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在模拟动物体生理条件下,研究As(Ⅲ)和As(V)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.用氢化物发生.超低温捕集塬子吸收分光光度法测定平衡透析后As(Ⅲ)或As(V)的浓度,用Scatchard方法分别处理实验数据,确定结合部位和结合常数.发现当As(Ⅲ)浓度(CAs(Ⅲ):CBsA≤1:1)较低时,在BSA中有1.3个强结合部位,结合常数为1.7×10^6,为强结合;当As(Ⅲ)的浓度(cAs(Ⅲ):cBSA≥2:1)较高时,没有明显的特征结合点,表现为弱结合.而As(V)与BSA无任何结合作用. 相似文献
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结核分枝杆菌esat6-cfp 10融合基因的克隆表达及纯化 总被引:1,自引:1,他引:1
获得esat6-cfp 10重组蛋白,为研究其在结核病诊断和预防中的作用奠定一定基础。以结核杆菌H37,Rv基因组DNA为模板,克隆cfp10基因,将其插入到pGEM-7ZF( )克隆载体后与esat6基因连接,构建含有esat6和cfp10融合基因的克隆载体esat6-cfp 10。酶切消化esat6-cfp 10重组质粒,将esat6-cfp 10基因亚克隆到pPROEX^TM HTb原核表达载体,经IPTG诱导后,可表达出分子量约28kD的esat6-cfp 10融合蛋白,重组蛋白经镍柱纯化后,得到了高纯度的esat6-cfp 10融合蛋白。Western blot证明表达重组蛋白有较好的免疫原性。 相似文献
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研究了朱砂对大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的影响.将32只Wistar大鼠随机分为低、中、高剂量组和对照组,朱砂灌胃给药14天后,采用高效液相色谱法测定大鼠脑组织中谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)和牛磺酸(Tau)的含量,并计算兴奋毒性指数(EI)的变化.与对照组相比较,脑组织中氨基酸类神经递质含量均呈下降趋势,其中Asp和Gly的中、高剂量组差异有统计学意义(P0.05),Tau和GABA的高剂量组有统计学差异(P0.05),Glu和EI所有剂量组均有统计学差异(P0.05).朱砂对氨基酸类神经递质具有一定的抑制作用. 相似文献
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从大鼠海马组织提取总RNA后,测定了不同时间和温度下保存及3次循环冻融后RNA的浓度和纯度,并分析了其完整性;探讨了保存时间、保存温度及反复冻融对大鼠海马组织总RNA质量的影响.结果表明,不同条件下保存及冻融3次后RNA浓度较首次检测值均有所降低,4℃下保存60d标本中的RNA浓度明显低于对照组(P<0.05),其他组未见显著性差异;各组RNA的OD 260/OD280在1.8~2.0之间.在-20℃和-70℃下分别保存30d和60d,以及24h冻融3次后的样品RNA的完整性较好;但4℃下保存的两组样品的RNA发生分解.RNA在4℃和-20℃下分别保存30d和60d后,相应的RE[(不同条件下保存后的样品浓度-初始浓度)/初始浓度]值均大于15%,而-70℃下保存30d、60d以及在24h内冻融3次后的RE值均小于15%.据此可知,大鼠海马组织总RNA样品可在-70℃下保存60d,反复冻融3次后总RNA质量基本不变. 相似文献
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在模拟动物体生理条件下,研究As(Ⅲ)和As(V)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法测定平衡透析后As(Ⅲ)或As(V)的浓度,用Scatchard方法分别处理实验数据,确定结合部位和结合常数.发现当As(Ⅲ)浓度(cAs(Ⅲ)∶cBSA≤1∶1)较低时,在BSA中有1.3个强结合部位,结合常数为1.7×106,为强结合;当As(Ⅲ)的浓度(cAs(Ⅲ)∶cBSA≥2∶1)较高时,没有明显的特征结合点,表现为弱结合.而As(V)与BSA无任何结合作用. 相似文献
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利用超高效液相串联质谱法(UPLC-MS/MS)对牛肉中牛血清白蛋白(BSA)和马肉中马血清白蛋白(ESA)经胰蛋白酶消化后的目标肽进行鉴定,采用多反应监测(MRM)方法对结果进行验证,建立了一种检测牛肉中掺杂马肉的方法.对UPLC-MS/MS数据的深入研究表明,共检测到9个牛特异性多肽和17个马特异性多肽.其中DAFLGSFLYEYSR(m/z 784.3,Charge 2+)和ADFAEVSK(m/z 433.7,Charge 2+)的质谱响应最好,被选为牛肉和马肉定量的靶肽.所建方法在5.5~550.0和4.875~487.5 mg/L范围内线性关系较好(r~20.99),检测限、选择性、精密度、回收率和稳定性完全满足分析要求. 相似文献
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