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传统的抗IgG-Fc单克隆抗体制作过程繁琐、耗时长且批间差异大,极大的限制了其应用。因此寻找一种抗IgG-Fc单克隆抗体的替代元件是十分必要的。本研究基于微孔板指数富集的配体系统进化技术(微孔板-selex),设计了针对抗IgG-Fc蛋白ssDNA适配体的筛选方案。交替包被5种IgG单克隆抗体于酶标孔作为筛选靶分子,将从靶分子上洗脱的核酸适配体作为模板进行PCR扩增,生物素-链霉亲和素ELISA测定第3,7,13,14,16,18轮筛选获得ssDNA文库与内酰胺酶单克隆抗体的结合能力,并将第19轮筛选获得的ssDNA文库进行TA克隆验证、高通量测序。经过19轮筛选,得到69796条抗IgG-Fc蛋白的适配体,选取出现频率最高的ap-1(178次)、ap-2(129次)、ap-3(58次)体外合成并在其5,端标记生物素,经ELISA鉴定3条适配体分别与5种IgG单克隆抗体有着较强的结合能力,并与3%BSA几乎不结合。Ap-1结合能力最强,被认为是本次筛选得到最佳抗IgG-Fc蛋白核酸适配体。实验结果表明本文筛选获得抗IgG-Fc蛋白的核酸适配体,具有成为抗IgG单克隆抗体替代元件的潜力。 相似文献
104.
将金属氧化物蒸汽合成法(MetalOxideVapourSynthesisMOVS)制各的Ni-Mo(MOVS)-P/Al2O3催化剂用于喹啉的加氧脱氮(HDN)。结果表明,与常规方法制备的同类催化剂相比,MOVS催化剂具有较高的HDN活性,主要表现在C-N键断裂和苯环加氢催化活性的提高。在负载高含量MoO3方面,MOVS方法还有待进一步完善。文章还讨论了制备条件(酸度,载体种类等)对催化活性的影响。 相似文献
105.
二氧化硅纳米与微米颗粒作为固定化酶载体的生物效应 总被引:3,自引:1,他引:3
分别将二氧化硅纳米颗粒(SiNPs)与微米颗粒(SiMPs)作为固定化载体, 选择多聚酶牛肝过氧化氢酶(CAT)和单体酶辣根过氧化物酶(HRP)作为酶模型, 通过考察酶固定化后在酶活回收率、热稳定性、 酶促反应最适温度以及酶在水-有机溶剂混合体系中催化能力的变化, 对载体与酶所产生的生物效应差异进行了系统研究. 酶活回收率结果表明, SiNPs显示出比SiMPs优越的对酶无选择性的高生物亲和性, 而SiMPs则能使固定于其上的酶热稳定性大幅度提高, 且二者都能使固定化酶在有机相中的稳定性得到明显增强. 但酶促反应最适温度的变化结果表明, 对不同类型的酶所产生的生物效应则表现出无规律性. 相似文献
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横向加热石墨炉的分析性能研究 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了横向加热石墨炉的恒温性能和分析性能,并与Massmann型炉进行了比较,结果表明,横向加热石墨炉具有较好的恒温性能,其原子化时间短,原子化温度低,原子吸收信号的占有时间短,特征质量m0值低。 相似文献
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离子交换树脂在湿法冶金中的应用 总被引:14,自引:0,他引:14
本文简要综述了离子交换树脂在贵金属、稀有金属、稀土金属、铀及其它放射性核素等金属的湿法提取分离与纯化中的应用。 相似文献
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