过氧化物酶新型荧光底物3,4-二氢-2(1H)-喹喔啉酮的反应机理及性能的研究

合成了过氧化物酶新型荧光底物3,4-二氢-2(1H)-喹喔啉酮(DHQXL). 在过氧化物酶催化下,该化合物可被H₂O₂氧化生成强荧光物质2(1H)－喹喔啉酮(QXL). 用高压液相色谱法分离得荧光产物纯品,经核磁共振谱和质谱证实其结构,确证了提出的酶催化反应机理. 对该化合物作为荧光底物的性能研究表明,它是一个很有应用前景的过氧化物酶的新型荧光底物.     

吗啡的控温相分离胶体金标记免疫分析

首次将胶体金作为标记物引入相变免疫分析中,建立了吗啡免疫分析的新方法。该分析方法是将吗啡抗体与温度敏感型水凝胶偶联,胶体金标记吗啡全抗原,再进行相变分离,最后用可见吸收光谱仪进行检测,本方法的两个重要特点是：（１）利用温敏水凝胶的相变特性进行均相反应和异相分离。缩短了免疫反应时间,简化了步骤;（２）利用胶体金快速稳定吸附蛋白质的特性进行标记,利用胶体金本身的颜色,可进行定性检测,或者是用常规的可见吸收光谱仪进行定量检测,对仪器要求简单,适用于临床检测的要求。     

应用于检测体液中葡萄糖含量的微生物传感器研究

利用某些微生物代谢过程中产生酶的特点,筛选出能够大量生成葡萄糖氧化酶 的地衣芽孢杆菌,并将其固定在Sephadex 100或海藻酸纳-氧化钙（载体）上,首 次研制成微生物酶传感器。它不仅具有酶传感器的所有优点,同时也克服了酶传感 器的缺点,使用寿命长,性质稳定,成本低,易于保存等。通过优化微生物和其代 谢所产生的葡萄糖氧化酶的固定化方法和利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖产生过氧化 氢的反应机理,建立了模拟酶（hemin）催化荧光底物N,N’-二腈甲基邻苯二氧（ DCM-OPA）检测体液中葡萄糖含量的荧光传感器。     

轴向配基对HRP模拟酶Hemin催化荧光及化学发光反应影响的研究

以氯化血红素作为辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）的模拟物,对二十种氨基酸和其他含氮有机配体的轴向配位效应进行了研究。发现在氯化血红素催化的荧光和化学发光体系中,组氨酸和咪唑均使ｈｅｍｉｎ的催化活性显著提高,而酪氨酸,色氨酸,Ｌ－半胱氨酸及卤代烷基吡啶等具有淬灭效应。     

生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定双酚A

建立了可用于快速、灵敏地检测双酚A的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法,测得最佳实验条件为包被抗原浓度为13.8mg/L、抗体稀释为2.4×105倍,生物素化二抗和酶标亲和素的最佳稀释倍数分别为2000倍和500倍。在优化条件下,方法的线性范围0.2~1000μg/L;最低检出限0.05μg/L。所建立的方法用于食品和唾液中双酚A含量的测定,样品处理简单,结果满意。     

DTPA－Eu~（3＋）螯合物在核酸杂交分析中的应用

报道了靶ＤＮＡ／生物素化λＤＮＡ探针／亲合素／Ｂｉｏ－ＢＳＡ（ＴＧ）－ＤＴＰＡ－Ｅｕ~（３＋）体系在核酸杂交分析中的应用。亲合素做为连结杂交体与Ｂｉｏ－ＢＳＡ－ＤＴＰＡ－Ｅｕ~（３＋）或Ｂｉｏ－ＴＧ－ＤＴＰＡ－Ｅｕ~（３＋）的桥，生物素和ＤＴＰＡ－Ｅｕ~（３＋）均标记在载体蛋白（ＢＳＡ，ＴＧ）上。优化了分析条件，比较了己二胺、乙二胺转胺化探针及载体蛋白对杂交分析的影响。方法灵敏度高（１ｐｇ／ｗｅｌｌ靶λＤＮＡ），重现性较好（ＲＳＤ＝５．７％，ｎ＝６）。     

核酸对邻菲Luo啉的荧光猝灭及其分析应用

邻菲Ｌｕｏ啉受到２３０ｎｍ及２６７ｎｍ紫外光激发，在３６７ｎｍ处产生一荧光峰。而天然和热变性鱼精子脱氧核糖核酸以及酵母核糖核酸的加和会猝灭邻菲Ｌｕｏ啉的这一荧光发射。实验表明，该体系可在较宽的范围内灵敏地测定核酸。     

NIPA系温度敏感水凝胶及分析应用

本文考察了近几年来，以Ｎ－异丙基丙烯酰胺（ＮＩＰＡ）为基础的温敏材料的发展情况，并对相关的理论研究和合成方法进行了讨论，对智能材料的开发、药物释放、酶法分析及免疫分析诸方面的应用进行了简单的总结。     

铜离子配位的分子印迹聚合物的分子识别特性研究

为了探讨金属配位分子印迹聚合物的识别机理,提高了分子印迹聚合物分离的选择性与亲和性,制备了金属铜离子与2,2‘－联吡啶配合物的分子印迹聚合物,并用平衡吸附法系统研究了分子印迹聚合物对铜（Ⅱ）－2,2‘-联吡啶配合物的识别。证明印迹聚合物对铜（Ⅱ）-2,2‘-联吡啶具有选择性识别能力,Scatchard分析显示在聚合物中存在两类不同的结合位点,求得结合位点的离解常数和最大结合量,并研究了识别过程的动力学。结果表明金属配位分子印迹聚合物有较高的特异性识别能力和较快的动力学结合过程。     

脱氧核糖核酸和核糖核酸与铽离子的荧光反应及其在分析中的应用

本文提出了一种简单灵敏的测定DNA和RNA的方法。实验结果表明RNA可直接与铽离子发生荧光反应,但DNA只有在发生变性之后才能发生同样的反应。酸变性的最佳pH范围在2.2～2.8之间,通过实验确定了荧光反应的最佳条件。在最佳条件下测定DNA和RNA的线性范围在0.5～20.0μg/ml,标准偏差在5％以內。小牛胸腺DNA和鱼精子DNA在酸变性时其对铽离子荧光增强效应提高数十倍,而RNA变性前后对铽离子荧光增强效应变化不大,这本身反映了DNA与RNA二级结构的不同。利用DNA和RNA在酸变性时对Tb(Ⅱ)荧光增强变化的不同可在一定量的DNA存在下测定RNA或在一定量的RNA存在下利用差减法测DNA。