pEGFP-N3-t-PA真核表达质粒的构建及其在成纤维细胞中的表达

目的利用基因工程技术克隆人组织纤溶酶原激活物（t—PA）基因并构建一种能高效、安全表达t—PA的pEGFP—N3-t—PA真核表达重组质粒,为进一步研制转基因动物奠定基础．方法采用高效Trizol试剂快速从黑色素瘤细胞中提取总RNA,RT—PCR获得t—PAcDNA,并将真核表达质粒pEGFP—N3和t—PA基因片段分别双酶切,将回收的pEGFP—N3大片段（4．7kb）与t—PA基因片段（1．1kb）重组．对pEGFP—N3-t—PA质粒进行酶切鉴定和基因测序鉴定．脂质体介导pEGFP—N3-t—PA转染成纤维细胞（NIn313）,并用RT—PCR法从mRNA水平检测t—PA的表达情况,用倒置荧光显微镜检测、分析其在NH 3T3细胞中的表达．结果成功地从黑色素瘤细胞中克隆了t—PA基因,并构建了以pEGFP—N3为载体的真核表达质粒载体,并能在真核细胞中表达、分泌t—PA．结论含t—PA基因真核表达质粒构建成功．     

水产禁用药物孔雀石绿的危害与对策分析

三苯甲烷类有机物孔雀石绿具有多方面的用途,文章首先简要介绍了孔雀石绿的化学性质、抑菌、抗真菌以及杀虫等强大功效,然后展开论述了孔雀石绿由于其高残留、高毒性以及致畸、致癌、致突变的毒副作用,而对水产养殖动物产生的剧毒、蓄积毒性、广泛组织毒副作用,以及对环境广泛而持久的危害,并且通过食物链对哺乳动物特别是人类自身造成致癌性、遗传毒性以及慢性毒副作用．然后介绍了孔雀石绿在水产上的个别违规使用现象,并进行了原因浅析．最后就如何因对孔雀石绿问题,从政策、宣传教育、科研等不同层面进行了对策分析．     

姬菇和鲍鱼菇生长期间8种胞外酶活性变化比较

以棉籽壳为培养料,采用瓶栽方法,测定了姬菇和鲍鱼菇生长期间8种胞外酶活性变化,结果表明:姬菇和鲍鱼菇均具有完整的胞外纤维素酶系;姬菇和鲍鱼菇的胞外CMC酶、FP酶和HC酶活性变化趋势大致相同,在子实体生长发育期均有酶活性高峰出现;姬菇和鲍鱼菇的胞外漆酶、过氧化物酶、淀粉酶、果胶酶和β-葡萄糖苷酶活性变化趋势不同;姬菇的胞外漆酶与过氧化物酶在茵丝生长期活性较高,鲍鱼菇的胞外淀粉酶和果胶酶在原基期有高峰出现.     

鲤鱼NLR-C基因分子克隆及其特性分析

利用RT-PCR和RACE技术克隆得到鲤鱼(Cyprinus carpio L.)NLR-C基因cDNA全长。经qRT-PCR检测发现,NLR-C基因在鲤鱼血液和脑中表达最高,在头肾、鳃、后肠和口腔上皮中有较高表达。采用鳗弧菌(V.anguillarum)刺激后,NLR-C mRNA在肝、脾、头肾和后肠中的表达有不同程度升高。结果显示,NLR-C基因参与鲤鱼天然免疫应答过程,具有抵御病原微生物侵袭的作用。     

鲤鱼NOD1基因克隆与组织特异性表达分析

利用RT-PCR技术在鲤鱼(Cyprinus carpio)中首次克隆得到了NOD1基因编码序列全长。生物信息学分析发现,鲤鱼NOD1具有3个保守结构域和相应的保守位点,在进化中与草鱼亲缘关系最近;半定量RT-PCR分析NOD1基因在鲤鱼不同组织中分布发现,NOD1在头肾和血液中表达最高,在肌肉、皮肤和性腺中表达量最少;鳗弧菌(V.anguillarum)刺激后NOD1基因在肝脏、脾脏、头肾和前肠中表达量都有明显上升。研究结果显示NOD1在鲤鱼应对鳗弧菌刺激天然免疫过程中可能发挥着重要作用。     

脂多糖对人卵巢癌细胞株IL-8 mRNA表达的影响

脂多糖(Lipopolysacchride,LPS)能够通过上调转移相关因子白介素8(Interleukin-8,IL-8)基因的表达促进癌细胞转移.为探究LPS对转移能力不同人卵巢癌细胞IL-8 mRNA表达的影响,我们以人低转移卵巢癌细胞株HO-8910和人高转移卵巢癌细胞株HO-8910PM为实验材料,采用实时定量反转录-聚合酶链式反应技术(qRT-PCR)研究LPS刺激后,IL-8 mRNA表达的变化.实验结果表明:与HO-8910相比,在HO-8910PM中LPS显著上调IL-8基因的表达水平(P<0.05).我们推测LPS刺激IL-8基因在转移表型不同的卵巢癌细胞中表达的差异与癌细胞转移能力相关.     

一类新的宽间隔跳频码的实现

基于ＧＦ（Ｐ）上的ｍ序列,提出了一类新的宽间隔跳频码序列,并在计算机上进行了模拟研究．其模拟结果表明：该跳频码序列的相关性和游程特性均优于最佳的跳频码序列．     

基于信息论的CDMA系统容量分析

从信息论的观点出发,对ＣＤＭＡ扩频通信系统的容量进行了理论探讨与分析．研究结果表明：以任何方式降低ＣＤＭＡ系统中干扰（或噪声）电平,提高信噪比,都可以相应地增加系统的容量     

Internet网络性能实时监测关键技术研究

详细探讨了基于OWDP（One way delay and package loss protocol)网络性能监测及评价方法,提出了OWDP在实际应用中存在的时钟同步和最小资源占用问题,并采用GPS（全球定位系统）技术和Poison信息流得到解决,在此基础上,设计并实现了实时性能监测系统,实验结果表明,该系统结果CAINONET（中国高速信息示范网）性能实时监测各项要求,具有测量精度高,实时性好,配置灵活等优点。     

水霉拮抗菌拮抗活性物质的分离鉴定

本实验采用琼脂扩散法证实,功能拮抗菌株TCCC11322克隆及培养上清,对寄生水霉XJ001生长都有明显的抑制效果,在此实验基础上,对无菌培养上清,进行粗蛋白、粗多糖和肽类物质的分离提取,并对各组分进行了水霉生长拮抗活性检验鉴定,结果证明,培养上清中的分泌性蛋白成分对水霉生长具有明显的抑制效果。