固定金属离子亲和色谱--蛋白质分离的方法、原理、特性和应用

介绍了固定金属离子亲和色谱法(IMAC)的方法原理、金属螯合柱的制备、固定金属离子与蛋白质的相互作用以及影响这些作用的因素、不同色谱条件下各种作用力对蛋白质保留值的贡献、蛋白质的洗脱原理和IMAC在蛋白质分离纯化中的应用,论述了IMAC的特点、不足、克服的方法和今后应解决的问题。     

巯基吡啶配基液相色谱固定相的制备及其对质粒的快速纯化

在基因治疗中,质粒是一种常用的非病毒型载体。由于目前市场上对质粒的需求量很大,因此有必要开发大规模的质粒制备技术。该文以双孔型流通色谱介质为基质,以巯基吡啶为配基,制得了液相色谱固定相,并考察了其对质粒DNA的纯化效果,分析了分离机理。结果表明:该分离介质对质粒的纯化是基于疏水作用;当上样量为10 mL (质粒质量浓度为0.30 mg/mL)、流速高达4 mL/min时,质粒仍然能以100%的收率实现纯化,其纯度为100%。该色谱介质对RNA的柱容量高达2.2 mg/mL。     

新型磁性亲和吸附剂的制备及其在尿激酶纯化中的应用研究

合成了磁性聚乙烯醇和磁性聚甲基丙烯酸甲酯微球,并以它们为基质,用环氧氯丙烷、羰基二咪唑或溴化氰活化后,分别键合氨基乙酸、6-氨基己酸、乙二胺或己二胺为间隔臂,用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺盐酸盐或羰基二咪唑为偶联试剂,分别偶联对氨基苯甲脒、L-精氨酸甲酯、胍基乙酸或胍基己酸配体,合成了17种磁性亲和吸附剂,并用于尿激酶粗品的纯化.与前文制备的8种磁性亲和吸附剂作对照,研究了基质、活化试剂、间隔臂分子、偶联试剂及配体等因素对尿激酶纯化效果的影响.这些磁性亲和吸附剂在尿激酶的纯化中取得了较好的效果,大多数磁性亲和吸附剂的活性回收率在40%～70%之间,纯化倍数为15～40,吸附容量为0.08～0.2mg/mL.     

萘普生分子印迹拆分及亲和吸附平衡常数的测定

分子印迹 (Molecular imprinting)是一种新的、很有发展潜力的分离技术 [1～ 3 ] .该技术已成功地用于氨基酸、糖类及其衍生物和药物的手性分离 .萘普生是一种重要的非甾体消炎、解热和镇痛药 ,为了减少给药量和对人体产生的毒副作用 ,必须对其进行手性拆分 . Mosbach等 [4 ] 曾以 4-乙烯基吡啶为功能单体 ,利用分子印迹对外消旋萘普生进行了手性拆分 ,但 4-乙烯基吡啶使用前需经过减压蒸馏 ,使用不便 . Haginaka等 [5～ 7] 也采用 4-乙烯基吡啶为功能单体 ,以 (S) -萘普生为模板制得了均一粒径的分子印迹介质 .尽管分子印迹分离技术发展…     

Synthesis, Structure and Luminescence of a Novel 2D Cadmium Coordination Polymer with a Ligand Generated in situ

The hydrothermal reaction of 1,2-dicyanobenzene with NaN3 in the presence of Cd(NO3)2 affords a novel 2D cadmium tetrazolyl-benzoate,{Cd(tzbz)(H2O)}n (H2tzbz is 2-(5-tetrazolyl)-benzoate). The tzbz ligand is generated in situ through the 2+3 Sharpless cycloaddition reaction and hydrolyzation. Its crystal structure was determined by single-crystal X-ray diffraction method. The crystal crystallizes in the orthorhombic system,space group Pbca with a=9.6659(19),b=7.6366(15),c=25.964(5) ,V=1916.5(7) 3,Z=8,Mr=318.57,Dc= 2.208 g/cm3,F(000)=1232 and μ=2.276 mm-1. The Cd(Ⅱ) atom is coordinated by four tzbz ligands and one water molecule to form a severely distorted pentangle bipyramid. While each tzbz ligand connects to four Cd(Ⅱ) atoms in a μ4-η1,η2,η1,η1,η1 coordination mode to construct a 2D architecture of the title complex. Additionally,the title complex exhibits strong fluorescence at room temperature in the solid state.     

Two New Spirostanol Steroidal Sapogenins form Fermented Leaves of Agave americana

Two new spirostanol sapogenins named agavegenin A and B were isolated from the fermentted leaves of Agave americana L.Their structures were elucidated as (23S,25R)-5α-spirostan-3β,6α,23-tetraol(1)and (23S,25S)-5α-spirostan-3β,23,27-triol(2) by spectral methods.     

AlHn(n=1—3)的分子结构和AlH3热力学稳定性

在gaussian03基础上，分别用b3lyp和qcisd方法，在6-311++g^**基组水平上研究了AlH_n(n=1—3)分子及其一价阴阳离子的几何结构和谐振频率，计算了它们中性分子的离解能，第一垂直电离能，电子亲和能. 并与可能得到的实验值及文献上的理论计算值进行了比较. 发现qcisd方法得到的数据更接近实验值. 计算发现对AlH，AlH₂和AlH₃分子及其1价阳离子的Al—H键长，随着H原子数的增多，键长越短， 关键词： 3分子')" href="#">AlH₃分子 平衡几何结构 垂直电离能 垂直电子亲和能     

硼亲和材料的研究进展

硼亲和材料作为一种选择性分离富集顺式二羟基生物分子的功能性材料,近十几年里得到了蓬勃发展。在常规硼亲和材料的基础上,一些结构新颖、功能独特的材料逐渐出现并得到了广泛应用。本文介绍了硼亲和材料的研究进展,并总结了该类材料在硼亲和分离富集、疾病诊断、适配体筛选、药物传递和生物传感等方面的应用,最后对硼亲和材料的发展前景进行了展望。     

基于天冬氨酸的固定化金属离子亲和色谱材料用于磷酸化肽选择性富集

采用点击化学的方法将自然界中的天冬氨酸(aspartic acid)键合到硅球上(命名为Click Asp),并将Fe3+配位到Click Asp上,合成固定金属离子亲和色谱(IMAC)材料(Fe3+-Click Asp);采用红外光谱、X射线电子能谱和扫描电镜等表征证明Fe3+-Click Asp成功合成。将此IMAC材料用于蛋白质酶解液和牛奶中的磷酸化肽的富集,实现了磷酸化肽的高选择性富集。本研究为磷酸化蛋白质组学提供了新材料和新方法。     

白蛋白在以染料为配基的醋酸纤维滤棒上的等温吸附行为(英文)

 以醋酸纤维滤棒为基质 ,染料CibacronBlueF3GA为配基 ,合成了一种新的染料亲和介质 ;分别以牛血清白蛋白 (BSA)和人血清白蛋白 (HSA)为对象 ,用静态法进行了吸附实验 ,得到了相应的亲和等温吸附曲线 ;对曲线按Langmuir模型和Freundlich模型分别进行拟合 ;结果表明 ,醋酸纤维滤棒染料亲和介质对BSA和HSA的等温吸附遵循Freundlich模型。采用该亲和介质装柱并分离实际样品人血浆 ,可得到纯化的人血清白蛋白。