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采用Q-Sepharose FF离子交换柱对初步纯化的Cry1Ab杀虫蛋白样品进行了多次循环精细纯化,洗脱模式为离子强度台阶梯度,流动相为Tris-HCl缓冲液加NaCl,盐浓度从0.1mol·L^-1变化到1.0mol·L^-1.结果表明,Cry1Ab蛋白在NaCl浓度为0.4mol·L^-1时从柱上被洗脱,并与杂蛋白很好地分离.色谱分离机制符合顶替色谱机制.经3次循环分离后可获得高纯度的Cry1Ab蛋白.用SDS-PAGE分析了蛋白的纯度及表观分子量,电泳胶上分离的蛋白进行原住酶切后,用基质辅助激光解析-飞行时间质谱对纯化蛋白进行肽质量谱的分析,Mascot数据库搜索结果确证了该纯化蛋白酶解肽段80%符合已知的Cry1Ab蛋白特征肽段. 相似文献
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对硝基苯甲酰甲苯胺蓝修饰碳糊电极检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 总被引:1,自引:0,他引:1
1 引 言还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH)是参与酸催化反应中的一种重要辅酶 ,大约有 2 5 0多种脱氢酸催化底物反应后 ,引起NADH含量的变化 ,通过对NADH的检测 ,可以间接测定底物浓度或酶活力。因此检测NADH是电化学生物传感器研究中一个重要课题 ,由于NADH在电极上的氧化有较大的过电位 ,如果在高电位检测会产生较大的背景电流 ,干扰测定。采用电子媒介体修饰电极 ,在低电位下催化NADH氧化已有报道。吩噻嗪类染料甲苯胺蓝 (TBO)就是其中一种电子媒介体用于NADH的电催化氧化 ,但由于水溶性大且与NA… 相似文献
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佛手多糖的化学组成及体外抗氧化活性研究 总被引:8,自引:0,他引:8
佛手经热水提取和乙醇沉淀,得佛手多糖粗品(BP).BP经Servag法除蛋白,用DEAE离子交换柱梯度洗脱分离得到BP1和BP2两个组分,经凝胶色谱和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为均一组分.用凝胶渗透色谱法测得BP1和BP2的重均分子量分别为17773和65589.薄层色谱和高效液相色谱分析表明,BP1和BP2均由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖组成.采用化学发光法在多种化学模拟体系中研究了佛手多糖清除活性氧的作用,观察了佛手多糖对HO.导致DNA链损伤的抑制作用.结果表明,佛手多糖能有效地清除O2-.和HO.等活性氧,对DNA链具有良好的保护作用. 相似文献