细胞色素P-450酶模型的研究:过氧化物的化学反应机理

含有铁卟啉化合物活性中心的细胞色素P-450和其它过氧化物酶具有重要的生物化学功能. 本文讨论了铁卟啉模型物模拟这些酶功能的反应机理. 通过与已知的过氧化物中氧氧键均裂机理的比较, 以及对大部分溶液反应的研究, 表明在过氧化物(包括过氧酸)与铁卟啉生成活性中间体( Fe=O^+.)的过程中, 氧氧键的异裂机理占主导地位. 过氧化物如同其它氧化剂受物(如烯烃)一样, 能快速地直接与 FeO^+反应. 以铁卟啉为催化剂的过氧化物反应体系为我们提供了研究模拟催化酶的人工模型体系.     

含氧有机溶剂对用桑色素荧光法测定钪的荧光性质的影响

用桑色素-氨替比林萃取荧光法,2-苯并喹啉-4-羧酸荧光法测定微量钪的方法已有报道,但这些方法的选择性较差。作者发现加入某些含氧有机溶剂对测定体系的荧光性质有明显影响,较大幅度地提高了反应的灵敏度和选择性。据此,作者建立了在稀土元素共存时,直接测定钪的新方法。本文还测定了桑色素-钪配合物的组成,荧光效率φ,表观稳定常数K,溶剂化数及溶剂化常数K_s,并对有机溶剂的作用进行了初步探讨。     

细胞色素P—450模拟酶的快速混合停流时间分辨吸收谱研究：Ⅱ.Mn^Ⅲ（P …

采用快速混合停流技术,考察了在实际反应条件下,不同锰卟啉配合物Ｍｎ＾Ⅲ）Ｐ;ｏｒ。）Ｃｌ（Ｐｏｒ。＝ＴＰＰ,ＴＭＯＰＰ和ＴＦＰＰ）与单氧给体ＰｈＩＯ构建的细胞色素Ｐ－４５０模拟酶体系催化活性物种的生成及催化烯烃环氧化过程。     

紫薯中花青素的超声波提取工艺

花青素是允许使用的一类天然红色素、是以黄酮核为基础的糖甙,紫薯中的花青素具有较强耐热性和耐光性,稳定性好,抗突变性较强、抗氧化能力和活性氧消除能力很强,对动物的肝功能障碍具有缓解作用。从紫薯中提取花青素色素解决了以往工业生产葡萄、草莓原料生产季节性强、造价高等不足。目前,主要是以酸化乙醇在静置条件下加热浸提紫薯中的花青素,温度较高,时间较长。本文对超声波提取与冻结。融解法相结合,得出最佳的提取条件。     

桑色素/石墨烯修饰电极的制备及对多巴胺的选择性灵敏测定

在石墨烯纳米片修饰电极(GN/GCE)上,通过电聚合的方法制备了新颖的桑色素/石墨烯复合修饰电极(M/GN/GCE).以多巴胺(DA)和抗坏血酸(AA)为模型化合物,运用循环伏安法(CV)和差示脉冲伏安法(DPV)考察了该复合修饰电极的电催化行为.在pH 7.0的PBS中,DA和AA分别在0.172 V和-0.183 V产生氧化峰,峰位差达355 mV.与单一修饰电极(桑色素修饰电极(M/GCE)、石墨烯修饰电极(GN/GCE)及裸玻碳电极(GCE))相比,DA在M/GN/GCE上的峰电流显著增大.在优化的实验条件下,DA在2.0×l0-8～5.5×10-4 mol/L浓度范围内与其峰电流具有良好的线性关系,检出限达9.0×10-9 mol/L.     

天然同位素丰度野生型酵母细胞色素c构象变化的核磁共振检测

细胞色素c是一个重要的多功能蛋白,它在呼吸链及细胞凋亡中均发挥着重要作用.细胞色素c的构象变化与其功能密切相关,表征细胞色素c的构象变化对于明确其相关功能的分子机制至关重要.核磁共振（NMR）是近原位环境下表征蛋白构象的重要工具,但通常需要使用¹³C、¹⁵N等同位素.由于野生型细胞色素c存在翻译后修饰,故其同位素标记十分困难.本文尝试使用¹H-¹³C HSQC技术来表征提纯后的天然同位素丰度的野生型细胞色素c的构象变化.结果显示该方法能在2 h内检测到大多数甲基的信号,且化学位移变化明显的甲基与其构象变化一致.这表明该方法有助于研究天然丰度或翻译后修饰蛋白的构象变化.     

基于BP神经网络的日落黄溶液荧光光谱的研究

对食用合成色素日落黄的荧光光谱进行了研究,发现在310~400nm紫外光的激励下,日落黄溶液发出强荧光,峰值荧光强度随浓度的增加先增强后减弱,且荧光谱峰位置出现明显红移。经分析认为,日落黄溶液能产生荧光是因为分子中偶氮键将一个苯环和一个萘环连接在一起,形成大共轭结构,并且取代基-SO3Na与-OH处于萘环的对位,大大增强了日落黄分子的共轭程度,使其具有强的吸光功能,发出强荧光。另外,结合BP神经网络,通过训练好的网络对4种不同浓度的样本进行浓度预测,结果表明相对误差分别为4.269%,6.078%,4.977%和5.308%,相对标准偏差分别为0.448%,0.375%,0.419%和0.414%。实验表明,该方法具有训练速度快、预测结果准确度高等特点,有望成为一种对食用合成色素进行高效、痕量检测的有效方法。     

Direct MALDI-MS Analysis of Proteins Isolated by Liquidphase Isoelectric Focusing Electrophoresis

A liquid-phase isoelectric focusing electrophoresis system(Rotofor) was used as the prefractionation tool for the sample preparation in the MALDI-MS analysis of a protein mixture. Each fraction collected was then directly subjected to MALDI-TOF-MS analysis. By this approach, we are able to resolve two types of hemoglobins, A and C, which cannot be successfully separated by means of the traditional SDS-PAGE method.     

桑色素在L-半胱氨酸自组装膜修饰金电极上的电化学行为研究

在0.1mol/L(pH=4.7)的HAc NaAc缓冲溶液中,用L 半胱氨酸自组装膜修饰金电极对桑色素的电化学行为进行了初步的研究,考察了修饰时间、富集时间、富集电位、扫描速度、表面活性剂、金属离子等因素对其电化学行为的影响。研究发现,桑色素在0.44V(vs.SCE)左右产生一不可逆的氧化峰。该氧化峰电流与桑色素浓度在5×10-6～2×10-4mol/L范围内呈线性关系(相关系数r=0.9989),检出限为2×10-6mol/L,这比用裸金电极测试降低一个数量级。同时发现,十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)对氧化峰电流有一定的增敏作用。该峰且随Pb2+浓度增大而线性增高,因此可用于Pb2+的测定。     

光谱法研究细胞色素c氧化酶CuA结构域蛋白的稳定性

利用荧光光谱和圆二色谱研究了细胞色素c氧化酶CuA结构域蛋白的稳定性.结果表明,随着溶液pH值的升高,CuA结构域蛋白的稳定性降低.随着温度的升高,CuA结构域蛋白的二级结构遭到破坏.脱金属形式蛋白的热稳定性减小,表明双核金属铜中心的存在对CuA结构域蛋白的稳定性起重要作用.