天然纤维素发酵残渣诱导高活性纤维素酶的研究

用天然纤维素发酵残渣培养木霉 Trichoderma sp.T_(22),生产高活性纤维素酶,并讨论了影响纤维素酶诱导合成的诸因素。发酵残渣连续使用4次,纤维素酶的滤纸酶活性分别提高了32.8%,56.0%,29.3%和1.7%。     

氧化硫硫杆菌重组质粒pSDT125的构建及其在大肠杆菌之间的转移

对氧化硫硫杆菌(Thiobacillus thiooxidans)隐蔽性质粒pTt12进行了限制性酶切分析,并绘出了限制性酶切图谱,其大小为13.7Kb.将pTt12质粒与pBR325质粒重组,得到了重组质粒pSDT125(Cm',Ap',Tc~s).氧化硫硫杆菌重组质粒pSDT125本身不具有接合转移能力,但它在广泛寄主范围的转移性质粒RP4的带动下以较高的频率在大肠杆菌(Escherichia coli)之间转移,表明在氧化硫硫杆菌质粒pTt12上存在着与接合转移有关的DNA序列.     

一株热纤梭菌的分离及其纤维素分解活性的初步研究

从牛粪中分离到一株能分解纤维素的高温厌氧梭状芽孢杆菌。该菌接触酶阴性,革兰氐染色阴性。细胞杆状或稍弯(5～10×0.6～0.8μm)。芽孢卵圆形,端生,直径为1.0～1.3μm。极生丛鞭毛,运动。老龄时菌体常呈长丝状(15～30×0.4～0.6μm)。以断裂方式繁殖。最适生长温度为60～65℃,最适pH为6.5～7.0。发酵产物有H_2、CO_2,乙酸、甲酸、乳酸和乙醇等。发酵液中无色素。在纤维素琼脂滚管中形成透明、直径为5～l5mm的圆形分解圈。该菌株在以蛋白胨为唯一碳源和氮源时不生长,能迅速利用葡萄糖或纤维二糖生长。在纤维素上生长时产生孢外纤维素酶,在纤维二糖或葡萄糖上生长时不产生纤维素酶。将在纤维二糖或葡萄糖上旺盛生长的菌接入纤维素培养基中时,需经过10天以上的延迟期才能恢复纤维素分解能力,说明该菌株的纤维素酶是诱导酶。酶的最适温度为65℃,pH为7.2。该菌株的形态、生理生化及酶学性质与Clostridium thermocgllum十分相似,鉴定为同一个种。     

混合培养中几株真菌对氧化硫硫杆菌生长和硫的氧化的影响

氧化硫硫杆菌与几株真菌(红酵母、青霉和曲霉)混合培养可以促进氧化硫硫杆菌的生长,尤其在生长早期,缩短了延迟生长期,增加了细胞得率,加速了硫的氧化速度。0.2mM丙酮酸对于氧化硫硫杆菌具有明显的抑制作用,但在混合培养条件下,由于丙酮酸被异养真菌所利用,因而不同程度地解除了对氧化硫硫杆菌的抑制作用。     

斜卧青霉纤维素酶的研究——Ⅰ.JU_1菌株的产酶及酶作用条件

目前国内外对纤维素酶的研究多集中于木霉。但木霉毒性嫌疑大,在食品发酵工业中的应用受到限制。我们通过筛选和诱变选育,得到了一株斜卧青霉的纤维素酶抗降解物阻遏高产突变株—JU1,产酶能力近似于国内外的一些优良木霉菌株。对它的产酶条件及酶作用条件做了进一步研究。材料和方法     

多能硫杆菌RubisCO基因（rbcL－rbcS）的克隆及限制性内切酶图谱分析

以光合细菌圆球状红杆菌Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｏｄｅｓ的ｒｂｃＬ－ｒｂｃＳ基因为探针，与多能硫杆菌（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓｖｅｒｓｕｔｕｓ）染色体ＤＮＡ酶切谱带进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测到了ｒｂｃＬ－ｒｂｃＳ基因的同源序列，又以ｐＵＣ９为载体，克隆了Ｔ．ｖｅｒｓｕｔｕｓ染色体ＤＮＡＰｓｔＩ酶切片段，构建成Ｔ．ｖｅｒｓｕｔｕｓ基因文库，并从这个基因文库中筛选到了含有ＲｕｂｉｓＣＯ基因的重组质粒，将其命名为ｐＳＤＬＳ－１０，进一步对ｐＳＤＬＳ－１０进行了限制性酶切分析，作出了ｐＳＤＬＳ－１０限制性内切酶图谱     

利用担子菌提高织维废物营养价值的研究

篩选出了三株能在不灭菌条件下在麦秸等农业纤维廢物上生长的担子菌,能把廢物的蛋白质含量提高到10%以上,动物所必须的氨基酸基本齐全,无毒,养猪试验增重15%左右。     

粘球生孢噬纤维菌孢外多糖的研究

从土壤中分离到一株粘球生孢噬纤维茵,能产生大量的孢外多糖。此种多糖是由七种单糖组成的新多糖,具有良好的流变性、耐盐性。在100℃加热一小时,性能不变,在 pH2-12范围内稳定。在10立升发酵器中,转化率为31-50%,收得率为5-8克/升。经初步试验,在石油开采、食品及医药工业中有广泛用途。     

培养条件对黄孢原毛平革菌 Phanerochate chrysosporium ME—446 降解稻草木素、纤维素和半纤维素的影响

在固体培养条件下研究了培养条件对黄孢原毛平革菌Phanerochatechrysosporium ME—446降解稻草木素、纤维素和半纤维素的影响.试验采用正交设计.结果表明,ME—446菌株优先降解半纤维素.添加谷氨酸(3×10~(-6)mol/g草)可显著促进木素降解;基本营养盐显著促进半纤维素降解,但它们对纤维素降解均无显著影响;继续改变它们的用量并不能增大降解.高浓度的葡萄糖(5.5×10~(-4)mol/g草)极显著地抑制纤维素降解.醋酸缓冲夜pH4.5的缓冲强度对降解影响复杂.适宜的培养条件可以在获得有效木素降解的同时大幅度地减少纤维素损失。     

斜卧青霉纤维素酶的研究 Ⅱ.JU1菌株的生理特征和酶合成调控问题的初探

研究了各种培养基成分对斜卧青霉抗降解物阻遏突变株JU_1和野生菌株114—2生长和产酶的影响。初步确认了斜卧青霉的纤维素酶及其它几种糖苷酶均为部分组成型酶,不需要专门的诱导物。“诱导”只是增加酶的产量。降解物阻遏是菌株控制其产酶量的主要调节机制。抗降解物阻遏突变可能同产能代谢部分受阻有关。