高效液相色谱法测定人血浆及尿液中头孢呋辛和舒巴坦

建立反相HPLC-UV法同时测定人血浆及尿中头孢呋辛(CXM)和舒巴坦(SUL)的方法.采用Welch Materials XB-C18分析柱(150 mm×4.6 mm,5 μm ) ,流动相为乙腈-0.01 mol/L KH2PO4 (血浆测定15∶ 85(V/V),尿样测定10∶ 90(V/V),含0.04%三乙胺,以H3PO4调节至pH 3.2),流速1.0 mL/min,紫外检测波长SUL为220 nm、CXM及内标咖啡酸为274 nm.血浆样品在酸性条件下用乙醚提取浓集后进样,以内标法进行定量分析.尿样稀释后直接进样,以外标法进行定量分析.血浆测定中SUL和CXM浓度分别在0.25～200 mg/L和0.5～400 mg/L范围内线性良好; 萃取回收率分别为75.6%～88.1%和68.6%～77.4%; 批内与批间RSD均小于9%,方法回收率分别为94.6%～113.6%和91.9%～101.8%.尿样中SUL和CXM浓度分别在5～5120 mg/L和10～10240 mg/L范围内线性良好; 批内与批间RSD均小于3%; 方法回收率分别为92.9%～111.1%和98.0%～105.3%.本方法快速简便, 灵敏准确,可用于同时测定血浆及尿中SUL和CXM浓度,亦可用于药代动力学、生物利用度研究.     

液相色谱-电喷雾串联质谱同时检测尿液和胃液中12种有毒生物碱

建立了高效液相色谱-电喷雾串联质谱同时检测尿液和胃液中12种有毒生物碱的方法.优化了提取条件及色谱-质谱条件,并考察了基质效应的影响,探讨了质谱碎裂机理.尿液和预先调节至中性的胃液经硼砂-NaOH缓冲液(pH 9.6)碱化,乙酸乙酯液液萃取,采用电喷雾电离(ESI+)、多反应监测(MRM)方式,可同时对黄华碱、倒千里光碱、山莨菪碱、钩吻碱、芦竹碱、哈尔碱、吐根碱、血根碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、雷公藤吉碱和雷公藤次碱12种有毒生物碱进行定性和定量分析.在优化的条件下,12种成分分别在0.5～200 μg/L、1～200 μg/L和5～200μg/L范围内线性关系良好,尿液中除黄华碱和山莨菪碱外,各生物碱的回收率为61.9％～119.1％,胃液中各生物碱回收率为61,0％～1102％,精密度RSD＜ 15％.检出限(LOD)为0.1～0 Sμμg/L,定量限(LOQ)为0.5～5.0 μg/L,时回收率不高的生物碱可通过空白基质配制标样校正,满足定量分析的要求.本方法操作简便、快捷、灵敏度高,适用于中毒患者尿液和胃液中有毒生物碱成分的检测.     

弱阴离子超高交联树脂固相萃取-高效液相色谱-紫外法测定人尿中高香草酸的含量

建立了人体尿液中高香草酸含量的固相萃取-高效液相色谱-紫外测定方法.合成了弱阴离子超高交联树脂固相萃取填料,并对其进行吸附性能考察.利用此萃取剂对尿液中的高香草酸进行选择性吸附,洗脱液富集后以甲醇-乙酸(15∶85,V/V)溶液为流动相,C18为固定相,于280 nm测定其中的高香草酸.方法验证结果表明,高香草酸在2.26～145 mg/L浓度范围内呈良好的线性关系;检出限为0.45 mg/L;方法的平均加标回收率大于90％;RSD小于4.2％.采用本方法对8名健康人尿样中的高香草酸含量进行了测定,结果为1.55～6.79 mg/L.表明本方法选择性好、灵敏度高、准确可靠.     

深圳地区正常儿童尿液微量元素的测定

以电位溶出法检测了４３７例３个月～１２岁正常儿童的尿液锌、铜、铅、镉含量，结果显示：（１）在所有儿童尿中均未检出铜和镉，铅在部分尿中可检出，但含量低微，而尿锌的含量相对较高，且正常波动范围较大，相差几倍～十几倍，（２）尿液锌、铅含量在正常男女儿童间无明显性别差异（Ｐ＜０．０５）；（３）尿液锌、铅含量在３～１２个月、１岁～、３岁～组间无显著差异，但它们均高于７～１２岁组（Ｐ＜０．００１～０．０５）．     

