的利用率和转化率,进而对其治疗效果进行评价。针对达卡巴嗪,人们发展了多种分析方法,但多基于高效液相色谱-质谱平台。然而达卡巴嗪为强极性弱碱性化合物,采用常规反相色谱法分析时会出现出峰时间过早、峰形拖尾的现象,导致定量不准确。基于此,该文建立了一种测定尿液中达卡巴嗪含量的高效液相色谱方法以克服上述问题。小鼠尿液经丙酮沉淀法去除蛋白后,采用Shimadzu-GL ODS柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）分离,色谱条件如下：流动相为甲醇/乙腈（1：1,v/v）-0.01 mol/L磷酸二氢钠溶液（pH=6.5）（20：80,v/v）,流速1 mL/min,检测波长280 nm,柱温35℃,洗脱时间15 min。在该色谱条件下,达卡巴嗪保留时间为5.3 min且峰形良好。其在0.25~1000 μg/mL范围内线性关系良好（r ² =0.999）。基于信噪比（S /N ）=3和S /N =10,计算出检出限和定量限分别为0.12 μg/mL和0.25 μg/mL。在低、中、高（50.0、375、500 μg/mL）3个添加水平下,加标回收率分别为98.9%、102%、99.1%,相对标准偏差（RSD）分别为3.2%、1.3%、1.2%（n =5）。日内与日间RSD分别小于3.8%和4.4%。将该法应用于不同发展阶段的黑色素瘤C57BL/6小鼠尿液中达卡巴嗪的监测,结果表明该方法操作简便,结果可靠,便于推广。