质谱成像方法及其在临床研究中的应用

生物组织质谱成像技术(imaging mass spectrometry,IMS)是一种分子成像技术,它与荧光标记的激光共聚焦、整体动物放射自显影术和正电子发射断层扫描等其它分子成像不同,不再使成像局限于特异分子,而是面向组织中任何分子,不用荧光或放射性同位素标记,不需要进行蛋白质或多肽提取等复杂的样品前处理.     

纳升电喷雾串联质谱"序列对接法"确定多肽的加钠位点

用QuattroM icro三级四极串联质谱分析常见的20种氨基酸的加钠效果。结果表明,绝大多数氨基酸与钠离子的非共价键结合力很弱甚至没有,但脯氨酸和苯丙氨酸很容易形成加钠离子峰。采用“序列对接法”测出重组人酸性纤维细胞生长因子(rh-a FGF)C-端肽段的全序列,并确定钠离子的加成位点为该肽段的第6位脯氨酸(6Pro)。通过酸化样品溶液获得无加钠、无序列间隙的该肽全序列,与加钠肽段的序列一致。     

双向电泳-串联飞行时间质谱对急性脊髓损伤大鼠差异蛋白质的分离鉴定

为研究急性脊髓损伤的病理和修复机制,建立了正常和急性脊髓损伤大鼠脊髓组织的双向电泳图谱,确认了16个变化3倍以上的差异蛋白斑点,其中在急性脊髓损伤组蛋白斑点表达上调的10个,表达下调的6个.利用基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)成功鉴定出16个差异蛋白质,其中,6个蛋白质是新鉴定的,2个蛋白为同一蛋白的不同修饰.除髓磷脂碱性蛋白(MBP)和中相对分子质量神经丝蛋白(NF-M)已证实与脊髓损伤密切相关外,其它蛋白与脊髓损伤的关系有待研究.     

小儿肾上腺神经母细胞瘤及瘤旁组织的蛋白质组学分析

神经母细胞瘤为小儿最常见的恶性肿瘤之一,多见于2～5岁的婴幼儿,据国内外报道,其发病率占儿童恶性肿瘤的首位[1].它起源于胚胎神经嵴的交感神经元细胞,约有75%位于腹膜后肾上腺部.目前该病的死亡率较高,主要原因是误疹或确诊过晚,因此寻找敏感性高、特异性好的神经母细胞瘤分子标志物已成为其早期诊断的关键.     

纳升电喷雾串联质谱分析修饰多肽及未知多肽的结构

随着生物技术的发展,许多合成多肽药物的N-端或C-端或两端进行了修饰,以提高药效、延缓半衰期或降低副反应,这给多肽药物的结构确证带来了难度.未知多肽来源于胃癌患者的胃液提取物.本文利用Q-TOF2正交加速电喷雾串联质谱分别测定了含修饰多肽和未知多肽的序列等,成功对修饰肽和未知肽的一级结构进行了确证.     

重组人促红细胞生成素(rhEPO)一级结构的质谱分析

糖蛋白是1类由糖类和蛋白质以共价键连接而成的结合蛋白,其结构与功能研究,在生物学及医学上有着重要的意义.     

重组人纽兰格林一级结构确证与二硫键分析

重组人纽兰格林是一种临床上用于治疗慢性心衰及心肌损害的小分子多肽类新药,结构确证是其质量控制的重要内容,包括精确相对分子质量、N-端序列、C-端序列等.     

代谢组学分析技术及其在几类重大疾病研究中的应用

代谢组学正成为生物医学研究领域的新热点。各种代谢组学分析技术各有优缺点,配有低温探头的核磁共振、混合型串联傅里叶变换质谱以及多种联用技术将成为代谢组学研究的关键技术。目前,大量多维代谢组学数据的分析方法和专用软件急待开发完善。代谢组学在肿瘤,老年痴呆症、心血管疾病、肝肾脏类疾病等研究中的应用取得一定进展,疾病代谢组学具有良好的发展前景。     

用电喷雾质谱法监测重组人肿瘤坏死因子中二硫键的还原过程

应用电喷雾质谱方法动态监测了用巯基乙醇及二硫苏糖醇还原重组人肿瘤坏死因子中二硫键的全过程,表明使用巯基乙醇还原二硫键速度较二硫苏糖醇快,并且在还原过程中有质量加和产物生成,还原过程易于观察,可为进一步对蛋白质酶切进行结构鉴定提供监测方法;利用该法还可测定分子中二硫键的数目。     

生物组织质谱成像方法的建立及其在微波辐射后大鼠海马组织的蛋白组分析中的应用

通过探讨影响质谱成像实验的主要因素,建立了优化的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的生物组织质谱成像方法。优化的实验条件为:基质为SA;V(乙腈)∶V(水)=1∶1为溶剂,基质浓度20g/L。质谱分析条件:线性正离子模式,激光能量范围为30%~50%,照射200次,采样点间距200μm。将本方法用于高功率微波辐射后大鼠海马的蛋白组分析,获得了正常和微波辐射后大鼠海马组织质谱图像。对照组每张切片获得5902张质谱图,320张组分质谱图像;模型组每张切片获得5993张质谱图,346张质谱图像。自编了数据分析软件计算Hits值分布,Hits值的高低与组分的分布以及量有关系。统计分析表明,差异分子199个,其中上调194个,下调5个。这些差异分子的发现对于明确微波辐射致伤效应和致伤机理的研究具有重要意义。