人体尿液中青霉素G代谢物的确认

建立了利用电场轨道阱回旋共振组合质谱仪(LTQ-Orbitrap)检测人体尿样中青霉素G及其代谢产物的分析方法。目标化合物分离鉴定选用PLRP-S聚合色谱柱,以含0.1%(体积比)甲酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱分离后,选用Data-dependent MSn模式进行全扫描分析。尿样中首次检出青霉素甲酰化代谢产物(m/z 381)。青霉素新代谢物的发现对食品安全及法医毒物分析具有重要意义。     

动物尿液中15种甾类同化激素的液相色谱-串联质谱同时测定

采用液相色谱-电喷雾串联质谱仪（LC-ESIMS/MS）,在多反应监测（MRM）模式下建立了动物尿液中15种甾类同化激素（睾酮、孕酮、诺龙、甲基睾酮、丙酸睾酮、丙酸诺龙、苯丙酸诺龙、大力补、勃地龙、群勃龙、康力龙、醋酸群勃龙、甲炔诺酮、甲羟孕酮、醋酸甲羟孕酮）的快速确证测定方法。试样经酶解处理后,过C18固相萃取柱净化,氮吹至干,残余物用0.50 mL乙腈-水（体积比1∶1）溶解后测定。采用正离子扫描方式进行仪器方法学研究,确定监测离子对,进行MRM模式定性定量分析。该方法的检出限（LOD）为0.2～0.5μg/L,定量下限（LOQ）为0.5～1.0μg/L;在2.0～200.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998。在1.0、5.0μg/L的添加水平上,上述15种激素的平均回收率为59%～118%,相对标准偏差为1.0%～11.2%。该法操作简单,灵敏度高,可用于动物尿液中15种甾类同化激素的测定。     

高效液相色谱-荧光光度检测尿液中溴鼠灵

提出了高效液相色等荧光光度检测尿液中溴鼠录。尿液经磷酸酸化至pH2．0并在LC-18固相萃取小柱上富集、净化,分取10．0μL试样溶液进行高效液相色谱测定。用XDB C18柱（150mm×2．1mm,5μm）为固定相,以甲醇及稀乙酸溶液（2＋998）以88比12的比例混合后作为流动相,在激发波长为270nm,发射波长为376nm的条件下进行荧光光度检测。结果表明：溴鼠灵在0．05～10．0mg·L^-1范围内呈线性关系,方法的回收率在79．8％～97．0％之间,相对标准偏差在4．0％～4．9％之间,测定限为0．07mg·L^-1。     

应用移动反应界面富集技术进行毛细管电泳尿液指纹分析

快速灵敏的尿液指纹图谱分析对于临床诊断中发现新的生物标记至关重要。该文建立了一种简便、快速、灵敏的移动反应界面(MRB)介导的富集技术进行毛细管电泳尿液指纹图谱分析。MRB由25 mmol/L甘氨酸（Gly）-HCl（pH 2.5）作为样品缓冲液和50 mmol/L Gly-NaOH（pH 12.3）作为电泳缓冲液形成。与常规的毛细管区带电泳只能观察到尿液中不到10个峰相比,采用MRB可以观察到超过80个峰并将检测灵敏度提高了至少十几倍,显示该方法对于代谢组学分析具有重要的意义。     

UPLC-DAD测定大鼠尿液中的黄蝶呤、异黄蝶呤、酪氨酸和色氨酸

建立了大鼠尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤、酪氨酸和色氨酸的超高效液相色谱-二极管阵列检测器检测(UPLC-DAD)分析方法,选择肌酐作为内标物来减少个体差异的影响。大鼠尿液利用甲醇除蛋白后,采取C18固相萃取小柱进行净化,然后用UPLC-DAD法进行测定,5种物质的仪器检出限分别为0.011,0.007,0.030,0.025和0.003 mg/L,加标回收率除黄蝶呤在60.8%～80.7%之间,其余各物质回收率均在96.3%～106.3%之间,RSD小于9.9%。     

高效液相色谱-紫外检测法测定人体尿液中的蝶呤-6-羧酸

建立了人体尿液中蝶呤-6-羧酸的高效液相色谱-紫外分析新方法. 运用Lichrospher C18柱(250×4.6 mm,5 μm),甲醇-水(70∶30,V/V)为流动相,流速为0.4 mL/min,可较好地将尿液中蝶呤-6-羧酸与其它共存干扰物质分离.在355 nm检测波长下,蝶呤-6-羧酸在0.19～4.8 μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好线性关系,相关系数为0.9999,方法检出限为0.015 μg/mL.尿液经0.45 μm滤膜过滤后,可直接进样分析,方法简便,应用于癌症病人和健康人尿样中蝶呤-6-羧酸测定,结果较好.方法的加标回收率为94.6%～100.2%,相对标准偏差为0.81%～ 5.07% .