植物内源激素的反相高效液相色谱法测定

报道了以6－N－苄基腺嘌呤（BA）为内标的反相高效液相色谱法测定玉米素（ZT）、赤霉素（GA3）、激动素（KT）、3－吲哚乙酸（IAA）和脱落酸（ABA）等5种植物内源激素的条件;采用μBondapakC18柱、乙腈－甲醇－0．6％（φ）乙酸流动相、检测波长254nm,建立了一种从植物中提取5种激素的样品处理方法,并测定了马铃薯块茎中的5种植物内源激素的含量。     

超声提取-高效液相色谱法测定热敏纸中双酚A的含量北大核心CSCD

近年来北京产业结构调整,新产业、新科技不断出现,存在职业病危害的行业由生产制造业向科技行业、现代服务业领域蔓延,在逐步控制传统职业病趋势下,应重视、预防和控制“新型职业病”所带来的危害[1]。热敏纸中的双酚A是城市发展中不可忽略的一项“新型职业病”危害,暴露途径有很多种,比如职业性暴露、膳食暴露、医源性暴露、环境暴露等。双酚A是一种内分泌干扰物,经皮肤进入人体,长期接触会严重扰乱人体激素分泌,甚至致癌、致畸、致突变[2-3]。     

液相色谱-串联质谱结合谱库检索法同时测定猪组织中12种类固醇激素

建立了猪组织中12种类固醇类激素(炔诺酮、雄诺龙、醛固酮、去氢睾酮、达那唑、去氢甲睾酮、甲基睾丸酮、诺龙、孕酮、康力龙、睾酮和丙酸睾酮)多残留的液相色谱-四极杆/线性离子阱串联质谱(QTrap LC-MS/MS)的检测方法。组织样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解提取,混合型强阳离子交换固相萃取小柱(MCX柱)净化后,以含0.1%(体积分数)甲酸的乙腈和水为流动相,经Venusil MP C18色谱柱(100 mm×2.1 mm, 3 μm)分离,按照多级反应监测(MRM)、信息相关采集(IDA)、增强子离子扫描(EPI),结合建立的12种类固醇类激素的标准谱图库检索的多步模式进行分析。结果表明,12种类固醇激素的线性范围为0.5～100.0 μg/L,线性相关性良好(r＞0.99);样品在5.0 μg/kg添加水平下的平均回收率为72.0%～98.1%,相对标准偏差为3.1%～12.5%;方法检出限(S/N=3)为0.2～0.5 μg/kg。实际样品检测结果表明,应用本方法可以实现对猪组织样本中类固醇类激素残留的定性定量分析,且具有灵敏、准确的特点。     

低组胺释放副作用的GnRH拮抗剂的设计合成及活性评价

根据肽类组胺释放剂具有多个碱性氨基酸的结构特点, 将具有羧基结构的基团引入促性腺激素释放激素(GnRH)的不同位置, 合成了一系列新的GnRH类似物, 并进行了大鼠体内抑制睾酮释放的生物活性评价及大鼠腹腔肥大细胞中的促组胺释放副作用评价. 结果表明, 某些带有酸性基团的GnRH类似物不仅组胺释放副作用大大降低, 而且保留了原有的生物活性. 该结果为研发具有低组胺释放副作用的安全型GnRH拮抗剂药物提供了新的构效关系信息.     

龙牙百合贮藏期间内源激素的变化

以龙牙百合的试管鳞茎及商品鳞茎为材料,研究了5℃低温与25℃常温贮藏对鳞茎内外层鳞叶的内源激素（ABA、GA3和IAA）含量的动态变化影响,实验结果如下:在5℃低温贮藏过程中,GA3含量最高,IAA次之,ABA较低,且GA3与IAA含量呈明显上升趋势,而ABA含量总体呈下降趋势;在25℃常温贮藏过程中,ABA、GA3和IAA的含量与5℃低温贮藏的变化基本一致,只是变化的幅度较小。同一鳞茎内层鳞叶和外层鳞叶的同种激素含量基本处在同一水平,变化幅度基本一致。试管鳞茎ABA的含量要比商品鳞茎的要高,而GA3和IAA的含量则比商品鳞茎的要低。贮藏过程中内源激素GA3/ABA、IAA/ABA的比值总体呈上升趋势,贮藏后期GA3/ABA比值急剧上升。同时,探讨了内源激素的变化和平衡与休眠解除的关系,认为休眠的解除可能为GA3类促进物质和ABA类抑制物质相互作用的促进抑制平衡所致。     

黄瓜去顶苗花分化临界期的确定及内源激素的动态变化

通过在诱花和诱芽培养基之间转换培养,发现黄瓜去顶苗花分化临界期是培养后的第5至6天(即去顶后的3至4天).对花芽分化初期子叶节中内源激素质量分数的测定表明,IAA质量分数在花芽分化初期处于较低水平,ZT质量分数呈下降趋势,GA3质量分数则出现升-降-升的波动状态.ZT/IAA、GA3/IAA比值的变化趋势相似,0至2天上升,2至3天下降,3至4天再上升.根据实验结果,联系黄瓜去顶苗成花的形态变化过程,对激素质量分数变化与花芽分化之间的关系进行了讨论.     

