糖尿病合并脑梗塞患者糖化血红蛋白和血液流变学联合检测的意义

目的:探讨糖尿病合并脑梗塞患者糖化血红蛋白(HbA1c)和血液流变学5项指标的联合应用的价值。方法:选择65例糖尿病合并脑梗塞患者与40例正常人的HbA1c和血液流变学5项进行比较分析。应用糖化血红蛋白自动分析仪测定HbA1c,全自动血液流变仪(LBR-NBC)测定血液流变学5项指标,包括全血高切黏度、全血低切黏度、刚性指数、聚集指数和纤维蛋白原浓度(Fib)。结果:糖尿病合并脑梗塞患者HbA1c含量和5项血液流变学指标均高于正常对照组,两组的血液流变学指标差异有显著性意义(P0.01),且HbA1c与血液流变学的5项指标之间呈正相关。结论:联合应用HbA1c和血液流变学5项指标,有助于监测糖尿病合并脑梗塞患者的病情变化和预后分析。     

药物干预小鼠凝血功能对肿瘤形成的影响

目的:以药物干预接种肿瘤小鼠凝血功能,研究早期肿瘤形成与凝血系统功能的关系。方法:成年健康KM小鼠皮下接种S180肿瘤细胞,分正常组、肿瘤对照组、肝素组、抗癌药组、溶剂组。接种瘤细胞后第5天开始药物干预,分别为:不处理、皮下注射生理盐水(2 d 1次)、皮下注射低分子量肝素(2 d 1次)、抗癌药灌胃(每d 1次)、溶剂灌胃(每d 1次)。在接种后第3周末测量肿瘤大小、凝血酶原时间、血浆抗凝血酶Ⅲ和血清TNF-α水平,再处死小鼠,剥离实体肿瘤。统计学分析肿瘤大小与各检测参数之间的相关性。结果:肿瘤对照组和溶剂组分别在接种瘤细胞后第6和第10天有1小鼠死亡,肿瘤大小测量结果显示,对照组和溶剂组的瘤体显著较大,平均为(5.0±2.5)cm~2,肝素组的外观比前两者略小,平均为(3.2±1.8)cm~2,但与前两者无统计学上差异。抗癌药组瘤体显著较小,平均(1.8±0.82)cm~2,与对照组有显著差异(P<0.01)。统计学分析结果显示,肿瘤大小与凝血酶原时间和抗凝血酶Ⅲ水平成负相关(P<0.05),但与血清TNF-α的水平成正相关(P<0.05)。结论:单纯肝素干预治疗肿瘤小鼠无显著减小肿瘤大小作用,但与对照组相比瘤体有缩小的趋向,抗凝药物治疗可能对肿瘤的发生和发展具有抑制作用。     

线粒体病的分子生物学机制

线粒体病是一种少见的能量代谢病,病情复杂多样,从单一组织损伤或无明显临床症状到多系统发病乃致患者早期死亡,在临床上容易误诊或漏诊,甚至延误治疗.由于线粒体的结构与功能受核基闪组(nDNA)与线粒体基冈组(mtDNA)双重调控,其中大多数线粒体酶、结构蛋白和各种蛋白因子由nDNA编码,因而多数原发性线粒体病是nDNA突变...     

棒状链霉菌扩环酶R306位点的定点突变

目的:通过对棒状链霉菌的脱乙酰氧基头孢菌素C合酶(DAOCS)C末端R306位点突变,改变酶的活力和底物专一性。方法:利用生物信息学和空间结构分析推测,利用定点突变技术,对DAOCS的C-末端R306位点进行定点突变。结果:将DAOCS的C末端R306位点突变为其它3种性质相异的氨基酸,显示酶的活力和底物专一性都有一定改变。结论:DAOCS的C末端修饰对于提高酶活力或改变酶的底物专一性是一个非常有效的策略。     

三例异常血红蛋白与HbQ+H双重杂合子研究

本文报导三例在广州及江西发现的异常血红蛋白 HbQ 的研究结果。三例先证者均因贫血而住院治疗。血液学分析及家系调查结果表明,其中两例为 HbQ 与α地中海贫血双重杂合子(HbQ+H),贫血原因是由于 HbH 病所违成。经一级结构研究,证实三例异常 Hb 是α链第74或75残基 Asp→His,亦即 H1)。Taichung 或 Hb Iran。     

