尼罗罗非鱼主要组织相容性复合体Ⅱβ(MHCⅡβ)基因的克隆、表达和多态性

MHCⅡβ基因在鱼类免疫反应中起重要作用。采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)技术,克隆了尼罗罗非鱼的MHCⅡβ基因。MHCⅡβ基因含有5个外显子和4个内含子,其c DNA全长为1 142 bp,开放读码框为750 bp,编码249个氨基酸。通过同源性分析和进化树分析发现,与其他硬骨鱼类和哺乳类的相似性在30.6%~78.6%,和鲈形目的鱼类同源性最高。从25尾罗非鱼的50个开放读码框的阳性克隆中共获得10条不同的核苷酸序列,分别编码不同的氨基酸。氨基酸序列比对分析发现,多态性位点主要集中在MHCⅡβ基因的第2外显子上。通过对海豚链球菌感染后易感个体和抗病个体的PCR-SSCP电泳分析,发现电泳条带出现2~12条不同的单带,测序结果表明个体存在1~6个等位基因,暗示至少存在3个MHCⅡβ基因座。q PCR检测表明,MHCⅡβ基因在鳃、心脏、脾脏等组织高度表达,在肾脏、肌肉、脑等组织中中度表达,而在皮肤、肠、肝脏等组织中表达最弱。在攻毒后的头肾组织中,MHCⅡβ基因的表达量呈现下降-上升-下降的变化趋势,表明MHCⅡβ参与了罗非鱼的免疫反应。     

黄鳝脑部松果腺复合体的结构研究

应用松果腺细胞改良染色法，证实了黄鳝脑部存在松果腺复合体，光镜及电镜切片的研究结果表明，黄鳝松果腺复合体由终囊，松果体柄和背囊三部分组成；     

鱼用含雄烯二酮的包膜型硅橡胶药条的研制

研制了鱼用包膜型含雄烯二酮（ADSD）的硅橡胶药条，与常规药条比较，释药时间延长2.5倍，并减轻了“突破效应”，药物的释放也更稳定，药物从包膜型药条的释放服从零级释放规律，而从非包膜型药条中药物的释放符合Higuchi方程。     

海洋鱼类资源的可持续利用和海洋鱼类科学技术的研究方向

积极实施海洋鱼类的增殖与养殖是海洋鱼类资源合理开发和可持续利用的基本措施和有效途径。因此，建立和提高海洋鱼类增殖与养殖的新技术，是近年来海洋生物技术的重要研究领域之一。海洋鱼类的生殖内分泌生理学、生长与发育生物学、免疫学、分子生物学等是海洋鱼类增殖与养殖的理论基础；系统深入地开展这些学科的基础研究和应用基础研究，成为当前海洋鱼类科学技术的前沿和主要发展方向。     

石斑鱼卵巢cDNA文库构建及脂肪酸结合蛋白克隆

应用SMARPTM技术构建了斜带石斑鱼Epinephelus coioides卵巢cDNA文库。所构建的cDNA文库滴度为4.5×106 pfu/mL,重组率为99％,扩增后文库的滴度为1.2×1010pfu/mL。把phagemid转化为质粒后,随机挑选60个阳性克隆进行酶切鉴定和测序。酶切结果表明:插入片段长度均在500~3 000 bp之间。测序结果经过生物信息学分析,发现其中一个克隆为脂肪酸结合蛋白(FABP)基因全长,并与人肝型(L)脂肪酸结合蛋白同源性最高,为70％。     

促性腺激素释放激素类似物/地欧酮对长臀血清雌二醇和睾酮质量浓度的影响

采用放射免疫测定技术,对长臀鮠(Cranoglanis bouderius)在不同的性腺发育时期的血清雌二醇(E2)和睾酮(T)质量浓度变动,以及注射促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)/地欧酮(DOM)后的血清E2和T质量浓度变动进行了研究。结果表明:血清E2质量浓度在雌鱼的性腺发育期明显升高,在性腺成熟期开始下降,性腺退化期降到最低;血清E2质量浓度在雄鱼的性腺发育过程中缓慢升高,并持续保持较低质量浓度,到性腺退化期略有升高。血清T质量浓度在雌雄鱼的变化情况相似,性腺发育期明显升高,而在性腺成熟期开始降低,到退化期降到最低。注射GnRH-A能显著提高性腺处于不同发育时期的雌鱼的血清E2质量浓度和雄鱼的血清T质量浓度,注射多巴胺拮抗剂地欧酮(DOM)对血清E2和T质量浓度没有影响,但是GnRH-A和DOM联合注射能使雌雄鱼血清E2和T质量浓度提高,在性腺发育期尤为明显,这和GnRH-A DOM促进血清GTH水平提高相一致。     

硼酸功能化磁性COFs材料的合成及其用于儿茶酚胺类物质的富集效果研究

为了简单、高效、快速地检测儿茶酚胺类物质,该文采用水热法制备了硼酸功能化磁性共价有机框架材料(B(OH)₂@MATP@Fe₃O₄),并将其应用于儿茶酚胺类物质的富集,采用傅里叶红外光谱仪(FT-IR)、X-射线衍射仪(XRD)和热重分析(TG)等方法对B(OH)₂@MATP@Fe₃O₄材料的样貌进行表征。以儿茶酚胺类物质去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)为模型物质对B(OH)₂@MATP@Fe₃O₄进行萃取,结合高效液相色谱法(HPLC)进行检测和分析。结果表明,B(OH)₂@MATP@Fe₃O₄材料对NE、E、DA都能显示出比较好的富集效果。建立的B(OH)₂@MATP@Fe₃O₄磁性粒子分离富集-高效液相色谱法对儿茶酚胺类物质具有一定的可操...