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In the field of proteomics the need to detect low-abundance cellular components, such as regulatory proteins, is of critical importance. Two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-D PAGE) is one of the most commonly used separation tools for these biological investigations. In this paper we report an alternative micropreparative 2-D PAGE sample application method, called the "paper bridge loading" method. This method makes it possible to apply a larger sample volume to commercially available immobilized pH gradient (IPG) strips. The Vh products required for focusing are only marginally longer than those used in analytical experiments. The method was compared to traditional cup loading and in-gel rehydration. With 18 cm long narrow-range Immobiline DryStrip pH 4.5-5.5, the "paper bridge" method allowed the application of 10 mg human plasma proteins compared to 3 mg with traditional loading methods. The corresponding figures using Escherichia coli sample was found to be 6 mg and less than 2 mg, respectively. The paper bridge method also showed the best results in terms of spot resolution and separation of high molecular weight proteins.  相似文献   
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2-Substituted or 2,2-disubstituted 4,6-dioxo-1,3-dioxanes, which are analogs of Meldrum's acid and were obtained by reaction of malonic acid with acetic anhydride and the appropriate carbonyl compound in the presence of sulfuric acid, exist in solution preferably in a single form according to the PMR and 13C NMR spectral data. Fluctuation of the CH2 group is not observed. The mass spectra are characteristic and are distinguished by splitting out of the carbonyl compound from the molecular ion or successive splitting out of CO2 and ketene molecules. The Meldrum acid analogs do not affect plant growth but have a depressive effect on the central nervous system of animals and low toxicity.Translated from Khimiya Geterotsiklicheskikh Soedinenii, No. 11, pp. 1482–1486, November, 1975.  相似文献   
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999.
    
Zusammenfassung Eine einfache Methode zur Bestimmung von Acetessigester (I) und -Aceto--butyrolacton (II) nebeneinander beruht auf der sauren Hydrolyse, bei der aus I Aceton und CO2, aus II ebenfalls CO2 sowie Acetopropanol gebildet werden. Der Gehalt an I ergibt sich aus der Bestimmung von Aceton, die maßanalytisch mit Hilfe von Hydroxylaminhydrochlorid durchgeführt wird und für den durch Acetopropanol verursachten geringen Fehler korrigiert werden muß. Durch gravimetrische Bestimmung des CO2 ergibt sich die Summe I+II und aus der Differenz der Gehalt an II.
Summary A simple procedure for the determination of ethyl acetoacetate (I) and -aceto--butyrolactone (II) in presence of each other is based on hydrolysis in acid medium, whereby I yields acetone and CO2, II acetopropanol and CO2. The amount of I results from the determination of acetone performed volumetrically by means of hydroxylamine hydrochloride, a minor correction being required for the slight error caused by acetopropanol. CO2, corresponding to the sum I+II, is determined gravimetrically. The amount of II is calculated from the difference.
  相似文献   
1000.
Conclusions The reactions of hexahydro-1,3-indandlone with ammonia and some amines were studied, and the structures of the products formed were proved. In the alkylation of-diketones of the hexahydroindan series and their enamines under the usual conditions C-alkylation products are not formed.Translated from Izvestiya Akademii Nauk SSSR, Seriya Khimicheskaya, No. 7, pp. 1214–1218, July, 1966.  相似文献   
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