晚期糖基化终产物对人肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的: 研究晚期糖基化终产物(advanced glycation end products, AGEs)对人肾小管上皮细胞株(HKC)的细胞毒性作用.方法:以体外培养的HKC细胞为研究对象,采用MTT法测定不同质量浓度(0、50、100、200、400、800 mg/L) AGEs对HKC生长的抑制作用,应用流式细胞仪分析细胞的凋亡情况,RT-PCR分析不同浓度AGEs处理HKC后其IL-1β,TNF-α,HMGB1基因的转录水平变化.结果:AGEs质量浓度为100、200、400、800 mg/L时分别刺激HKC细胞24和48 h后,均能显著抑制细胞的增殖,且抑制作用具有时间和剂量依赖性.流式细胞仪分析发现,AGEs能促使HKC发生凋亡,凋亡率亦随AGEs浓度的增高而增加.RT-PCR方法检测显示,AGEs使HKC细胞IL-1β、TNF-α、HMGB1基因的表达上调.结论:AGEs可抑制人肾小管上皮细胞的增殖,并诱导其发生凋亡,此作用可能与其上调IL-1β、TNF-α和HMGB1基因的表达有关.     

重组大鼠溶菌酶N端多肽的原核表达及其对晚期糖基化终产物的结合作用

目的:探讨溶菌酶N端多肽片段基因的重组并在原核中表达,研究该片段与晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)的结合作用。方法:从SD大鼠外周血白细胞中抽提总RNA,经逆转录并扩增大鼠溶菌酶N端基因片段,以质粒pET-30 a( )为载体构建表达质粒pLY77。含pLY77的工程菌Rosetta(DE3)经IPTG诱导,对该重组多肽进行高效表达。表达产物经N i -NTA琼脂糖柱层析纯化后,得到的溶菌酶N端多肽片段LY77经SDS-PAGE和W estern印迹法鉴定,ELISA法分析体外结合活性。结果:LY77在Rosetta(DE3)中高效表达,主要以可溶性蛋白的形式存在,相对分子质量约为11 000;LY77对体外制备的晚期糖基化蛋白BSA-AGEs具有显著的结合活性。结论:LY77对AGEs具有很高的亲和力,为进一步探讨LY77可能应用于体内促进AGEs的清除和参与免疫调节作用奠定基础。     

人溶菌酶N端与Exendin-4嵌合蛋白的基因克隆及原核表达

目的:克隆嵌合多肽人溶菌酶N端-Exendin-4基因并进行原核表达和纯化.方法:通过重组PCR技术将人溶菌酶N端74个氨基酸的基因序列与Exendin-4多肽基因序列相连接,其间引入一段由凝血酶和二肽基肽酶识别位点组成的连接序列.以嵌合基因hLYZ(N74)-Ex4与质粒pET-32a(+)构建原核表达体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达.表达蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化、Western blotting鉴定;透析复性后,以肠激酶切割并回收目的多肽.结果:重组质粒pET-32a/hLYZ(N74)-Ex4构建正确,目的蛋白主要以包涵体形式存在,37℃诱导4h、IPTG浓度为0.6 mmol/L时表达量最高,约占菌体蛋白总量的30%.Western blotting检测显示重组蛋白为单一清晰条带.重组蛋白经肠激酶切割后,回收得到高纯度的嵌合多肽.结论:成功构建hLYZ(N74)-Ex4嵌合基因的原核表达质粒,高效原核表达并获得高纯度目的蛋白.     

计算机计算混合食物最佳配比及必需氨基酸构成比效价

用计算机计算混合食物的最佳比例以及其互补效果,结果显示,按算出的最佳比例混合食物后,氨基酸分有大幅度提高,而搭配不当则降低混合食物的氨基酸分。建议用食物必需氨基酸的“构成比效价”(CRV)定量评价食物的互补作用。CRV的意义是表示食物必需氨基酸构成比例接近国际粮农/卫生组织(FAO/WHO)模型的程度,混合食物CRV增加越大,获得的互补作用就越大。将食物的CRV与氨基酸分同时考虑,可得到混合食物的最佳比例。