基于适配体亲和毛细管电泳-激光诱导荧光检测的凝血酶分析

以一种高亲和力适配体作为亲和荧光探针,以自建的毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)检测装置为基础,建立了一种高灵敏、快速测定人凝血酶的方法。荧光标记的凝血酶适配体特异性地与凝血酶结合并形成稳定的凝血酶-适配体复合物,采用CE-LIF对复合物进行分离检测,从而测定凝血酶浓度。探讨了盐离子种类及浓度对适配体与凝血酶结合的影响,并在选定的电泳条件下对凝血酶检测的线性范围、检出限和重现性进行了测定。结果表明,盐离子存在的条件下适配体与凝血酶的亲和力降低,不利于两者的结合;人血清溶液中,凝血酶浓度在0.25～10 nmol/L范围内与复合物峰面积具有良好的线性相关性(r20.991),检出限(S/N3)为55.6 pmol/L;精密度和回收率测定结果均能满足分析的要求。     

用于电子传输材料的含噻吩环噁二唑衍生物的合成

在有机电致发光器伯研究中,电子传输材料占有特殊重要的地位。但现存在的材料存在着不同的缺点。因噁二唑环的高的电子亲和性,噁二唑衍生物是常见的电子传输材料,如：2-(4-叔丁苯基)-5-联苯基噁二唑(PBD),但容易结晶和低的电子? 缀托韵拗屏怂挠τ谩Ｎ说玫叫碌挠行У牡缱哟洳牧希疚囊脏绶晕鹗挤从ξ锞獯Ⅳ人峄Ⅴセ苯獾炔街韬铣闪肃绶远ｋ拢偻ü绶远ｋ掠胂嘤Φ娜〈郊柞Ｂ人鹾稀⒐鼗返姆椒ń坏缱拥泥绶曰泛透叩缱忧缀托缘泥绶曰吠币耄铣闪巳中碌暮绶曰穱f二唑衍生物2,5-双[2,2'-双(5-取代苯基)-1,3,4-噁二唑]噻吩(R-OXDR=H,OCH~3,CH~3)。同时,采用循环伏安法对其电? 阅芙辛瞬舛āＵ馊只衔锒荚诟悍较虺鱿至艘欢钥赡娴难趸乖澹纱说玫狡涞缱忧缀褪?EA)分别为-3.10eV,-3.07eV和-3.08eV,其EA值都高于常用? 牡缱哟洳牧螾BD。R-OXD的高电子亲和势有利于电子从阴极注入。并且由时间渡? 椒?TOF)测得R-OXD的电子迁移率达到10^-^4cm^2/V.S(E=10^6V/cm)。所以R-OXD有可能是好的电子传输材料。     

一种研究生物大分子与其小分子配基相互作用的毛细管电泳新方法

建立了一种定量研究大分子与小分子间相互作用的毛细管电泳新方法,即在线微透 析三电极系统亲和毛细管电泳法。本法可测定小分子的自由浓度而不受蛋白质大分子的干 扰。详细介绍了实验装置的制作,探讨了进样机制。作为实例,研究了生理条件下ｐＨ７．４, ５０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸介质中,牛血清白蛋白与磺胺甲基异噁唑、Ｌ－色氨酸、Ｄ－色氨酸的亲和常数的 测定,其值分别为５．８×１０~ ４Ｌ／ｍｏｌ, ２．３ ×１０~４Ｌ／ｍｏｌ, １．７７×１０~３Ｌ／ｍｏｌ。本法较简便,能在生理环 境下测定,样品用量亦少。     

两种固定化金属螯合复合亲和膜色谱介质制备

以纤维素滤纸为基质,通过碱处理、环氧活化、偶联亚氨基二乙酸二钠、固定化Ｃｕ＾２＋后制得了大孔纤维素亲和膜。另外,在活化后的膜上通过共价交联覆盖上琼脂糖,制得了具有类似“三明治”结构且性能优于的复合亲和膜,装柱后分别制得固定化金属螯合亲和膜色谱柱。对两种亲和膜进行牛血清白蛋白等温吸附测定显示,两者的最大吸附量分别为１．１７ｍｇ／ｃｍ＾２和１．３０ｍｇ／ｃｍ＾２,与传统的琼脂糖凝胶类介质吸附量相当,表     

