管式磁微粒化学发光免疫分析法测定玉米样品中的黄曲霉毒素B1

开发了一种管式磁微粒化学发光免疫分析法测定玉米样品中黄曲霉毒素B1的方法,该方法使待测玉米样品中的黄曲霉毒素B1、辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素B1与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的黄曲霉毒素B1单克隆抗体在均相体系中发生竞争性免疫反应,再加入用抗FITC抗体包被的磁微粒作分离剂,抗原抗体复合物结合在磁微粒上,在磁场中经分离、洗涤后加发光底物,检测发光强度,测定玉米样品中黄曲霉毒素B1的含量.此方法标准曲线线性范围为0.05～5ng/mL,检测限为0.02ng/mL,批内相对标准偏差小于9%,批间相对标准偏差小于15%,具有良好的稳定性和重现性.     

管式磁性微粒子化学发光免疫分析法测定人尿液中的雌三醇

待测尿液中的雌三醇、辣根过氧化物酶标记的雌三醇与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的兔抗雌三醇抗体在均相体系中发生竞争性免疫反应,再加入用羊抗FITC抗体包被的磁微粒,反应生成物结合在磁微粒上,在磁场中经分离、洗涤后加发光底物,检测发光强度(RLU),测定尿液中雌三醇的含量。通过对检测条件的优化,建立了磁性微粒子化学发光免疫分析法测定人尿液中雌三醇的方法,并对正常男性、女性和孕妇的尿液中雌三醇含量进行了测定。结果表明,本方法的线性范围为1～100μg/L,检出限为0.25μg/L,具有很高的灵敏度;批内相对标准偏差<14%;批间相对标准偏差<7%,具有良好的稳定性和重现性。     

循环肿瘤细胞分离捕获方法研究进展

循环肿瘤细胞在肿瘤的发展过程中脱落进入循环系统中,在肿瘤的侵袭转移中起着重要作用。许多研究结果已经证实其在肿瘤转移的诊断和预后、药物研发、个体化治疗及其探索肿瘤转移机制等方面具有潜在的价值。循环肿瘤细胞在循环系统中的含量极低,这成为限制其临床应用的主要难点。本文综述了近年来对循环肿瘤细胞的捕获富集的方法研究,主要包括根据物理性质和生物化学性质的方法,并探讨了各种方法的优缺点,展望了其应用前景和发展方向。     

基于微流控芯片-质谱联用的细胞分析研究进展

微流控芯片与质谱联用为细胞研究提供了一个很好的研究平台.质谱的高灵敏度和对化合物独特的鉴别能力可以从复杂的化学信息背景中筛选识别出微量目标物,是细胞分析理想的检测手段.本文重点综述了近年来基于微流控芯片-质谱联用技术的细胞研究进展,从芯片-电喷雾质谱(ESI-MS)接口技术、集成化的样品前处理技术、细胞的药物代谢和细胞相互作用研究及基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI-MS)的细胞分析应用等方面总结了最新的方法和技术发展.并展望了芯片-质谱联用新技术应用于细胞分析的可能性.     

前言

<正>质谱分析是通过将待测样品离子化再测定各组分离子的质荷比来进行分析的一种技术.自从1912年J.J.Thomson制成第一台质谱仪,100多年来科学家们不断探索、改善仪器性能,拓宽了质谱分析的应用领域.早期的质谱分析主要应用于同位素测定和无机元素分析,20世纪40年代以后初步应用于有机物分析.20世纪60年代出现的气相色谱-质谱联用以及70年代出现的液相色谱-质谱联用分析,使质谱检测的性能快速提升,应     

雌激素类内分泌干扰物的液相色谱-质谱分析样品前处理方法

本文对液相色谱-质谱分析过程中雌激素的样品前处理方法进行论述,内容涉及环境雌激素的样品前处理方法和近年来的应用。引用文献77篇。     

微板式化学发光酶免疫分析法测定人血清中癌胚抗原

采用辣根过氧化物酶(HRP)催化鲁米诺(luminol)-H2O2化学发光体系,建立了一种测定人血清中癌胚抗原(CEA)的高灵敏度、高特异性、简便快速的微板式化学发光酶免疫分析方法。对免疫反应条件、酶结合物稀释度、发光反应时间、封闭液等进行了考察和优化。采用双抗体夹心法,室温静置1h,洗涤后加入100μL发光底物液,10min后检测。该方法的线性相关系数为0.9998;最低检出限为0.57μg/L;批内和批间变异均在10%之内;低、中、高3个不同浓度值样品的平均回收率分别为107.4%、93.3%和104.5%。使用本方法与进口发光试剂盒对40份人血清样品进行测定,结果表明,本方法显示了良好的相关性,其相关系数为0.9115。表明本分析体系稳定可靠,可用于商品化诊断试剂盒的开发和应用。     

化学发光酶免疫法测定游离三碘甲腺原氨酸

以辣根过氧化物酶为三碘甲腺原氨酸类似物的标记物,鲁米诺为化学发光反应底物,建立了一种高灵敏度化学发光免疫检测游离三碘甲腺原氨酸的方法。该法线性范围为0.90~80 ng/L,批内变异小于12.1%,批间相对标准偏差均小于15%,其余各项指标均良好。利用本法对血清样品进行了测定,关于甲状腺机能亢进组病人的临床诊断符合率达到83.3%。与其它化学发光免疫分析方法比较所得相关系数为0.9005。在方法条件选择上,以尽可能保持游离激素和蛋白结合激素之间的平衡为原则,提高游离三碘甲腺原氨酸浓度测定的准确性。     

微板式化学发光酶免疫分析法临床测定人血清中孕酮

将抗兔IgG(即二抗)物理吸附于聚苯乙烯微孔板上作为通用固相,通过免疫反应制备固相抗体。采用辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,建立了一种高通量、简便、快速的化学发光酶免疫分析方法用于临床测定人血清中的孕酮。对各种影响因素如免疫试剂的稀释度、发光底物选择、发光反应时间及温育条件等进行了考察和优化,最终选定的实验条件:孕酮抗体和HRP标记物的最佳稀释度分别为1∶100000和1∶15000;选用Ⅱ号发光底物,发光反应10min后测定;37℃水浴条件下温育1h。对建立的方法进行了评价。该方法的灵敏度为0.08μg/L;批内和批间相对标准偏差均在15%之内;低、中、高3个不同浓度值样品的平均回收率分别为101%、101%和94.4%(在87.8%～108%之间)。使用本方法和经典的放射免疫法同时对36份人血清样品进行测定,结果显示,本方法与放射免疫分析方法相关性良好,其相关系数为0.9502。     

以发光二极管为光源的毛细管电泳芯片-光纤耦合荧光检测微流控分析系统

自行设计组装了简单小型化的芯片毛细管电泳-光纤耦合激光诱导荧光检测系统。以蓝色发光二极管为光源,借助光纤来传导激发光,并通过在芯片上加工与分离通道相垂直的光纤定位通道,实现了激发光在芯片上检测点的准确定位。当光纤定位通道末端与分离通道之间的距离为190μm时,激发光在检测点的光斑直径测定值仅为185μm。以荧光素为标准样品考察了该检测系统的各性能参数,连续5次进样,电泳分离的峰面积标准偏差(RSDs)为6.8%,荧光素的检出限为6μmol/L。说明该检测系统具有低噪音和重现性好等优点。利用该检测系统,快速分离了异硫氰酸荧光素标记的儿茶酚胺样品。