聚多巴胺修饰棉花固定金属离子用于磷酸化多肽的富集

本文通过多巴胺自聚合在天然的棉花纤维表面,构建了仿生聚多巴胺(PDA)膜层,然后利用儿茶酚羟基固定Ti~(4+),设计并合成了一种固定金属亲合色谱(Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography,IMAC)材料Cotton@PDA-Ti~(4+),并将其用于磷酸化多肽的富集。该材料机械性能好,化学性能稳定和生物相容性好,且制备过程简单,通过简易的In-pipet-tip固相萃取(SPE)装置使整个富集操作过程简便快速。实验结果表明,Cotton@PDA-Ti~(4+)不仅可以从简单的蛋白酶解物(β-casein)中富集磷酸化多肽,并且在含有大量非磷酸化多肽的复杂体系样品中对磷酸化多肽也表现出良好的选择性。另外,利用Cotton@PDA-Ti~(4+)对磷酸化多肽进行富集也有较高的效率。我们将该材料应用于实际样品,如人体血清以及脱脂牛奶酶解物中磷酸化多肽的富集,均表现出了较好的选择性。说明该方法有可能用于磷酸化蛋白质组的全分析。     

磁共振血管成像在颈动脉狭窄检查中的对比研究

目的研究在颈动脉狭窄检查中采取磁共振血管成像的诊断价值。方法回顾性分析惠州市中心人民医院自2015年12月至2016年12月期间收治的39例颈动脉狭窄患者所有资料,将减影血管造影检查结果作为金标准实行磁共振血管成像检查,分析狭窄检测敏感性、准确性以及特异性。结果磁共振血管成像检查狭窄检测敏感性、准确性以及特异性发生率分别为97.43%、92.31%、94.87%。结论将磁共振血管成像应用在检查颈动脉狭窄中具有显著效果,可以提升准确符合率,值得广泛应用与研究。     

基于光谱分析的姜黄素碱性自氧化及其产物的抗氧化活性

在室温及弱碱性条件下进行姜黄素自氧化反应,应用柱色谱分离、紫外吸收光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振波谱(NMR)和质谱(MS)等分析技术,分离并鉴定了主要自氧化产物的化学结构.针对反应进程,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析技术,从底物消除和产物生成2个方面进行了定性及定量研究.以抗坏血酸作阳性对照,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O_2~(-·))体系,定量比较了产物和姜黄素的体外抗氧化活性.结果表明,姜黄素在室温及弱碱性条件下的降解消除以自氧化反应为主,姜黄素消除过程和自氧化产物生成过程均符合一级动力学特征.自氧化产物具有双环乙酰丙酮的骨架结构,并显示有DPPH·,·OH和O_2~(-·)等自由基清除活性,但作用强度均显著低于姜黄素,因此在姜黄素应用过程中应严格控制pH条件,避免发生自氧化反应.     

嘧啶衍生物与人血清白蛋白的相互作用

在模拟生理条件下,运用荧光光谱、激光闪光光解(LFP)和分子对接等技术研究了8种具有抗肿瘤活性的嘧啶衍生物(PDs,其中PDs A 5-FU为成药,PDs B-H为实验室自制)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用.利用Stern-Volmer方程和激光闪光光解技术分析了PDs对HSA的荧光猝灭机制,PDs A和B为静态猝灭,PDs G和H为动态猝灭.用双倒数曲线法得出5种PDs与HSA的结合常数Ka和结合位点数n,在测定条件下5种PDs与载体结合位点数均为1,且均以弱结合力结合,通过热力学参数ΔH,ΔS和ΔG推测出PDs B,C和E与HSA之间的作用力为静电作用力和疏水作用力,PDs A和D与HSA之间的作用力是氢键和范德华力,分子对接结果与其一致.根据F9rster非辐射能量转移理论(FRET)分析了HSA和PDs之间的结合距离(r),其结果均小于4 nm,符合能量转移理论.进一步利用同步荧光、三维荧光和圆二色光谱考察了PDs与HSA结合过程中HSA空间构象的变化,结果显示,仅PDs A和C对HSA的芳香族氨基酸周围的疏水性略有增强作用.体外实验结果表明,HSA可以作为优良的载体来运输和储存PDs A~E,这为嘧啶衍生物的后续研究提供了可参考的实验数据.     

In-tip nanoreactors for cancer cells proteome profiling

Mass spectrometry (MS)-based proteome profiling is essential for molecular diagnostics in modern biomedical study. To date, sample preparation including protein extraction and proteolysis is still very challenging and lack of efficiency. Recently tips-based sample preparation protocols exhibit strong potentials to achieve the goal of “a proteome in an hour”. However, in-tip proteolysis is still rarely reported and far from ideal for dealing with complex bio-samples. In this work, nanoreactors encapsulated micropipette tips were demonstrated as high performance devices for fast (∼minutes) and multiplexing proteolysis to assist the profiling of cancer cells proteome. Nanoporous silica materials with controlled pore size and surface chemistry were prepared as nanoreactors and encapsulated in micropipette tips for efficient in situ proteolysis. The as-constructed device showed desirable sensitivity (LOD of 0.204 ± 0.008 ng/μL and LOQ of 0.937 ± 0.055 ng/μL), selectivity, stability (two months under −20 °C), reusability (at least 10 times), and little memory effect in MS based bottom-up proteomic analysis. It was used for comprehensive protein mapping from cancer cell lines. The number of identified proteins was increased by 18%, 22%, 52%, and 52% dealing with HepG2, F56, MCF7, and HCCLM3 cancer cells, compared to traditional in-solution proteolysis based bottom-up proteomic strategy. With the enhanced performance, our work built a novel, efficient and miniaturized platform for facile proteomic sample preparation, which is promising for advanced biomarkers discovery in biomedical study.     

