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马立克氏病病毒MEQ蛋白单克隆抗体的制备及应用研究 总被引:6,自引:0,他引:6
基因表达与病毒感染细胞及致瘤能力之间关系的阐明,将有助于我们对马立克氏病病毒(MDV)meq基因功能的了解,该研究利用通过杆状病毒载体在昆虫细胞系SF9上高度表达的MEQ蛋白免疫BALB/c小鼠,然后收获其免疫脾细胞与肿瘤细胞系SP2/0通过PEG于体外融合,获得的杂交瘤细胞被克隆并通过与MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)做免疫荧光试验(FA),进行其分泌抗MEQ单克隆抗体(McAb)能力的筛选,获得4株稳定产生抗MEQ蛋白McAb的杂交瘤细胞,其中3G12E6通过FA和免疫酶组化技术能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物。研究的结果首次发现,MDV致瘤株GA、RB1B感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中均有meq基因的表达,但在弱毒疫苗株CV1988感染的CEF和免疫鸡组织细胞中则未检测到MEQ,作者认为这是由于meq基因在致瘤株中表达水平高,而在非致瘤株中表达水平低所致,这可能是决定MDV毒力(virulence)或致瘤性(oncogenicity)的关键因素之一。 相似文献
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马立克氏病病毒meq基因功能研究 总被引:8,自引:0,他引:8
从马立克氏病病毒(MDV)不同致病型毒株meq基因序列,meq基因产物及其细胞内表达特性和meq蛋白生物学功能的研究探讨马立克氏病病毒致瘤基因meq功能。完成了648A,CV1988/Rispens,814,广西地方毒株G2,N,0093,0095,0297,0304共9个MDV毒株meq基因的序列测定。MDV不同致病型毒株的meq基因序列相对比较保守,它们相互间核苷酸和氨基酸序列的同源性均很高;与所有7个致瘤的MDV毒株相比,在2个MDV-1弱毒疫苗CV1988/Rispens株和814株发现有二个特征性位点突变。此外,还在其ORF中首次发现含15个氨基酸残基(EELCAQLCSTPPPPI)的2个重复和含6个氨基酸残基(PPICTP)的4个重复,全分布在MEQ蛋白C-端的转录激活域内。MEQ蛋白的表达仅局限于感染细胞的核内,而且随感染时间增加。具有从核质向核仁和核膜转移趋向;Western Blotting和免疫沉淀试验证实重组杆状病毒感染细胞裂解物中有大小约为60kD的特异带,利用表达的MEQ蛋白产物免疫BALB/c小鼠,获得的杂交瘤细胞被克隆并与MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)做免疫荧光试验(FA),获得4株稳定产生抗MEQ蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,其中3G12E6单克隆抗体能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物,而CV1988/Rispens感染的细胞则未检测到,发现细胞内表达的meq基因产物可明显促进MDVGA株对体外培养细胞的感染及增殖。研究结果表明,meq基因在感染细胞内的表达水平是MDV增殖和致病,致瘤的分子基因。 相似文献
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马立克氏病病毒疫苗CV1988株囊膜糖蛋白gI基因的序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
根据马立克氏病病毒(MDV)国际标准株GA株的基因序列设计合成了可扩增gI基因(1060bp)的引物,用PCR技术,以CV1988基因组为模板,扩增得到了预期大小的PCR产物,将此PCR产物和pUC18经同样的限制性内切酶KpnI和BamHI处理后,连接、转化、鉴定,得到了含有gI基因的质粒。将此质粒进行序列分析,比较了它与其他强毒和超强毒株的同源性,用DNAastan软件对其编码的氨基酸的疏水性 相似文献
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锆表面氧化膜的光电化学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用光电化学方法研究了金属锆的表面初始氧化膜和线性电势扫描形成阳极氧化膜.光电流作用谱上的阳极和阴极光电流取决于电极电势,而与成膜和测量溶液基本无关.光电流作用谱和瞬态光电流响应说明锆表面氧化膜为双层结构,内层为ZrO_2外层为ZrO_2·(H_2O)_n.光电流可以来自内、外层的光生载流子和基底金属的内光注入电子迁移至电极/溶液界面与溶液中的氧化还原对反应,光电流作用谱的分析给出了三个过程的光学间能值,分别为4.5eV、3.0eV和2.0eV. 相似文献
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珠算语VS世界语美国加利福尼亚大学的珠算教育中心主任里奥.理查德教授在论文中提出:"珠算语是一种世界语。尽管有好多国家的孩子在一起,但是珠算语大家都能听懂。在珠算语面前,无国籍之分,珠算语也是对数学认识的一个飞跃"—— 相似文献
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