利用高度结构对称的共聚试剂制备高比表面积的硼亲和整体柱

硼亲和整体柱是一种能对顺式二羟基化合物进行选择性分离的重要色谱介质。然而,整体柱微结构在制备过程中难以控制。本文以分子结构高度对称的三聚氰胺和三(2,3-环氧基丙基)异氰酸酯(TEPIC)作为共聚试剂,利用“团队硼亲和”原理,采用原位聚合的方法制备了一种新型硼亲和整体柱。“团队硼亲和”的作用使该硼亲和整体柱对顺式二羟基化合物的结合pH降低至中性范围。结构高度对称的共聚试剂有效地提高了整体柱材料的比表面积,使其达80.3 m²/g,显著高于文献中报道的其它硼亲和整体柱。     

一种凝血酶亲和色谱介质的制备方法

对凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质的制备方法进行了研究。首先使用凝血酶和溴化氰活化的琼脂糖制备凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质,然后用生色底物法考察亲和色谱介质上凝血酶的活性,以凝血酶活性为指标对最佳偶联条件进行了优化。结果表明最佳条件为使用pH 8.3的Na₂CO₃-NaHCO₃溶液(含0.5 mol/L NaCl)为缓冲溶液,凝血酶用量为每1 g色谱介质加入凝血酶200 U,室温反应10 h。在最佳条件下所制备的色谱介质有较好的稳定性,在4℃条件下存放40天,亲和介质上的凝血酶活性仍有70.6%保留。该亲和色谱介质可广泛用于含凝血酶抑制剂的天然药物筛选和分离纯化。     

硼酸亲和整体柱在富集中药活性物质中的应用

以4-乙烯基苯硼酸(VPBA)为功能单体,季戊四醇三丙烯酸酯(PETA)为交联剂,乙二醇和二甘醇为二元致孔剂,通过热引发自由基聚合反应,在毛细管内原位聚合制备得到一种poly(VPBA-co-PETA)毛细管整体柱。所制备的整体柱具有典型的硼酸亲和特性,可以特异性地捕获含有顺二羟基的化合物。在前期实验的基础上,将其用于两种中草药 蒲公英和刺果卫矛中含顺二羟基的小分子活性物质的富集。这两种中药提取物直接用高效液相色谱进行检测时,其活性成分绿原酸等因含量太低而使检测困难或无法检测;经过硼酸亲和整体柱富集后收集洗脱液进行检测,色谱峰响应则显著提高。该结果表明所制备的poly(VPBA-co-PETA)整体柱可以作为富集中药提取物中含顺二羟基活性物质的有效手段。     

蛋白质组磷酸化和糖基化分析的新趋势

1磷酸肽富集的新材料与新机理 2激酶特异性磷酸肽的选择性富集技术 3糖蛋白质组分析中样品预处理步骤的集成 4糖肽的固相富集与标记     

柱状假丝酵母脂肪酶同工酶的一种高效液相色谱分离新方法

建立一种“疏水界面亲和色谱”分离柱状假丝酵母脂肪酶同工酶的高效液相色谱新方法。将商品化的CRL经离子交换色谱分离为两个同工酶组分 (CRLA和CRLB) ,在极低离子强度下 ,根据同工酶活性中心周围处于“开放”构象的疏水腔具亲疏水界面的特性 ,用疏水界面亲和色谱在NucleosilC4 (10 μ ,3 0 0 ,2 5 0× 4.60mm)柱上将CRLA和CRLB都分离为 4种同工酶组分。疏水界面亲和色谱非常适用于分离这种结构差异轻微的同工酶组分     

S-25与地NewS-25光阴极光谱响应特性的研究

本文研究了S-25与NewS-25光阴极的光谱响应特性.在850～1000nm范围光谱响应的提高主要归因于阴极层较厚,具有较大的阴极结构参量和截止波长.这既体现了NewS-25光阴极的优越性,也代这表了多碱阴极的发展方向.