我院实验动物屏障环境设计、建设和管理中自主创新技术的应用

我国2001版实验动物国家标准中取消了普通级大小鼠,生产和使用大小鼠的环境必需为屏障环境,取消了亚屏障环境[1~2],因此凡是生产和使用大小鼠的单位均需新建、改建或设置屏障环境。南京军区南京总医院是一所“医、教、研”协调发展的大型综合性医院,科研力量雄厚,人才荟萃,医院     

基因工程ROSA小鼠主要脏器重量及脏器系数的测定

目的测定基因工程B6;129-Gt(ROSA)26Sor小鼠主要脏器重量和脏器系数。方法实验选用5～6周雄性、6～7周雌性小鼠各15只,用Sartorius电子天平分别测定体重和10个主要脏器重量,计算脏器系数,并对雌雄脏器重量和脏器系数之间进行比较。结果雌雄小鼠脏器重量间比较,雄性鼠体重明显大于雌性的体重(P<0.01)、心、肾的重量间差异极显著(P<0.01);肝脏、肾上腺间比较差异显著(P<0.05)。雌雄间脏器系数比较,肝脏、肺脏、脑、肾、肾上腺间差异极显著(P<0.01),心、脾、胰脏间差异不显著(P>0.05)。结论转基因ROSA小鼠不同性别对脏器重量及脏器系数有一定的影响,同时该数据为其它相关研究提供参考。     

制动致福利受损大鼠部分行为学改变及其体内NF-κB的变化

目的 观察制动致福利受损SD大鼠部分行为学改变以及体内NF-κB的变化。方法 选取体质量约200 g的雄性SD大鼠,使用管状容器给予束缚应激刺激,并通过旷场实验和O迷宫观测大鼠在第0、1、3、7、10、14天的行为学表现。测定了相应时期的NF-κB p65 mRNA转录水平和蛋白表达量。结果 束缚第3天起,大鼠肝脏组织NF-κB p65 mRNA转录水平和蛋白表达均较束缚前显著增高 (P< 0.05),但此时尚未见行为学改变;束缚第7天起大鼠的活动兴趣与活动能力水平较束缚前显著下降 (P< 0.05),显示焦虑、恐惧状态。结论 制动致福利受损大鼠肝细胞内NF-κB mRNA及蛋白表达的变化早于行为学的改变。     

小鼠细小病毒VP2蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达和免疫原性分析

目的 利用杆状病毒表达系统合成重组小鼠细小病毒(MVM)VP2蛋白，并对其免疫原性分析。方法 将优化后的MVM VP2序列克隆至表达载体pFastBac1,命名为pFastBac1-MVM VP2,再将其转化至DH10Bac感受态大肠杆菌中形成重组杆粒，提取重组杆粒经PCR鉴定正确后转染昆虫细胞Sf9,镜下观察到细胞明显病变后收获重组杆状病毒rBac-MVM VP2。Sf9细胞接重组病毒48和72 h后，用间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)法验证重组蛋白的免疫原性。结果 构建的rBac-MVM VP2重组杆状病毒感染Sf9细胞后，可成功表达MVM VP2重组蛋白，经Western blot和IFA检测分析，重组蛋白具有较好的免疫原性且在病毒感染72 h时表达量较高。经蛋白纯化后可得到纯度较高的VP2重组蛋白。结论 本研究利用昆虫细胞-杆状病毒系统成功表达MVM VP2蛋白并具有良好的免疫原性，为VP2相关功能的研究和临床诊断方法的建立奠定基础。