三种草坪草愈伤组织的诱导及其脱水处理后的蛋白分析

研究了匍匐翦股颖、高羊茅和狗牙根3种草坪草愈伤组织诱导情况,愈伤组织诱导率分别为53．0±8．7％、60．7±7．9％和14．7±4．0％,三者的愈伤组织含水量约为91．4±0．3％、94．1±0．4％和93．4±0．2％．经空气干燥法脱水处理,两种冷季型草坪草匍匐翦股颖和高羊茅愈伤组织中18．5kDa和28．7kDa的热稳定蛋白表达量增加．暖季型草坪草狗牙根中18．5kDa的热稳定蛋白表达量增加,而35kDa的热稳定蛋白表达量明显减少．经脱水蛋白的Western Blot检测,脱水处理后3种草坪草中均有脱水蛋白大量积累,分子量从18．5到34．3kDa不等．暖季型和冷季型草坪草在热稳定蛋白和脱水蛋白表达上存在的差异,可能与它们的耐旱机理及耐旱性强弱差异有关．     

解吸电喷雾电离飞行时间质谱成像分析大鼠脑组织中小分子神经化学物质的分布

采用解吸电喷雾电离飞行时间质谱成像(DESI-TOF-MSI)技术分析了大鼠脑组织中小分子神经化学物质及其代谢产物的分布。制备大鼠全脑水平切面冷冻切片,采用DESI-TOF-MSI质谱扫描成像,考察喷雾溶剂组成及比例对神经化学物质分别在正离子和负离子模式下的检测信号强度的影响。对比正、负离子模式下的高分辨质谱信息及HMDB数据库检索分析,在大鼠脑组织中共检测到25种神经化学物质及其代谢产物,并且在0.1%甲酸-甲醇喷雾溶剂条件下检测到神经化学物质分子离子峰信号强度提升最大。应用HDImaging v1.5软件对数据进行精细成像分析,结果表明,喷雾溶剂中添加0.1%甲酸对成像效果的提升程度与质谱信号强度提升趋势相似,并且本方法具有较高的重复性。其中,γ-氨基丁酸和天冬氨酸主要分布在大脑皮层中,丝氨酸在全脑分布,谷氨酰胺分布于海马区周围,神经化学物质与其前体和主要代谢产物在脑中的空间分布区域相同。本研究结果表明,DESI-TOF-MSI技术可用于大鼠脑组织中小分子神经化学物质分布的分析,为小分子神经化学物质在脑中的空间分布和空间代谢研究提供了快速、有效的可视化分析方法。     

快速高分离度液相色谱-质谱联用方法筛选Tau蛋白激酶2抑制剂

建立了测定Tau 蛋白激酶2(Tau protein kinase 2, TPK2)催化反应产物磷酸化十肽(PKpTPKKAKKL)的快速高分离度液相色谱-质谱方法(RRLC/MS)用于筛选TPK2抑制剂. 反应溶液总体积为50 μL, 将终浓度为20 nmol/L的TPK2与终浓度为5 μmol/L的底物十肽(PKTPKKAKKL)于30 ℃反应30 min, 用等体积乙腈终止反应并加入终浓度为1 μmol/L的磷酸化十肽(PKpTPKKAKKV)作为内标, 采用Agilent SB-C₁₈色谱柱, 以乙腈-水为流动相梯度洗脱分离后, 用RRLC/MS进行定性及定量分析. 该方法可通过精确定量一定时间内的酶促反应产物来反映酶活性被抑制的程度, 作为TPK2抑制剂的筛选方法, 本方法具有简单、 灵敏、 快速的优点, 能够避免光谱法筛选可能产生的假阳性结果, 可用于TPK2的先导化合物的高通量筛选.     

字典奇异值分解加权压缩感知多径信号参数估计

为提高水声信道多径参数估计的分辨率,提出了一种基于字典奇异值分解的加权压缩感知算法。对于有源声呐,根据发射信号构造字典,对字典进行奇异值分解,利用大特征值对应的特征向量构造信号子空间,然后使用信号子空间对接收信号进行滤波。对滤波结果进行加权压缩感知参数估计,得出最终时延估计结果。仿真实验表明,所提方法能够对水声多径参数进行超分辨估计,适用于任何脉冲信号。湖试处理结果显示,混响背景下该方法也有较好的多径参数估计性能,能够降低接收数据的噪声成分,提高对水声信道的多径时延、个数和幅度的估计精度。      

功率受限的常规波束形成后处理拟合方法

针对水下目标方位超分辨估计问题,提出一种功率受限(Power Constraint)的常规波束形成(Conventional BeamForming)拟合算法(PC-CBF)。PC-CBF算法通过常规波束形成获得目标方位谱数据,利用阵列响应向量对方位谱进行后处理,准确估计目标个数与目标方位。算法对接收信号的功率进行限制,获得对方位谱的欠拟合,利用凸优化进行反演卷积,估计目标的方位信息。仿真结果表明,算法性能在分辨率上优于基于半正定规划的常规波束形成算法(semi-definite programming Conventional BeamForming,sdp-CBF)和多重信号分类(MUltiple SIgnal Clasification,MUSIC)。对水池实验数据以及湖试数据处理结果显示,PC-CBF算法能够获得较窄的谱峰宽度以及较低的背景级,具有较强的方位估计分辨能力。      

入口电离质谱法快速分析南、北五味子木质素化学成分及差异标志物的鉴定

采用入口电离质谱技术,对南、北五味子的敞开式质谱轮廓进行分析,建立了快速定性中药五味子中木质素类成分及对南、北五味子快速鉴别的方法.结果表明,利用四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱结合入口电离技术,仅采用Full MS扫描方式,在复杂基质中可快速分析南、北五味子中的共9种木质素类化学成分并通过特征差异性标志物安五脂素对南五...     