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定燕窝中45种激素及其水平调查

建立了固相萃取-高效液相色谱-串联质谱(SPE-HPLC-MS/MS)同时测定食用燕窝中皮质激素、雌激素、雄激素及孕激素等5类45种激素的多残留分析方法。采用乙腈-乙酸乙酯(1∶1, v/v)超声辅助提取、亲水亲脂平衡固相萃取柱净化,甲醇洗脱。分别在正、负电喷雾电离源、多反应监测模式下检测45种激素。正离子模式下的流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,负离子模式下的流动相为乙腈-水,色谱柱为Phenomenex Kinetex C₁₈柱(100 mm×2.1 mm, 2.6 μm)。在优化条件下,45种激素在0.20~20.0 μg/L范围内线性关系良好,相关系数(R²)≥0.9990,方法的检出限(LOD)为0.04~0.70 μg/kg,定量限(LOQ)为0.16~2.00 μg/kg。按三水平(2.0、4.0、20.0 μg/kg)进行加标回收试验,氟米龙、布地奈德、醛固酮、醋酸氟轻松、炔雌醇的回收率为40.2%~63.6%,可对这5种激素进行定性分析,其余40种激素的平均加标回收率为72.2%~112.3%,相对标准偏差(RSD)为2.5%~11.6%,该方法可对40种激素进行准确定性定量,精密度好,灵敏度高,简便、快速。从2017~2021年,通过研究建立的方法对来自马来西亚、印度尼西亚、泰国和越南等国家的1021个燕窝样品进行监测,仅勃地酮、雄烯二酮、孕酮有检出(大于检出限),其他激素均小于检出限。孕酮检出率为100%,勃地酮、雄烯二酮检出率分别为79%和89%, 3种激素含量范围分别为0.097~3.58、0~0.096和0~1.77 μg/kg。与同为动物源性食品的鸡蛋、纯牛奶、乳制品相比,所有测定的鸡蛋样品中均检出雄烯二酮,含量比其他3类产品略高;勃地酮在4类产品中的含量差别不大,均为微量;孕酮含量在鸡蛋中最高,其次是纯牛奶,燕窝中含量最低。研究结果表明,食用燕窝带入的激素种类少,含量低,对健康影响小。     

智能响应材料在磷酸化肽和糖肽富集中的应用

蛋白质的磷酸化和糖基化作为研究最广泛的两种翻译后修饰(PTMs),在疾病的早期无创诊断、预后和治疗评估中表现出越来越大的潜力。蛋白质的异常磷酸化和糖基化经常被用于临床蛋白质组学研究和疾病相关生物标志物的发现。目前已有多种材料被开发用于磷酸化肽和糖肽的富集研究,其中,智能响应材料由于具有独特的响应特性,已被陆续报道用于磷酸化肽和糖肽的富集。智能响应材料可对外界刺激做出响应,发生结构和性质上的变化,将光、电、热、机械等信号转化为生物化学信号。响应分子是决定智能响应材料响应特性的先决条件,它们在不同刺激条件下(如温度、pH、光、机械应力、电磁场等)的可逆异构化将导致材料的宏观物理和化学性质的动态变化。与传统材料相比,智能响应材料可以可逆地“打开”和“关闭”,具有更好的可调控性。由于引起智能材料响应的刺激信号对其性能具有重要的影响,综述根据施加的刺激种类对智能响应材料进行分类,具体分为外源性响应材料和内源性响应材料,且分别总结了外源性响应材料、内源性响应材料以及内外源共同响应材料在磷酸化肽和糖肽富集方面的工作。此外,综述对智能响应材料在磷酸化肽和糖肽富集方面的发展前景进行了展望,并且提出了智能响应材料在其他蛋白质翻译后修饰方面的应用中存在的挑战。     

头发中甲状腺激素和类固醇激素的高效液相色谱串联质谱检测

基于高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）,开发了一种灵敏、可靠的方法,用于同时测定人类头发中的甲状腺和类固醇激素,包括甲状腺素（T4）、3,3′,5-三碘甲状腺原氨酸（T3）、3,3′,5′-三碘甲状腺原氨酸（rT3）、3,3′-二碘甲状腺原氨酸（3,3′-T2）、L-甲状腺原氨酸（T0）、皮质醇（F）和可的松（E）。头发用量20 mg,使用甲醇/氨水（体积比95∶5）在40℃下孵育24 h。采用电喷雾离子源,在多反应监测模式和正离子模式下进行定量分析。在甲醇/纯水（体积比80∶20,含0.2 mmol/L乙酸铵）的等度洗脱条件下,7种待测物分离良好。该方法检测上述7种激素的检测限在0.3～1.9 pg/mg,定量限在1.1～6.5 pg/mg;日内、日间变异系数均小于10%,回收率在89.4%～109.1%之间;稳定性、残留效应均符合检测标准要求。运用该方法检测140名被试的头发样本,所有被试的T0、F和E均可定量检测,而T4、T3、rT3和3,3′-T2的含量非常低,均在定量限附近,仅在少量被试中可被检出。