Accurate Determination of Tributyltin in Tannery Wastewater by a New Procedure Using ID-HPLC–ICP-MS Combined with Low Temperature Extraction

Isotope dilution mass spectrometry is recognized as a primary method to obtain traceable values in the measurement of substances including trace elements and their organometallic compounds. This paper reports a novel method where isotope dilution high performance liquid chromatography inductively coupled plasma mass spectrometry (ID-HPLC–ICP-MS) was combined with low temperature extraction for the determination of tributyltin (TBT) in tannery wastewater from the leather industry. It has been found that the liquid–liquid extraction at very low temperature is in the favor of extraction of organotin, as the enrichment factor for low temperature (?80 °C) extraction was about 1.3 times higher than for extraction at room temperature (20 °C). The method detection limit of TBT, obtained from the proposed ID-HPLC–ICP-MS procedure after extraction with a sample volume of 7.5 by 2.5 mL of organic phase, was found to be 0.13 ng g^?1. When TBT was determined in a range of 10–1000 ng g^?1 in tannery wastewater samples, the analyte recoveries were in the range 90.1–107.2% with relative standard deviations of between 2.0 and 7.2%. Finally, the new method of ID-HPLC–ICP-MS combined with low temperature extraction was applied to the determination of TBT in actual tannery wastewater. The TBT contents from three different tanning procedures (chrome tanning, vegetable tanning and aldehyde tanning), expressed as the mean ± the expanded uncertainty (k = 2) were 378.65 ± 20.38, 110.04 ± 5.96 and 690.17 ± 35.31 ng g^?1, respectively.     

超高效液相色谱-串联质谱法鉴定猪肉的特异性肽生物标志物

以亲缘关系较近的猪、牛和羊3个物种的肌肉组织为研究对象,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS),筛选并确认了猪物种肉特异性肽生物标志物.3种纯肉样品经蛋白质提取、胰蛋白酶消化和UPLC-TripleTOF-MS分离鉴定,得到的总离子流图谱(TIC)与Uniprot蛋白质数据库对比分析,筛选出3个物种肉的3种高丰度同源蛋白和8种潜在的肽生物标志物;潜在的肽生物标志物经QTRAP-MS质谱的多反应模式(MRM)分析,最终确认了猪物种肉的5种肽生物标志物,其中3种肽生物标志物未见文献报道.     

DNA纳米结构在药物转运载体和智能载药中的应用进展

纳米材料具有荷载效率高、靶向性能好、半衰期较长等优点, 非常适于作为药物转运载体, 可有效提高药物的水溶性、稳定性和疾病治疗效果.目前, 开发具有良好生物相容性、可控靶向释放能力和精确载药位点的理想药物转运载体, 仍是该领域存在的挑战性问题和当前研究的重点.自组装DNA纳米结构是一类具有精确结构、功能多样的纳米生物材料, 具有良好的生物相容性和稳定性、较高的膜渗透性和可控靶向释放能力等优点, 是理想的药物转运载体和智能载药材料.本文总结了DNA纳米结构的发展历程、DNA纳米结构作为药物转运载体的研究现状、动态DNA纳米结构在智能载药中的应用进展, 并对其发展前景进行了展望.     

电喷雾/光电离双源型小型离子阱质谱仪的研制

构建了一套电喷雾/紫外灯双电离源离子阱质谱仪系统,用于气体和液体样品的快速检测.仪器采用非连续大气压进样技术,通过夹管阀装置来同时完成电喷雾离子和中性气态样品的采集和传输.所配备的两种电离源适合不同的分析对象,在应用上具有一定的互补性,其中电喷雾源用于溶液中极性化合物的电离,而紫外电离源主要用于分析气态有机物.本研究选择了苯甲醚、甲苯、2,4-二甲基苯胺、精氨酸、利血平和阿斯巴甜等不同类型的样品,测试了仪器在使用不同电离模式下的工作性能.结果表明,电喷雾源和紫外光电离源可用于不同类型样品的电离,在分析2,4-二甲基苯胺时还能分别生成不同类型的分子离子.两种电离源在工作时互不干扰,既能单独使用,也能同时开启,可根据检测需求随意切换工作模式,获得更全面的样品成分信息.双离子源设计是扩展小型质谱仪应用范围的一种有效途径,这种方案不会明显增加仪器的体积,却能提供更多样化的分析功能,满足对不同类型样品的检测需求.     

露天储煤场抑尘剂的制备和特性

采用聚醚二元醇和环氧树脂反应制备预聚体,然后通过预聚体和含酸性基团的聚合物(disperbyk-110)反应,再添加白色填料上色,制备出一种白色液体抑尘剂。对抑尘剂的毒理效应、成膜性能、对煤质的影响以及表面固化层的抗风蚀和抗雨淋性能进行了表征。结果表明:该抑尘剂无毒、无刺激性,喷淋过程中不会对作业人员产生有害影响;该抑尘剂喷洒于煤炭表面,能使煤炭表面形成明显的白色固化层,该固化层具有一定的韧性、抗压强度、抗风蚀和抗雨淋性能;抑尘剂的使用不会改变煤炭的原有质量。使用该抑尘剂能够避免煤炭在储存中的扬尘污染和损失,达到较好的抑尘效果。