石蒜单染色体的显微分离及体外扩增

建立了石蒜单染色体的分离及体外扩增的方法。石蒜根尖经卡诺固定液固定后，再用果胶酶和纤维素酶酶解处理，制得标本，在倒置显微镜下，用自制的毛细管针挑取目的的染色体。将分离的石蒜染色体放入0．2mLEppedorf管中，经蛋白酶K处理后，进行DOP－PCR扩增，获得DNA片段。琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物的长度大约为100－5000bp。此法为构建石蒜单染色体基因组库和筛选其特异性探针奠定了基础。     

泡桐生活胚囊的分离及细胞学观察

采用酶角结合机械震荡法分离出泡桐（Ｐａｕｌｏｗｎｉａ ｆｏｒｔｕｎｅｉ）的生活胚囊。选择新鲜泡桐的胚珠,用果胶酶、纤维素酶、离析酶等混和酶液在２８－３０℃下处理２．５－３ｈ,并结合机械震荡分离胚囊。经醋酸洋红染色,于Ｏｌｙｍｐｕｓ ＡＨＢ－２型显微镜下观察,用荧光染料ＤＡＰＩ染色观察生活胚囊内部组成。看到了完整的泡桐生活胚囊的形态。从形态结构上看,胚囊内部各成分没有因酶解发生很大的变化。     

杉木单染色体扩增产物的RAPD分析

在显微操作器上微分离杉木(Cunninghamia lanceolata(Lamb.)Hook)的4条单染色体，以简并寡核苷酸为引物进行PCR扩增(DOP—PCR)，并将其DOP—PCR产物进行RAPD分析。结果表明，不同染色体扩增产物间有明显多态性；用RAPD-PCR的方式可反应出不同染色体遗传信息的差异，从这些差异中可能找到属于某单染色体的特异信息，进而在分子水平上对染色体进行编号。