植酸酶基因表达与调控机制研究(Ⅱ)──番茄幼苗cDNA文库构建与植酸酶基因筛选

采用异硫氰酸胍法从发芽３～４ｄ的番茄幼苗中提取出总ＲＮＡ,用Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）纤维素亲和层析分离纯化ｍＲＮＡ．以ｍＲＮＡ为模板,Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）为引物用逆转录法合成双链ｃＤＮＡ．将ｃＤＮＡ与ＥｃｏＲＩ接头连接后克隆到表达载体λｇｔ１１的单一ＥｃｏＲＩ位点,经体外包装后感染宿主菌Ｙ１０９０,成功地构建了完整的番茄幼苗ｃＤＮＡ文库．用颜色筛选法筛选重组子,然后用植酸酶抗体做探针进行免疫筛选,得到两个阳性克隆．挑取阳性克隆噬菌斑扩增后纯化ＤＮＡ,经琼脂糖凝胶电泳鉴定,显示确有外源ＤＮＡ存在．该插入片断序列测定正在进行．     

番茄植酸酶分离提纯及其特性研究

运用硫铵沉淀阴离子交换柱层析,凝胶过滤、ＦＰＬＣ和活性电泳等技术,从缺磷条件下生长的番茄根抽提物中分离提纯了植酸酶。     

桑托斯盆地盐下CO2聚集条件及对油气成藏影响

巴西桑托斯盆地盐下层系是近几年世界油气勘探的热点地区,但盐下已发现的油气田中普遍含有CO₂。通过对CO₂含量、CO₂碳同位素和伴生氦气同位素分析,明确桑托斯盆地盐下油气田中的CO₂成因类型主要为幔源无机成因。从CO₂成因类型出发,结合对桑托斯盆地盐下已发现油气田中CO₂含量与基底断裂展布关系,提出紧邻基底大断裂的油气田中CO₂含量往往高于远离基底断裂的油气田。同时,通过对桑托斯盆地盐下典型油气田中的CO₂形成条件和聚集成藏特征分析后,认为火山活动和晚期活化的基底断裂是桑托斯盆地盐下CO₂聚集成藏的主要控制因素,其中火山活动为CO₂的聚集成藏提供气源条件,晚期活化的基底断裂为CO₂聚集成藏提供了有利通道条件。受后期大量幔源CO₂源源不断地注入影响,油气藏中的油气组分发生蒸发分馏作用,并形成高含CO₂的凝析气顶和下部的稠油油环。     

鸡溶菌酶A元件在大豆中对uidA基因瞬时表达的影响

本研究将报告基因uidA(β-葡糖苷酶基因)两侧各含有一个鸡溶菌酶A元件(chiMAR)的中间表达载体pLM9与不含chiMAR的中间表达载体pLM5经农杆菌介导转化大豆,以研究chiMAR对外源uidA基因瞬时表达的影响.结果表明,在大豆品种科丰6号和冀豆12中,chiMAR均能显著提高uidA基因的瞬时表达率(p<0.01),并且chiMAR对不同品种中uidA基因瞬时表达率的影响不同;在科丰6号中,chiMAR对uidA基因的瞬时表达量没有显著影响,但能够降低uidA基因瞬时表达的个体差异度;chiMAR可以显著降低uidA基因在冀豆12中的瞬时表达量(p<0.01),同时提高uidA基因瞬时表达的个体差异度.     

黄骅拗陷新生代构造样式及其演化

为了揭示黄骅拗陷新生代盆地原型、恢复盆地构造演化历史,运用油区构造解析理论,对黄骅拗陷新生代盆地构造样式及其演化进行综合分析,认为盆区存在伸展式和走滑式两种基本构造样式。在盆地尺度内,按断层几何学和运动学特点,伸展构造样式可进一步分为伸展拗陷、伸展拗断、地堑断陷、多米诺半地堑断陷、滚动半地堑断陷、复式半地堑断陷、跷跷板断陷、伸展断拗8种次级构造样式,并基本遵循伸展拗陷—伸展拗断—伸展断陷—伸展断拗演化序列,这种演化序列与岩石圈的流变学特征和递进伸展变形过程有关。走滑构造样式受深断裂走滑作用控制,可分为雁列式走滑构造和帚状断层组。     

缺磷条件下番茄和羽扇豆分泌应答机制与磷需求的比较

对番茄和羽扇豆在不同磷浓度水培中的应答机制作了系统分析.结果表明,在低磷条件下羽扇豆和番茄根系有机酸、酸性磷酸酶和植酸酶分泌量均有所增加.但下列表现差异明显①羽扇豆根系酸性磷酸酶分泌量明显高于番茄,而植酸酶分泌量则趋势相反.②羽扇豆根系有机酸的分泌增高量显著高于番茄.③番茄诱发应答反应的介质磷浓度显著比羽扇豆高(前者约为300μmol/L,而后者为10μmol/L)④番茄诱导应答反应时的内部磷含量(PTPC)亦比羽扇豆高(前者为4.2mg P·g-1,后者为1.5mg P·g-1).以上结果显示,在正常生长过程中番茄对磷的需求量明显高于羽扇豆,可能是导致其对磷缺乏适应能力低下的重要因素.同时缺磷条件下根系诱导分泌酸性磷酸酶、植酸酶和有机酸可能是植物获取磷酸盐,改善根际营养状况的重要适应机制.     

分泌性磷酸酶及有机酸于根际分布状况的初步研究

运用特制的栽培设施将１０ｍｍ范围根际土壤纵分为０．５ｍｍ研究羽扇豆根系分泌物的分布状况。结果表明，羽扇豆根系分泌性酸性磷酸酶和有机酸类主要分布在根际０－２．５范围内。     

自动门门区方案计算机辅助设计

根据自动门的发展现状及发展趋势,结合实际生产需求,通过工程力学分析,开发了计算机辅助设计自动门门区方案软件.它优化了设计过程,使用户在开放的数据库环境下进行设计, 提高了效率及工程图质量.     

十拷贝串联重复laGLP-1基因植物表达载体的构建及对黄瓜遗传转化的研究

天然胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是含有30个氨基酸的短肽激素,对2型糖尿病具有特殊疗效.以本实验室克隆的长效GLP-1(long acting GLP-1,laGLP-1)基因为基础,构建了十拷贝串联重复laGLP-1的无抗生素选择标记的植物表达载体pX6-laGLP-1,采用农杆菌介导法对黄瓜自交系2M1进行转化,通过PCR及Southern杂交检测分析,最后获得了4株稳定整合十拷贝串联重复laGLP-1的转基因植株.该遗传体系的建立为研发糖尿病食疗型转基因植物或用其生产治疗糖尿病的口服药物奠定了基础.     

地中海油气富集规律与未来勘探方向

 2009年后东地中海地区相继获得了多个大的油气发现,显示该地区油气资源潜力巨大。目前已经在地中海海域的19个盆地中找到了约44.7亿t油当量的油气可采储量,待发现油气近122.8亿t油当量,但资源分布很不均匀。整体上以东地中海最为富集,中地中海次之。大部分油气储量分布在水深小于300 m的近岸浅水区,其次为大于500 m的深水区。地中海海域已发现的油气田中,以大型和特大型油气田居多,主要分布在东地中海,且大多数油气田目前并未采取增产措施,具有进一步挖潜的空间。地中海地区具有非常好的油气勘探潜力,但存在“东西分区,上下分层”的特征。其中,西地中海勘探程度相对较低,未来主要以新区新领域勘探为主,中地中海勘探程度相对较高,以新层系的挖潜为主,而东地中海的深层和新区均有很大的勘探潜力。