利用固定化微生物细胞羟基化左旋乙基甾烯双酮

研究了海藻酸钙包埋法固定化技术在甾体化合物的生物转化中的应用.利用固定化 Penicillium raistrickii 细胞实现对左旋乙基甾烯双酮（13-ethyl-estr-4-ene-3,17-dione）的15α 位羟基化作用,合成了重要的药物中间体15α-羟基左旋乙基甾烯双酮.优化了固定化孢子浓度,固定化孢子接种量,投料浓度,投料时间,转化时间等转化条件.结果表明：在摇瓶发酵生物转化中,固定化 Penicillium raistrickii 细胞可重复利用5次而转化能力没有明显下降.     

实现人源FGF-21高效可溶性表达的两种策略

采用分子伴侣协助蛋白表达的方法及乳糖自诱导的策略,实现人源FGF-21在大肠杆菌中的高效可溶性表达.结果显示,在分子伴侣Tig的协同表达下,融合蛋白TrxA-FGF-21可溶性达到92.4%.采用乳糖自诱导策略,融合蛋白TrxA-FGF-21表达量达到17.4%左右,菌体〖WTBX〗OD〖WTBZ〗600达到12.4,可溶性TrxA-FGF-21相对产量是IPTG诱导发酵条件的5.5倍.该方法制备的重组FGF-21在C57BL/6小鼠体内具有降低血糖的生物学活性,甘油三酯水平与对照组相比也表现极显著差异(〖WTBX〗P〖WTBZ〗<0.01).     

纳米Ag2O2-PbO2化学修饰电极对大肠杆菌细胞膜壁和DNA损伤的研究

制备了一种新型纳米AgO2-PbO2修饰电极,在选定的正电位下,电极表面产生羟基自由基(.OH).通过测定产生的脂质过氧化物和漏出蛋白质的量来研究羟基自由基对大肠杆菌细胞膜壁损伤的情况,并运用电泳和DNA测序的方法对大肠杆菌质粒DNA的损伤及其对序列变化进行了研究.     

肌肽对顺铂所致小鼠急性肾损伤的保护作用

研究肌肽（carnosine）对顺铂（cisplatin, CDDP）所致小鼠体内急性肾损伤的保护作用,并探讨可能的机制.雌性昆明小鼠按体重分成4组,分别为正常对照组,肌肽对照组,顺铂化疗模型组和肌肽保护组.正常对照组和肌肽对照组分别连续腹腔注射生理盐水和肌肽10 d;顺铂化疗模型组于第5天单次腹腔注射顺铂;肌肽保护组连续腹腔注射肌肽10 d,并于第5天单次腹腔注射顺铂;所有动物于第10天采血处死,分别测定各组血清尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)含量,分析肾皮质匀浆丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活力变化,苏木精-伊红染色观察肾组织病理学改变.结果表明：顺铂化疗模型组血清CRE,BUN和肾皮质匀浆MDA含量明显上升,GSH和SOD含量显著下降,肾组织病理学变化明显,肌肽保护组可明显改变上述现象. 由此得出结论,肌肽可以减轻顺铂引起的急性肾损伤,其作用机制可能与其抗氧化作用和清除自由基活性有密切关系.     

基于甲基葡萄糖醛酸钠诱导下大肠杆菌的光度法快速检测研究

建立了一种快速检测大肠杆菌的光度分析法。在脱氧胆酸钠(DOC)培养基中,大肠杆菌被甲基葡萄糖醛酸钠(m ethyl-β-D-glucuron ide sod ium,M etG lu)诱导,在细菌体内产生特异性葡萄糖醛酸酶(-βD-glucu-ron idase)。通过膜渗透剂Polymyxin B nonapeptide hydrochloride(PBN)和Lysozym e对大肠杆菌细胞膜的作用,葡萄糖醛酸酶从大肠杆菌细胞中释放出来。葡萄糖醛酸酶能够催化分解底物p-N itrophenyl--βD-glucu-ron ide(PNPG)而产生对硝基酚,而对硝基酚的量与溶液中大肠杆菌的浓度成正比。对硝基酚对波长为400nm的可见光有最大吸收。根据吸光度值的大小与对硝基酚的浓度成很好的线性关系,通过测定400 nm处对硝基酚的吸光度值,实现了对大肠杆菌的快速定量检测。     

基于核酸适配体的新型荧光纳米生物传感器用于凝血酶的测定

利用凝血酶的两条核酸适配体与凝血酶的高亲和力构建了三明治结构, 利用磁性纳米颗粒的磁性分离技术, 设计并制作了一种新型的荧光纳米生物传感器, 用其检测凝血酶. 此法对凝血酶的响应线性范围为2.24×10-11～4.03×10-9 mol/L, 其线性方程为I=0.9758×1011c-2.628, 检出限为1.0×10-11 mol/L, 对浓度为2.68×10-10 mol/L的凝血酶检测10次, 其RSD为2.56％, 测得的荧光信号稳定, 24 h后测定并无衰减, 具有很高的检测特异性和灵敏度.