聚丙烯酰胺固定化糖化酶特性的研究

本研究以丙烯酰胺单体通过反向悬浮聚合技术合成聚丙烯酰胺作为载体材料，采用包埋—交联法固定化葡萄糖淀粉酶，并对其特性进行了研究．结果表明，该固定化酶最适pH值为5．0，最适温度为55～58℃，而且具有较好的贮存稳定性和操作稳定性，8个月后该固定化酶的残余活力仍保持在94％左右，可重复使用43批次，此固定化酶酶活回收率达到56％．实验表明丙烯酰胺悬浮聚合固定化糖化酶的方法是简便可行的．     

青霉素酰化酶在甲基丙烯酸缩水甘油酯共聚物上的固定化

 用共价键合法将青霉素酰化酶固定化在珠状多孔的甲基丙烯酸缩水甘油酯（GM）共聚物上，研究了固定化反应时间、温度、pH值和酶液用量对固定化青霉素酰化酶的表观活性、表观偶联效率、活性回收及稳定性的影响．将GM共聚物载体加入到磷酸缓冲液（0．1mol／L，pH10．8）与青霉素酰化酶液（每克干载体用酶液1ml）的混合溶液中，在30℃下反应72h，单位质量（干重）固定化酶的表观活性为348U／g，表观偶联效率为66．7％，活性回收为31．7％．     

部分水解聚（丙烯酸甲酯—醋酸乙烯酯—甲基丙烯酸甲酯）多孔载…

该文以二乙烯苯和双丙烯酸多缩乙二醇酯为交联剂，制备了部分不解聚多孔载体。用电镜，压汞仪，红外，Ｘ射线衍射仪等测定了载体的结构与孔结构。     

微胶囊固定化过氧化氢酶

以乙基纤维素为膜材，用液中干燥法将过氧化氢酶微胶囊化，研究了温度和ｐＨ值对酶活性的影响及过氧化氢和尿素对固定化酶的抑制作用，由于乙基纤维素膜的保护，明胶对ｐＨ值的缓冲作用及明胶与尿素的反应，明显地扩大了酶对温度和ｐＨ值的适应性，降低了酶活性抑制剂的影响。     

交联法固定化米曲霉及拆分反应性能的研究

本文采用戊二醛－明胶－乙二胺交联固定米曲霉，应用正交设计方法优选出相应的固定化条件，制备出拆分ＤＬ－氨基酸反应活性较高的酶催化剂，并对ｐＨ，温度，离子浓度，底物浓度等因素对固定化菌体的反应活性的影响进行了实验研究，用固定化菌体柱对Ｎ－乙酰－ＤＬ－丙氨酸进行连续拆分，结果表明催化剂具有主好的工业应用前景。     

亲水性交联聚合物载体的合成表征及其固定化α-淀粉酶

选用丙烯酰胺(AM)、N-羟基琥珀酰亚胺为单体(NHS),以N,N/-亚甲基双丙烯酰胺(MBAA)为交联剂,以乙醇水溶液为制孔剂条件下进行反相悬浮聚合,得到珠状共聚物载体,该载体是一种新的酶载体形式,在国内外的相关文献中均未见报道.用红外光谱、扫描电子显微镜测定其结构和表观活性.结果表明,在固定单体配比[W(AM)/W(NHS)=10∶1]和致孔剂用量的情况下,测得交联剂用量为4%时,交联聚合物载体的溶胀性最好(287.5%);交联剂用量为5%时,交联聚合物载体固定化α-淀粉酶表现出高的表观活性(522.53U/g).测得固定化酶载体表现出良好的操作稳定性.比较固定化酶和游离态酶的最适反应温度发现,固定化酶的最适反应温度(70℃)比游离态酶高20℃;固定化酶的最适反应pH值范围较游离态酶广.     

CS-MCM-48复合载体固定化脂肪酶催化苯乙酮-锅法还原转酯化拆分反应

将天然聚合物壳聚糖(CS)涂覆在介孔分子筛MCM-48表面制得CS-MCM-48复合载体,控制CS与介孔分子筛MCM-48质量比为1∶10时,CS-MCM-48的比表面积、平均孔径和孔容分别为408 m2/g、2.14 nm和0.38 cm3/g.在磷酸盐缓冲溶液-异辛烷混合溶剂中制备了固定化假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas CepaciaLipase,PSL)PSL/CS-MCM-48,并用于潜手性苯乙酮一锅法还原转酯化手性拆分反应.结果表明,PSL/CS-MCM-48的催化活性和对映选择性均明显优于纯介孔分子筛MCM-48和壳聚糖制备的固定化酶PSL/MCM-48和PSL/CS.甲苯作溶剂,反应温度为40℃时,底物1-苯乙醇转化率达15.3%,产物(R)-乙酸苯乙酯和(S)-1-苯乙醇的对映体过量值分别为99%和18.0%,对映选择性参数E值达237,固定化酶PSL/CS-MCM-48显示出良好的手性拆分性能.     

固定化过氧化物酶在过氧化物测定中的应用

采用聚丙烯酰胺凝胶迭氮法固定了辣根过氧化物酶，其作为催化剂用于荧光法测定过氧化物，并探讨了固定酶测定过氧化物的最佳条件，如溶液pH值、温度、反应时间、荧光剂用量等。结果表明：酶固定化后，反应pH值范围变宽，为pH5.0-7.0和7.5-9.0，最佳pH为7.8左右；酶的热稳定性与储存稳定性也都得到提高，在室温下便可用固定酶进行长时间测定，且可较长时间保存。采用固定酶制成的酶柱用于HPLC测定过氧化物，固定酶可反复使用，简化了测定操作，并降低了成本。     

固定化酶不对称合成（S）＋—（＋）—布洛芬的研究

能够不对称水解布洛芬乙酯的酵母菌Ｔ１５８固定化在壳聚糖珠中，固定化酵母菌的活力回收达６０％，最适温度为４５℃，半衰期为７５ｄ以上。