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41.
应用噬菌体展示和重组抗体技术制备抗氧氟沙星单链抗体(scFv)库,筛选获得氧氟沙星特异性噬菌体scFv以及同源模拟其三维结构。将从氧氟沙星杂交瘤细胞提取的总RNA,用RT-PCR反转录合成cDNA,以针对鼠源重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因的兼并引物,扩增获得VH和VL可变区基因,通过SOE-PCR法将VH基因和VL基因通过柔性多肽Linker(Gly4Ser)3拼接成全长scFv基因片段,将双酶切后的scFv基因片段插入T7噬菌体,经体外包装后转化宿主菌BLT5403,成功构建库容量为3×105pfu/mL的抗体库,经4轮吸附-洗脱-扩增的富集,采用直接竞争ELISA筛选到4个特异性噬菌体scFv,运用Expasy软件模拟特异性scFv的三维结构。为进一步大量表达氧氟沙星单链抗体奠定了基础。 相似文献
42.
有机磷水解酶的大肠杆菌细胞表面展示与酶活特性 总被引:5,自引:0,他引:5
利用丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)KCTC1832菌株的冰核蛋白(InaK)的N-末端作为锚定单元和来自黄杆菌(Flavobacterium sp.)ATCC27551菌株opd基因编码的有机磷水解酶作为功能蛋白,构建了一株具有全细胞催化效应的大肠杆菌(Escherichia coli)表面展示工程菌MMBL-405.对该工程菌全细胞有机磷水解酶活性的正交试验结果表明,在诱导物IPTG浓度为 0.1 mmol/L、诱导温度为20℃、诱导时间为8 h和Co2 添加浓度为100 μmol/L的优化培养条件下,其全细胞酶活性可达到0.62 U/mg细胞干重,是目前国外同类工作所报道酶活性的13.7倍以上.对工程菌所携带的外源质粒在无抗性条件下的稳定性进行了测定,结果表明工程菌经连续转接7次和继代培养168 h后,质粒携载率仍达到60%. 相似文献
43.
44.
LI Min-Si LIU Yan-Na 《理论物理通讯》2008,50(8):517-520
We show that there is a quantum Slq(2) group symmetry in Hofstadter problem on square lattice. The cyclic representation of the quantum group is discussed and its application for computing the degeneracy density of the model is shown. 相似文献
45.
In living organisms, protein functions are constantly evolving over generations throughout the history. Through iterative rounds of genetic mutations and natural selection of fit phenotypes, protein functions have been gradually optimized. This process could be mimicked and even greatly accelerated in the laboratory, when the selection pressure is directly applied to biomolecules of interest, which forms the basis of a technique called directed evolution. The Nobel Prize in chemistry 2018 was awarded jointly to Frances Arnold, George Smith and Gregory P. Winter for their pioneering contributions to the development and applications of directed evolution. Here we briefly review the history of this technique and its impact on renewable energy and pharmaceutical industry. 相似文献
46.
改变教学方式,让学生在不同的学习情境中去体验物理过程,从而获得成功的快感,这一直是笔者在教学设计中追求的目标.学习完"声学"后,复习时,笔者采用了别具特色的复习方式,让学生在玩中 相似文献
47.
48.
49.
任务型阅读源于英语阅读教学,将其运用于初三化学教学,收到了良好的效果.通过具体案例阐述了"阅读前、阅读中、阅读后"的任务设计,探讨阅读任务设计的出发点、方法、步骤及注意事项. 相似文献
50.
以多克隆抗体包被磁性微球制备捕获探针,以表面负载大量三联吡啶钌标记物的噬菌体展示抗体为发光探针有效放大信号,成功建立了相思子毒素电化学发光免疫传感检测方法。利用本方法检测相思子毒素,浓度在0.005~100μg/L范围内与电化学发光强度呈良好的对数线性关系,拟合方程为lgY=0.701lgX+1.767(R=0.9964,N=7,p<0.0001),检测限达0.005μg/L(S/N=3)。与采用单克隆抗体制备标记探针相比,检测灵敏度提高20倍,可用于相思子毒素的痕量检测。 相似文献