新型双季吡啶醛肟盐HCM的高效液相色谱法的质控研究

建立新型双季吡啶醛肟盐HCM含量测定的液相色谱分析新方法。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(5 μm,4.6*250 mm);流动相为乙腈,0.5%十二烷基硫酸钠缓冲盐(加入0.2%三乙胺,磷酸溶液调节至pH2.5),梯度(1-4 min 43%乙腈,4-6 min 43%～51%乙腈, 6-30 min 51%乙腈,30-35 min 51%～43%乙腈,35-40 min,43%乙腈)洗脱;流速：1.0 ml/min;检测波长为290 nm;进样体积：20 μl;柱温：室温。上述色谱条件下HCM主峰保留时间22.9 min,对称性良好(<1.05),理论塔板数>7500;且在0.04～0.14 mg/ml的范围内,进样浓度与峰面积呈良好线性关系(r=0.9999,n=6);检测限为3 ng,定量限为9 ng;仪器精密度、日内、日间精密度及重复性的RSD 均小于2%。所建立的液相色谱方法精密度高,准确度好,可用于新型双季吡啶醛肟盐HCM的含量测定及质量控制。     

复方中药金铃子散及其单味药镇痛抗炎作用的比较

为观察金铃子散及其各单味药对小鼠镇痛抗炎作用的影响,通过热板法、醋酸扭体法和角叉菜胶致炎法,研究了金铃子散及其单味药的镇痛抗炎作用效果。结果表明:金铃子散复方及其单味药水煎液可使热板法小鼠在给药后30 min、60 min、90 min及120 min痛阈值明显延长,醋酸所致小鼠扭体次数明显减少(p0.05,p0.01),角叉菜胶所致大鼠足肿胀率明显降低(p0.05,p0.01),其中金铃子散作用效果最为明显。可见金铃子散具有明显的镇痛抗炎作用,且镇痛抗炎效果优于单味药。     

^31P核磁共振观察γ—干扰素对Molt—4细胞作用后含磷代谢物及pH变化

Ｍｏｌｔ＿４细胞的３１Ｐ核磁共振谱由磷酸单酯、无机磷（Ｐｉ）、双磷酸双酯、三磷酸腺苷（ＡＴＰ）的共振峰组成。用３１Ｐ核磁共振观察了γ－干扰素对Ｍｏｌｔ＿４细胞作用后含磷化合物的变化。根据Ｐｉ的化学位移对Ｍｏｌｔ＿４细胞内ｐＨ进行了监测。３１Ｐ核磁共振能一次同时监测细胞内多种含磷代谢物，是一种无损伤研究细胞代谢的有效方法。     

人宫颈癌细胞(Hela)内的31P核磁共振研究

建立了无损伤性³¹P NMR研究细胞内物质的实验方法, 并对人宫颈癌细胞(Hela)的³¹P NMR谱中含磷小分子代谢物的谱峰进行了分析; 细胞内无机磷(Pi)的化学位移对pH非常敏感, 通过测定其化学位移可间接确定细胞内的pH, Hela细胞内Pi峰的化学位移为5.88±0.01 (n＝3), 计算得到细胞内 pH值为7.05±0.01; 通过测量Hela细胞的³¹P NMR谱中ATP的α磷和β磷及γ磷的化学位移差值, 得出Hela细胞内Mg^2＋与ATP结合的复合物MgATP和整个ATP量的比值, 计算得到Hela细胞内游离Mg^2＋浓度为(253.3±0.13) mmol/L (n＝3), 与其它分析方法相比, ³¹P NMR测定细胞内游离Mg^2＋浓度具有对细胞样品无损伤的优点.     

反相高效液相色谱法测定α-[(二甲基氨基)亚甲基]-β-酮基-2-噻吩丙腈

应用反相高效液相色谱法测定α-[(二甲基氨基)亚甲基]-β-酮基-2-噻吩丙腈(IDP-3)的含量。采用Phenomex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),并以不同比例混合的甲醇和水的混合溶液作梯度淋洗;检测波长为330 nm,外标法定量。在优化的色谱条件下,IDP-3与其它共存物质能够良好地分离。IDP-3的质量浓度在10.0～100 mg.L-1范围内与峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)及测定下限(10S/N)分别为0.01 mg.L-1和0.035 mg.L-1。精密度试验表明,日内相对标准偏差(n=6)在0.43%～0.64%之间。     

肿瘤坏死因子α和γ-干扰素对白血病细胞作用的31PNMR分析

用^31P核磁共振观察了肿瘤坏死因子α（TNF－α）和γ－干扰素（IFN－γ）联合对人淋巴瘤白血病细胞系Molt-4作用后含磷化合物的变化；Molt-4细胞系的^31P谱主要由三磷酸腺苷（ATP）、无机磷（Pi)、磷酸单酯等的共振峰组成；^31P谱显示γ－干扰素、肿瘤坏死因子α及γ－干扰素和肿瘤坏死因子α联合对Molt-4细胞作用后，三磷酸腺式苷的β位磷的共振峰与无机磷的峰高比值（hATP/hPi)不同程度地降低；同时根据Pi的化学位移对Molt-4细胞胞内pH的变化进行了监测。