超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱分析法对大鼠血浆中三氯生的代谢和动力学研究

三氯生是一种被广泛应用在家庭卫生用品中的抗菌消毒剂。虽然其本身不具有很强的毒性,但其在生物体内的代谢变化是否对生物和人体有害我们还不得而知。因此,研究三氯生在动物体内的代谢与动力学情况是具有重要意义的。本文采用超高效液相色谱串联三级四极杆质谱法来测定口服给药(5 mg/kg)后大鼠血浆中的三氯生的含量及其代谢产物。相对于多反应监测(MRM)技术,尽管其有较好的最低检测限,但选择离子监测(SIR, 又称为SIM)有更好的方法验证参数。在本试验中,选择离子监测方法检测限为10.8 ng/mL,方法的回收率、准确度、精密度和重现性都较高。用该方法测定的三氯生在大鼠体内的消除半衰期为(48.5±10.5) h。同时,还鉴定出其三氯生血浆中有分别被羟基化加磺酸化、葡萄糖醛酸化以及磺酸化的4个代谢产物。     

基于快速高分辨液相色谱-质谱的中波紫外线辐射诱导大鼠急性光损伤的代谢组学研究

利用快速高分辨液相色谱-四极杆-飞行时间质谱( RRLC-Q-TOF-MS)联用技术结合多元统计分析方法,考察在中波紫外线( Ultraviolet B, UVB)辐射前后,大鼠尿液中内源性代谢物谱的变化,研究UVB辐射导致急性光损伤的生理机制。急性光损伤大鼠模型由窄谱中波紫外线光源(TL-01,峰值312 nm)照射,采用离心沉降后四倍稀释法处理尿液样本, Supelco Ascentis? Express C18色谱柱,水(含0.1％甲酸)与乙腈为流动相梯度洗脱,液相色谱-串联质谱分析测定。利用主成分分析( PCA)法、聚类分析( CA)法等对辐射前后的大鼠尿液样本进行代谢轮廓分析,寻找对分组贡献大的差异代谢物及通路,并阐明其作用机制;运用偏最小二乘判别分析( PLS-DA)法建立预测模型,考察此模型在UVB致光损伤模型诊断上的预测能力。多元统计分析结果显示,空白对照组与UVB模型组能够获得很好地区分,通过将差异代谢物与数据库、串联质谱数据及标准品比对,发现并鉴定出11种潜在生物标记物,表明UVB辐射可影响正常大鼠的鞘脂类代谢、核酸代谢、亚油酸代谢、氨基酸代谢等通路,这些差异代谢物对UVB辐射致光损伤类疾病的诊断具有较好的预判能力。     

光激发金属配位四苯基卟啉瞬态吸收和衰减动力学性质研究

以四苯基卟啉为实验模板, 结合稳态吸收光谱、 荧光光谱、 瞬态吸收光谱、 动力学数据及理论计算结果研究了光激发4种金属配位卟啉的光谱性质. 光激发后, 四苯基卟啉化合物TPP-2H, TPP-Zn和TPP-Mg稳态吸收光谱Soret带谱峰强度均明显降低, TPP-Ni吸收强度由0.3 a.u.增至1.3 a.u., TPP-FeCl谱峰变化较小. TPP-2H和镁、 锌配位卟啉的瞬态吸收光谱Soret带出现明显负峰, 激光激发后其瞬态中间体的消光系数(ε_t)小于基态的消光系数(ε_G), ΔOD值为负值; 3种卟啉正负峰微秒级衰减动力学过程表明, 光激发后分子产生较为稳定的中间态, 有利于光电转换或光反应. 实验和理论研究表明, 金属卟啉光学性质差异由金属配位空轨道和电子排布引起. 以上卟啉光学性质可协助理解光合作用过程, 并为选择光电转换新型卟啉材料的配位金属提供实验支持.     

乌头碱的代谢产物去氧乌头碱的生物转化及其电喷雾串联质谱

采用人肠内细菌和乌头碱体外温孵的方法, 探讨去氧乌头碱在人肠内的生物转化. 利用离子阱和傅里叶变换离子回旋共振质谱直接分析去氧乌头碱的转化产物. 乌头类生物碱及其代谢产物在正离子电喷雾质谱条件下形成质子化分子([M+H]+), 通过多级串联质谱进行结构表征. 去氧乌头碱可被人肠内细菌转化, 通过脱酰基、脱甲基脱羟基以及酯化反应产生新型的单酯型、双酯型和脂类生物碱等10余种代谢产物. 双酯型的去氧乌头碱的毒性较高, 当它被肠内细菌转化为单酯型和脂类生物碱时会使其毒性降低.